目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
图表目录 | 第8-11页 |
第一部分 前言 | 第11-24页 |
·减数分裂前期Ⅰ | 第11-16页 |
·减数分裂 | 第11-12页 |
·减数分裂前期Ⅰ | 第12-13页 |
·联会复合体 | 第13-14页 |
·细胞铺展技术在细胞减数分裂研究中的应用 | 第14-16页 |
·端粒在减数分裂前期Ⅰ中的动态变化及染色体"花束"的形成 | 第16-19页 |
·染色体"花束"及端粒核膜附着 | 第16-18页 |
·染色体"花束"形成的生物学意义 | 第18页 |
·动物中的研究现状 | 第18-19页 |
·小鼠的精子发生是研究哺乳动物中减数分裂的理想模型 | 第19-21页 |
·精子发生的三个阶段 | 第19-20页 |
·曲细精管的组织学结构 | 第20-21页 |
·SUN蛋白家族 | 第21-24页 |
·SUN蛋白概述 | 第21-23页 |
·SUN1和SUN2蛋白 | 第23-24页 |
第二部分 材料与方法 | 第24-34页 |
·Sun1基因打靶载体的构建 | 第24页 |
·Sun1基因剔除小鼠的建立 | 第24页 |
·DNA抽提和Southern杂交 | 第24-25页 |
·反转录PCR | 第25页 |
·SUN1蛋白特异性抗体制备、纯化和修饰 | 第25页 |
·细胞转染、蛋白质样品的制备和Western杂交 | 第25-26页 |
·冰冻切片 | 第26页 |
·石蜡切片 | 第26页 |
·苏木精-伊红(HE)染色 | 第26-27页 |
·TUNEL分析 | 第27页 |
·精母细胞染色体铺片 | 第27-28页 |
·抗体免疫荧光染色 | 第28-30页 |
·结合抗体免疫荧光染色的端粒特异性的荧光原位杂交 | 第30-32页 |
·染色体涂抹与SYCP1和SYCP3抗体免疫荧光染色 | 第32-33页 |
·图像拍摄及处理 | 第33页 |
·引物列表 | 第33-34页 |
第三部分 结果 | 第34-75页 |
·Sun1基因剔除小鼠品系的建立 | 第34-38页 |
·Sun1基因打靶过程 | 第34页 |
·Sun1基因剔除小鼠品系鉴定 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-38页 |
·SUN1蛋白是配子发生所必需的 | 第38-44页 |
·Sun1~(-/-)小鼠胚胎发育没有明显异常 | 第38页 |
·Sun1~(-/-)小鼠的精子发生出现异常 | 第38页 |
·Sun1~(-/-)小鼠中精子发生被抑制在减数分裂前期Ⅰ | 第38-39页 |
·小结 | 第39-44页 |
·减数分裂细线期到终变期SUN1蛋白与端粒共定位 | 第44-52页 |
·SUN1蛋白在睾丸中的表达及分布 | 第44页 |
·初级精母细胞中SUN1蛋白与端粒共定位 | 第44页 |
·SUN1在减数分裂前期的动态变化过程 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-52页 |
·端粒的核膜附着需要SUN1蛋白 | 第52-55页 |
·Sun1~(-/-)小鼠中端粒的核膜附着被破坏 | 第52页 |
·Sun1~(-/-)精母细胞中端粒蛋白Rap1及TRF1仍结合于端粒 | 第52页 |
·小结 | 第52-55页 |
·Sun1~(-/-)初级精母细胞中,同源染色体间正常的配对、联会及同源重组受到严重破坏 | 第55-66页 |
·染色体间正常的配对、联会需要SUN1蛋白 | 第55页 |
·Sun1~(-/-)精母细胞中同源染色体间的正确识别未受影响 | 第55-56页 |
·Sun1~(-/-)精母细胞中联会复合体的延伸受到影响 | 第56页 |
·Sun1~(-/-)精母细胞中染色体间的同源重组受到影响 | 第56-57页 |
·小结 | 第57-66页 |
·SUN1蛋白在小鼠卵子发生过程中的作用 | 第66-75页 |
·Sun1~(-/-)小鼠的卵子发生被破坏 | 第66-67页 |
·SUN1与端粒在卵母细胞中共定位,是端粒的核膜附着所必须的 | 第67页 |
·SUN1是卵母细胞染色体同源染色体正常配对、联会所必须的 | 第67页 |
·小结 | 第67-75页 |
第四部分 讨论 | 第75-83页 |
·SUN1蛋白与端粒的作用机制尚不清楚 | 第75-76页 |
·SUN1蛋白可能参与传递端粒动态变化所需的动力 | 第76-77页 |
·SUN1与SUN2蛋白在体细胞中功能互补 | 第77-79页 |
·Sun1基因与人类不育症 | 第79-83页 |
参考文献 | 第83-88页 |
发表文章 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |