摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-37页 |
·转基因植物的安全性问题 | 第13-21页 |
·转基因植物的发展现状 | 第13页 |
·转基因植物的安全性争论 | 第13-15页 |
·引发转基因植物安全性的因素 | 第15-16页 |
·解决转基因安全性的策略 | 第16-21页 |
·大豆的转基因研究 | 第21-25页 |
·大豆的遗传转化方法 | 第21-23页 |
·转基因大豆的生产及应用 | 第23-25页 |
·植酸酶的研究概况 | 第25-35页 |
·植酸 | 第25-27页 |
·植酸酶的来源及分类 | 第27-28页 |
·植酸酶的性质及作用机理 | 第28-30页 |
·植酸酶基因的研究 | 第30-34页 |
·植酸酶的植物基因工程 | 第34-35页 |
·本研究的目的和意义 | 第35-37页 |
第二章 泡盛曲霉植酸酶的分离纯化及性质分析 | 第37-51页 |
·材料和方法 | 第37-42页 |
·菌株 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·试剂配制 | 第37-39页 |
·仪器 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-42页 |
·结果与分析 | 第42-48页 |
·泡盛曲霉半固体发酵 | 第42-43页 |
·磷标准曲线的绘制 | 第43-44页 |
·植酸酶蛋白的分离纯化 | 第44-45页 |
·植酸酶蛋白活性的测定 | 第45-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·小结 | 第49-51页 |
第三章 泡盛曲霉植酸酶基因克隆及在烟草中的表达 | 第51-73页 |
·材料和方法 | 第51-60页 |
·实验材料 | 第51页 |
·培养基与缓冲液配制 | 第51-53页 |
·主要实验仪器 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-60页 |
·结果与分析 | 第60-70页 |
·泡盛曲霉基因组DNA的提取 | 第60-61页 |
·植酸酶基因克隆 | 第61-66页 |
·植物表达载体的构建 | 第66页 |
·植酸酶基因转化烟草 | 第66-68页 |
·烟草中重组植酸酶的含量测定和性质分析 | 第68-70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-73页 |
第四章 表达植酸酶的无载体无标记基因大豆的获得 | 第73-94页 |
·材料与方法 | 第73-79页 |
·实验材料 | 第73-74页 |
·实验方法 | 第74-79页 |
·结果与分析 | 第79-89页 |
·无载体无标记基因的线性转化元件的获得 | 第79-80页 |
·花粉管通道法转化及T_1代PCR检测结果 | 第80-83页 |
·转化大豆T_2代PCR检测结果 | 第83-84页 |
·转植酸酶基因大豆的Southern-blotting分析 | 第84-85页 |
·植酸酶基因转录水平的检测 | 第85-86页 |
·重组植酸酶基因在T_3代转基因大豆叶片中的表达积累 | 第86-87页 |
·转基因大豆重组植酸酶耐热性分析 | 第87-88页 |
·重组植酸酶Western-blotting分析 | 第88-89页 |
·讨论 | 第89-93页 |
·小结 | 第93-94页 |
第五章 结论与展望 | 第94-97页 |
·结论 | 第94-95页 |
·创新点 | 第95页 |
·有待进一步开展的工作 | 第95-96页 |
·展望 | 第96-97页 |
附录 | 第97-101页 |
参考文献 | 第101-111页 |
攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第111-112页 |
致谢 | 第112-113页 |