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SUN1在小鼠减数分裂中对端粒动态变化及配子发生的功能研究

目录第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-8页
图表目录第8-11页
第一部分 前言第11-24页
     ·减数分裂前期Ⅰ第11-16页
     ·减数分裂第11-12页
     ·减数分裂前期Ⅰ第12-13页
     ·联会复合体第13-14页
     ·细胞铺展技术在细胞减数分裂研究中的应用第14-16页
     ·端粒在减数分裂前期Ⅰ中的动态变化及染色体"花束"的形成第16-19页
     ·染色体"花束"及端粒核膜附着第16-18页
     ·染色体"花束"形成的生物学意义第18页
     ·动物中的研究现状第18-19页
     ·小鼠的精子发生是研究哺乳动物中减数分裂的理想模型第19-21页
     ·精子发生的三个阶段第19-20页
     ·曲细精管的组织学结构第20-21页
     ·SUN蛋白家族第21-24页
     ·SUN蛋白概述第21-23页
     ·SUN1和SUN2蛋白第23-24页
第二部分 材料与方法第24-34页
     ·Sun1基因打靶载体的构建第24页
     ·Sun1基因剔除小鼠的建立第24页
     ·DNA抽提和Southern杂交第24-25页
     ·反转录PCR第25页
     ·SUN1蛋白特异性抗体制备、纯化和修饰第25页
     ·细胞转染、蛋白质样品的制备和Western杂交第25-26页
     ·冰冻切片第26页
     ·石蜡切片第26页
     ·苏木精-伊红(HE)染色第26-27页
     ·TUNEL分析第27页
     ·精母细胞染色体铺片第27-28页
     ·抗体免疫荧光染色第28-30页
     ·结合抗体免疫荧光染色的端粒特异性的荧光原位杂交第30-32页
     ·染色体涂抹与SYCP1和SYCP3抗体免疫荧光染色第32-33页
     ·图像拍摄及处理第33页
     ·引物列表第33-34页
第三部分 结果第34-75页
     ·Sun1基因剔除小鼠品系的建立第34-38页
     ·Sun1基因打靶过程第34页
     ·Sun1基因剔除小鼠品系鉴定第34-35页
     ·小结第35-38页
     ·SUN1蛋白是配子发生所必需的第38-44页
     ·Sun1~(-/-)小鼠胚胎发育没有明显异常第38页
     ·Sun1~(-/-)小鼠的精子发生出现异常第38页
     ·Sun1~(-/-)小鼠中精子发生被抑制在减数分裂前期Ⅰ第38-39页
     ·小结第39-44页
     ·减数分裂细线期到终变期SUN1蛋白与端粒共定位第44-52页
     ·SUN1蛋白在睾丸中的表达及分布第44页
     ·初级精母细胞中SUN1蛋白与端粒共定位第44页
     ·SUN1在减数分裂前期的动态变化过程第44-45页
     ·小结第45-52页
     ·端粒的核膜附着需要SUN1蛋白第52-55页
       ·Sun1~(-/-)小鼠中端粒的核膜附着被破坏第52页
       ·Sun1~(-/-)精母细胞中端粒蛋白Rap1及TRF1仍结合于端粒第52页
       ·小结第52-55页
     ·Sun1~(-/-)初级精母细胞中,同源染色体间正常的配对、联会及同源重组受到严重破坏第55-66页
       ·染色体间正常的配对、联会需要SUN1蛋白第55页
       ·Sun1~(-/-)精母细胞中同源染色体间的正确识别未受影响第55-56页
       ·Sun1~(-/-)精母细胞中联会复合体的延伸受到影响第56页
       ·Sun1~(-/-)精母细胞中染色体间的同源重组受到影响第56-57页
       ·小结第57-66页
     ·SUN1蛋白在小鼠卵子发生过程中的作用第66-75页
       ·Sun1~(-/-)小鼠的卵子发生被破坏第66-67页
       ·SUN1与端粒在卵母细胞中共定位,是端粒的核膜附着所必须的第67页
       ·SUN1是卵母细胞染色体同源染色体正常配对、联会所必须的第67页
       ·小结第67-75页
第四部分 讨论第75-83页
     ·SUN1蛋白与端粒的作用机制尚不清楚第75-76页
     ·SUN1蛋白可能参与传递端粒动态变化所需的动力第76-77页
     ·SUN1与SUN2蛋白在体细胞中功能互补第77-79页
     ·Sun1基因与人类不育症第79-83页
参考文献第83-88页
发表文章第88-89页
致谢第89-90页

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