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番茄酸性转化酶cDNA克隆及胞壁转化酶在植株抗寒反应中功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第一章 文献综述第14-39页
   ·植物转化酶及其编码基因第14-18页
     ·转化酶的分类第14-15页
     ·转化酶的分子结构和理化特性第15-17页
     ·转化酶基因家族第17-18页
   ·转化酶表达的特异性及调控因子第18-25页
     ·植物转化酶表达的器官和组织的部位特异性第19-20页
     ·植物转化酶表达的发育阶段特异性第20页
     ·影响转化酶表达和活性的调节因子第20-25页
   ·转化酶在植物生命活动中的作用第25-33页
     ·参与叶片光合作用的调节第25-26页
     ·参与蔗糖在韧皮部的卸载和源-库关系的建立及调控第26-29页
     ·参与贮藏器官(库)中碳水化合物组成的调节第29-30页
     ·参与细胞的渗透调节第30页
     ·参与植物生长发育的调节第30-33页
   ·植物转化酶在信号传导系统中的作用第33页
   ·转化酶与植物逆境反应第33-37页
   ·问题及展望第37页
   ·本研究选题依据和研究思路第37-39页
第二章 番茄叶片转化酶 cDNA 的克隆及其反义表达载体构建第39-55页
   ·材料与方法第39-46页
     ·实验材料第39页
     ·实验方法第39-46页
   ·结果与分析第46-53页
     ·番茄叶片总 RNA 提取结果第46页
     ·番茄转化酶基因片段的克隆第46-51页
     ·番茄转化酶基因反义表达载体pBinAR-aTIV1 的构建第51-53页
   ·讨论第53-55页
     ·保证植物总 RNA 质量第53-54页
     ·RT 引物的选择第54-55页
第三章 农杆菌介导的 LIN6 反义基因转化小番茄 MicroTom第55-64页
   ·材料与方法第55-58页
     ·植物材料第55页
     ·试剂第55页
     ·载体与菌株第55页
     ·培养基成分配制与培养条件第55-56页
     ·小番茄高效再生体系——基因转化受体体系的建立第56页
     ·番茄转化酶反义表达工程菌 EHA105/pBinAR-aLIN6 —转化供体的构建第56-58页
   ·结果与分析第58-62页
     ·3% NaClO 与0.1% HgCl2 的消毒效果比第58-59页
     ·基本培养基 MS、B5 的比较第59页
     ·IBA 和6-BA 配比对外植体不定芽再生的影响第59-60页
     ·选择压— Kan 浓度对再生的影响第60页
     ·农杆菌 EHA105/pBinAR-aLIN6 —转基因供体系统的构建第60-61页
     ·侵染菌液工作浓度的选择第61页
     ·侵染时间的选择第61页
     ·抑菌抗生素种类及用量的改进第61-62页
   ·结论与讨论第62-64页
     ·3%的 NaClO 适合番茄种子表面消毒第62页
     ·B5 比MS 更适合作为小番茄MicroTom 的再生基本培养基第62页
     ·筛选压为50mg·L~(-1)Kan第62页
     ·抑菌抗生素的确定第62-63页
     ·菌液浓度对污染率和芽再生的影响第63页
     ·确定农杆菌侵染过程中的各种重要参数第63-64页
第四章 转基因植株的鉴定第64-74页
   ·材料与方法第64-68页
     ·实验材料第64页
     ·实验方法第64-68页
   ·结果与分析第68-72页
     ·抗性芽的微量快速早期检测第68页
     ·CTAB 法提取基因组DNA 与PCR 检测第68-69页
     ·抗性植株的 Southern 斑点杂交检测第69-70页
     ·半定量 RT-PCR 检测 LIN6 的表达量第70页
     ·胞壁转化酶反义植株的酶活性检测第70-72页
   ·结论与讨论第72-74页
     ·转化植株的微量样品早期检测第72页
     ·杂交时间第72-73页
     ·Southern 斑点杂交结果第73页
     ·半定量 RT-PCR 检测第73页
     ·获得了胞壁转化酶活性明显下降的反义转化植株第73-74页
第五章 胞壁转化酶在耐低温胁迫反应中的功能研究第74-84页
   ·材料与方法第74-75页
     ·番茄叶片光合速率测定第74页
     ·番茄叶片光合色素含量测定第74页
     ·番茄叶片糖含量测定第74-75页
     ·番茄叶片转化酶活性测定方法第75页
   ·结果与分析第75-80页
     ·LIN6 反义植株低温下的光合作用第75-76页
     ·LIN6 反义植株低温下光合色素含量第76-77页
     ·LIN6 反义植株低温下糖分含量第77-78页
     ·LIN6 反义植株低温下叶片转化酶活性第78-79页
     ·不同温度下番茄叶片转化酶活性第79-80页
   ·结论与讨论第80-84页
     ·低温下番茄叶片胞壁转化酶活性同光合色素含量存在相关性第80页
     ·低温下胞壁转化酶活性同番茄叶片可溶性糖及非还原性可溶性糖正相关第80-81页
     ·低温下番茄叶片胞壁转化酶活性同光合速率正相关第81-82页
     ·番茄胞壁转化酶在低温胁迫中的作用第82-83页
     ·番茄胞壁转化酶活性的调节在番茄抗寒生产实践中的意义第83-84页
第六章 结论第84-85页
参考文献第85-98页
附件第98-100页
致谢第100-101页
个人简介第101页

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