中文摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
缩略词表 | 第16-18页 |
第1章:文献综述 | 第18-45页 |
·苏云金芽胞杆菌防治猪蛔虫病的研究及前景 | 第18页 |
·猪蛔虫及猪蛔虫病 | 第18-28页 |
·蛔虫的生物学分类 | 第18-19页 |
·猪蛔虫的生活史 | 第19-20页 |
·猪蛔虫的流行病学 | 第20-21页 |
·猪蛔虫病的症状 | 第21页 |
·猪蛔虫病的病理变化 | 第21-22页 |
·猪蛔虫病的诊断 | 第22-23页 |
·猪蛔虫病的防治 | 第23-24页 |
·猪蛔虫病的药物防治 | 第23-24页 |
·猪蛔虫病的综合防治 | 第24页 |
·猪蛔虫的分子生物学研究 | 第24-27页 |
·猪蛔虫的免疫研究 | 第27-28页 |
·苏云金芽胞杆菌 | 第28-45页 |
·苏云金芽胞杆菌简介 | 第28页 |
·苏云金芽胞杆菌的分类及地理分布 | 第28-29页 |
·苏云金芽胞杆菌的毒素 | 第29-30页 |
·杀虫晶体蛋白的发现 | 第30-31页 |
·杀虫晶体蛋白的形态及生物学特征 | 第31-32页 |
·杀虫晶体蛋白的结构、功能及基因分类 | 第32-35页 |
·杀虫晶体蛋白的结构、功能 | 第32-34页 |
·杀虫晶体蛋白的基因分类 | 第34-35页 |
·伴胞晶体蛋白的杀虫机制 | 第35-40页 |
·杀虫晶体蛋白的溶解 | 第36-37页 |
·晶体蛋白的酶解及活化 | 第37页 |
·活化毒素与特异受体结合 | 第37-38页 |
·昆虫中肠细胞的穿孔及裂解 | 第38-39页 |
·杀虫晶体蛋白毒素引起昆虫的病理变化 | 第39-40页 |
·杀虫晶体蛋白对动植物寄生线虫的研究应用 | 第40-45页 |
·伴胞晶体蛋白对线虫作用的发现 | 第40-41页 |
·杀线虫晶体蛋白及其基因 | 第41-43页 |
·杀虫晶体蛋白对线虫的作用机理 | 第43-45页 |
第2章:Bt伴胞晶体毒素对体外培养的猪蛔虫幼虫的毒力 | 第45-61页 |
·研究的目的和意义 | 第45页 |
·材料与方法 | 第45-49页 |
·材料 | 第45-47页 |
·菌株 | 第45-46页 |
·供试动物 | 第46页 |
·供试寄生虫 | 第46页 |
·实验所用主要仪器 | 第46页 |
·培养基 | 第46页 |
·抗生素 | 第46页 |
·主要溶液及试剂的配制 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-49页 |
·猪蛔虫感染性虫卵的培养 | 第47页 |
·苏云金芽胞杆菌晶体蛋白的制备 | 第47-48页 |
·大肠杆菌中晶体蛋白的制备 | 第48页 |
·晶体蛋白含量的测定 | 第48页 |
·晶体蛋白的SDS-PAGE | 第48-49页 |
·猪蛔虫三期、四期幼虫的获得 | 第49页 |
·猪蛔虫三期及四期幼虫的体外培养及伴胞晶体的加入 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-57页 |
·感染性猪蛔虫卵的获得 | 第49页 |
·供试菌株伴胞晶体蛋白的组成 | 第49-50页 |
·不同晶体蛋白对猪蛔虫三期幼虫的作用 | 第50-54页 |
·不同晶体蛋白对猪蛔虫四期幼虫的作用 | 第54-57页 |
·讨论 | 第57-60页 |
·关于猪蛔虫卵的培养及其感染性 | 第57-58页 |
·关于伴胞晶体毒素的溶解性 | 第58页 |
·关于伴胞晶体毒素对体外培养的猪蛔虫幼虫的作用 | 第58-60页 |
·小结 | 第60-61页 |
第3章:伴胞晶体蛋白对小鼠体内猪蛔虫幼虫不同作用方式驱虫效果的研究及其免疫定位 | 第61-73页 |
·研究的目的和意义 | 第61页 |
·材料与方法 | 第61-66页 |
·材料 | 第61-63页 |
·感染性猪蛔虫卵 | 第61页 |
·供试菌株 | 第61页 |
·供试动物 | 第61-62页 |
·主要仪器及设备 | 第62页 |
·主要试剂及配制 | 第62-63页 |
·方法 | 第63-66页 |
·苏云金芽胞杆菌晶体蛋白的制备及浓度测定 | 第63页 |
·晶体蛋白抗体的制备及纯化 | 第63-65页 |
·动物实验 | 第65页 |
·石蜡切片的制作 | 第65-66页 |
·免疫组化实验 | 第66页 |
·结果与分析 | 第66-70页 |
·YBT-1517晶体蛋白对小鼠体内蛔虫的作用 | 第66-68页 |
·YBT-1518晶体蛋白对小鼠体内蛔虫的作用 | 第68-69页 |
·感染蛔虫小鼠肝脏切片的H.E染色 | 第69-70页 |
·免疫组化方法定位YBT-1517晶体蛋白的分布 | 第70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-73页 |
第4章:晶体蛋白对猪体内蛔虫的作用及其血液理化指标分析 | 第73-82页 |
·研究目的及意义 | 第73页 |
·材料与方法 | 第73-75页 |
·材料 | 第73-74页 |
·供试菌株 | 第73页 |
·供试动物 | 第73页 |
·主要仪器设备及试剂 | 第73-74页 |
·感染性猪蛔虫卵 | 第74页 |
·方法 | 第74-75页 |
·晶体蛋白的制备及浓度测定 | 第74页 |
·感染性猪蛔虫卵对猪人工感染实验 | 第74页 |
·猪血液生理生化指标的测定 | 第74页 |
·粪便中虫卵的收集及计数 | 第74-75页 |
·数据处理 | 第75页 |
·结果与分析 | 第75-80页 |
·临床症状的观察 | 第75页 |
·各项生理生化指标的变化 | 第75-79页 |
·猪感染蛔虫后生理指标的变化 | 第75-76页 |
·猪感染蛔虫早期血液生化指标的变化 | 第76-79页 |
·LDH(乳酸脱氢酶)的变化 | 第76-77页 |
·GOT(谷草转氨酶)的变化 | 第77-78页 |
·GPT(谷丙转氨酶)的变化 | 第78-79页 |
·ALP(碱性磷酸酶)的变化 | 第79页 |
·猪粪便中虫卵计数 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
·小结 | 第81-82页 |
第5章 猪蛔虫rAs37基因的克隆及原核表达 | 第82-97页 |
·研究目的及意义 | 第82页 |
·试验材料 | 第82-86页 |
·菌种与质粒 | 第82-83页 |
·主要药品与试剂 | 第83-84页 |
·主要培养基 | 第84页 |
·引物 | 第84页 |
·酶及试剂盒 | 第84页 |
·RNA提取试剂 | 第84页 |
·质粒抽提与鉴定试剂 | 第84-85页 |
·SDS-PAGE相关溶液 | 第85页 |
·包涵体提取相关溶液 | 第85页 |
·Western-blot相关溶液 | 第85页 |
·兔抗猪蛔虫阳性血清 | 第85-86页 |
·试验方法 | 第86-89页 |
·猪蛔虫总RNA的提取 | 第86页 |
·RT-PCR法扩增rAs37基因 | 第86页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第86-87页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第87页 |
·PCR产物的克隆 | 第87页 |
·连接产物的转化 | 第87页 |
·质粒的小量制备 | 第87-88页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第88页 |
·重组表达质粒pGEX-KG-As37的构建 | 第88页 |
·As37蛋白的表达与纯化 | 第88-89页 |
·诱导表达 | 第88页 |
·表达条件的优化 | 第88-89页 |
·表达产物的SDS-PAGE检测 | 第89页 |
·包涵体的提纯与复性 | 第89页 |
·表达产物的Western-blot分析 | 第89页 |
·试验结果 | 第89-94页 |
·猪蛔虫rAs37基因的PCR扩增 | 第89-90页 |
·基因与pBS-T载体的连接与鉴定 | 第90-91页 |
·rAs37基因重组表达载体pGEX-KG-As37的筛选与鉴定 | 第91-92页 |
·pGEX-KG-As37在大肠杆菌E.coli BL21中的表达 | 第92页 |
·表达条件的优化 | 第92-94页 |
·表达产物的Western-blot分析 | 第94页 |
·分析与讨论 | 第94-96页 |
·猪蛔虫rAs37基因的克隆 | 第94页 |
·rAs37基因原核表达载体的构建 | 第94-95页 |
·融合蛋白的表达及包涵体的提取与纯化 | 第95-96页 |
·小结 | 第96-97页 |
第6章 猪蛔虫重组表达蛋白的免疫保护研究 | 第97-107页 |
·研究目的及意义 | 第97页 |
·材料与方法 | 第97-100页 |
·材料 | 第97-98页 |
·试验动物 | 第97页 |
·供试寄生虫 | 第97页 |
·主要试剂 | 第97-98页 |
·主要溶液的配制 | 第98页 |
·主要实验器材 | 第98页 |
·方法 | 第98-100页 |
·动物的免疫 | 第98-99页 |
·动物的攻虫试验 | 第99页 |
·幼虫的分离及计算 | 第99页 |
·最佳包被抗原浓度及血清稀释倍数的确定 | 第99页 |
·ELISA敏感性实验 | 第99页 |
·ELISA阴阳性界限的确定 | 第99页 |
·鼠血清IgG的ELISA检测 | 第99-100页 |
·数据处理 | 第100页 |
·结果与分析 | 第100-104页 |
·免疫保护试验 | 第100页 |
·包被抗原和抗体最佳工作浓度测定 | 第100-101页 |
·已知猪蛔虫阳性血清ELISA效价测定 | 第101-102页 |
·健康猪血清的检测 | 第102页 |
·免疫前后鼠血清IgG的ELISA检测结果 | 第102-104页 |
·讨论 | 第104-106页 |
·关于重组蛋白的免疫保护性 | 第104页 |
·关于猪蛔虫病ELISA检测方法的建立 | 第104-106页 |
·小结 | 第106-107页 |
总结 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-122页 |
致谢 | 第122页 |