| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 前言（Introduction） | 第9-11页 |
| 2 材料和方法（Materials and Methods） | 第11-36页 |
| ·实验材料、试剂与仪器设备 | 第11-16页 |
| ·培养基 | 第11-13页 |
| ·26 株具有细胞毒活性的放线菌的来源及其细胞毒活性 | 第13-15页 |
| ·本实验使用的试剂与仪器设备 | 第15-16页 |
| ·宿主菌与质粒 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·常用酶和生化试剂 | 第15-16页 |
| ·主要微生物实验用试剂及来源 | 第16页 |
| ·仪器与设备 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-36页 |
| ·26 株活性菌株细胞毒活性稳定性试验 | 第16-18页 |
| ·抗肿瘤细胞活性检测 | 第16-18页 |
| ·肿瘤细胞及其培养基 | 第16-17页 |
| ·测活细胞 | 第16-17页 |
| ·培养基配制 | 第17页 |
| ·胰酶-Versene 消化液消化液配制 | 第17页 |
| ·细胞冻存液 | 第17页 |
| ·阳性对照抗肿瘤药物 | 第17页 |
| ·细胞培养方法 | 第17页 |
| ·细胞种板 | 第17页 |
| ·加样 | 第17-18页 |
| ·活性检测（MTT 法） | 第18页 |
| ·MTT 法活性检测原理 | 第18页 |
| ·MTT 法活性检测 | 第18页 |
| ·26 株活性菌株细胞毒活性稳定性分析 | 第18页 |
| ·26 株具有细胞毒活性的放线菌的来源性分析 | 第18-19页 |
| ·26 株具有细胞毒活性的放线菌的形态特征观察 | 第19页 |
| ·26 株放线菌的培养特征观察 | 第19页 |
| ·26 株放线菌在 GS 培养基上的个体形态观察 | 第19页 |
| ·根据放线菌在 GS 固体培养基上的形态特征将其分群 | 第19页 |
| ·26株具有细胞毒活性的放线菌的生理生化分析 | 第19-23页 |
| ·26 株放线菌在不同培养基上的培养特征的观察 | 第19页 |
| ·用 BIOLOG 微生物鉴定系统测定26 株放线菌对碳源的利用 | 第19-21页 |
| ·实验原理 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-21页 |
| ·选择实验路线 | 第21页 |
| ·实验操作 | 第21页 |
| ·26 株放线菌的生理生化特征分析 | 第21-22页 |
| ·淀粉水解实验 | 第21页 |
| ·纤维素水解实验 | 第21-22页 |
| ·牛奶凝固和胨化实验 | 第22页 |
| ·明胶液化实验 | 第22页 |
| ·黑色素产生实验 | 第22页 |
| ·硝酸盐还原实验 | 第22页 |
| ·菌株050642 的其余生理生化实验 | 第22-23页 |
| ·液体培养基初始pH 值对菌株050642 的生长及细胞毒活性影响 | 第22-23页 |
| ·盐度对菌株050642 的生长及细胞毒活性的影响 | 第23页 |
| ·不同温度对菌株050642 的生长及细胞毒活性的影响 | 第23页 |
| ·26 株放线菌的化学分析 | 第23-29页 |
| ·26 株放线菌的细胞壁分析 | 第23-26页 |
| ·26 株放线菌的细胞壁氨基酸分析 | 第24-25页 |
| ·细胞壁氨基酸分析原理 | 第24页 |
| ·细胞壁氨基酸分析实验方法 | 第24-25页 |
| ·26 株放线菌的细胞壁糖份分析 | 第25-26页 |
| ·细胞壁糖份分析原理 | 第25页 |
| ·细胞壁糖份分析实验方法 | 第25-26页 |
| ·放线菌的磷酸类脂分析 | 第26-29页 |
| ·磷酸类脂分析原理 | 第26页 |
| ·磷酸类脂分析方法 | 第26-28页 |
| ·菌种培养 | 第26页 |
| ·磷酸类脂提取方法 | 第26-28页 |
| ·点样与层析 | 第28-29页 |
| ·26 株放线菌16S rDNA 系统发育地位分析: | 第29-36页 |
| ·放线菌基因组 DNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·16S rDNA 的 PCR 扩增 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第31页 |
| ·16S rDNA 的转化与克隆 | 第31-34页 |
| ·大肠杆菌 DH5a 感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·纯化后的 PCR 产物与pMD18-T 载体连接 | 第32页 |
| ·连接产物的转化 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| ·质粒 DNA 的微量提取 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34页 |
| ·.1 电泳初步鉴定 | 第34页 |
| ·.2 重组质粒的 PCR 鉴定 | 第34页 |
| ·.3 重组质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·测序 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析（Results and Analysis） | 第36-55页 |
| ·26 株具有细胞毒活性的放线菌的来源及细胞毒活性稳定性分析 | 第36页 |
| ·26 株具有细胞毒活性的放线菌的来源性分析 | 第36-37页 |
| ·26 株具有细胞毒活性的放线菌的形态特征观察 | 第37-41页 |
| ·26 株放线菌在 GS 平板上的培养特征观察 | 第37-39页 |
| ·26 株放线菌在 GS 培养基上的个体形态观察 | 第39-40页 |
| ·根据放线菌在 GS 培养基上的形态特征分群 | 第40-41页 |
| ·具有细胞毒活性的放线菌的生理生化分析 | 第41-46页 |
| ·26 株放线菌在不同培养基上的培养特征的观察 | 第41页 |
| ·用 BIOLOG 微生物鉴定系统测定26 株放线菌对碳源的利用 | 第41-42页 |
| ·26 株放线菌的生理生化特征分析 | 第42-44页 |
| ·菌株050642 的其余生理生化实验 | 第44-46页 |
| ·液体培养基初始pH 值对菌株050642 的生长及细胞毒活性影响 | 第44-45页 |
| ·盐度对菌株050642 的生长及细胞毒活性的影响 | 第45页 |
| ·不同温度对菌株050642 的生长及细胞毒活性的影响 | 第45-46页 |
| ·26 株放线菌的化学分析 | 第46-48页 |
| ·26 株放线菌的细胞壁分析 | 第46-48页 |
| ·26 株放线菌的细胞壁氨基酸分析 | 第46-47页 |
| ·26 株放线菌的细胞壁糖份分析 | 第47-48页 |
| ·放线菌的磷酸类脂分析 | 第48页 |
| ·26 株放线菌16S rDNA 系统发育地位分析 | 第48-55页 |
| ·放线菌基因组 DAN 的提取 | 第48-49页 |
| ·16S rDNA 的 PCR 扩增 | 第49-50页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第50页 |
| ·16S rDNA 的转化与克隆 | 第50-53页 |
| ·16S rDNA 的连接、转化 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第51-53页 |
| ·重组质粒 DNA 电泳初步鉴定 | 第51页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·26 株放线菌的16S rDNA 序列分析 | 第53-55页 |
| 4 讨论（Discussion） | 第55-59页 |
| 5 结论（Conclusion） | 第59-61页 |
| 文献综述（一）（Summary of Literature One） | 第61-70页 |
| 文献综述（二）（Summary of Literature Two） | 第70-88页 |
| 参考文献（References） | 第88-92页 |
| 缩略语 | 第92-94页 |
| 附录（Apppendix） | 第94-133页 |
| 致谢（Acknowledgments） | 第133页 |
