| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 1 PDE4s基因和转录 | 第9-10页 |
| 2 PDE4s的结构和功能 | 第10页 |
| 3 PDE4s在cAMP信号转导途径中的作用和活性调节 | 第10-11页 |
| 4 PDE4选择性抑制剂 | 第11-12页 |
| 第一章 人磷酸人磷酸二酯酶4B2基因的克隆 | 第12-31页 |
| 1 实验材料 | 第12-13页 |
| 2 实验方法 | 第13-25页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第13页 |
| ·RT-PCR | 第13-16页 |
| ·PCR产物的回收 | 第16页 |
| ·DNA片段的克隆 | 第16-17页 |
| ·序列的测定和检索分析 | 第17页 |
| ·PDE4B2基因的体外定点突变 | 第17-25页 |
| 3 结果与讨论 | 第25-31页 |
| ·总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·cDNA的获得 | 第26-31页 |
| 第二章 人磷酸二酯酶4B2基因的异源表达 | 第31-56页 |
| 1 实验材料 | 第31-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-47页 |
| ·PDE4B2在E.coli中的表达 | 第36-41页 |
| ·表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·目的质粒的转化 | 第37-38页 |
| ·PDE4B2重组蛋白的表达 | 第38页 |
| ·PDE4B2重组蛋白的鉴定 | 第38-39页 |
| ·PDE4B2重组蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·PDE4B2重组蛋白活性的测定 | 第40-41页 |
| ·PDE4B2在P.pastoris中的表达 | 第41-45页 |
| ·表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·目的质粒的转化 | 第42-45页 |
| ·PDE4B2重组蛋白的表达 | 第45页 |
| ·PDE4B2重组蛋白的鉴定 | 第45页 |
| ·PDE4B2重组蛋白的纯化 | 第45页 |
| ·PDE4B2重组蛋白活性的测定 | 第45页 |
| ·PDE4B2在酿酒酵母WHT中的表达 | 第45-47页 |
| ·表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·目的质粒的转化 | 第46-47页 |
| 3 结果与讨论 | 第47-56页 |
| ·PDE4B2在E.coli中的表达 | 第47-52页 |
| ·PDE4B2在Pichia pastoris中的表达 | 第52-55页 |
| ·PDE4B2在酿酒酵母WHT中的表达 | 第55-56页 |
| 全文总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 综述 磷酸二酯酶4研究进展 | 第61-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |