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产还原型谷胱甘肽酵母菌的筛选及高产谷胱甘肽酵母工程菌的构建

中文摘要第1-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第8-16页
   ·谷胱甘肽的性质、分布与合成第8-9页
   ·谷胱甘肽的功能第9-10页
     ·谷胱甘肽在生物体内的功能第9-10页
     ·谷胱甘肽的其他重要生物学功能第10页
   ·谷胱甘肽的应用及前景第10-11页
   ·谷胱甘肽的研究第11-14页
     ·酶法合成谷胱甘肽第11页
     ·发酵法合成谷胱甘肽第11-14页
   ·谷胱甘肽含量的测定第14-15页
     ·四氧嘧啶法第14页
     ·DTNB 法第14页
     ·碘量法第14-15页
     ·DTNB[5,5'-二硫双-(2-硝基苯甲酸)]-谷胱甘肽还原酶循环法第15页
   ·立题背景及本文的研究任务第15-16页
第二章 产还原型谷胱甘肽酵母菌的筛选及初步鉴定第16-26页
   ·材料第16页
     ·采样与初筛供试菌株第16页
     ·培养基第16页
     ·试剂第16页
   ·方法第16-17页
     ·筛选第16-17页
     ·生物量的测定第17页
     ·谷胱甘肽含量分析第17页
   ·菌株鉴定第17-18页
     ·形态学、生理生化特征第17页
     ·基因组DNA 的提取第17-18页
     ·18S rDNA 的扩增第18页
     ·18S rDNA 序列测定及同源性比较、系统分析第18页
   ·结果第18-24页
     ·筛选结果第18-19页
     ·生理生化鉴定第19-24页
   ·结论第24-26页
第三章 gsh 1 的克隆及在巴斯德毕赤氏酵母中的表达第26-35页
   ·材料第27页
     ·菌种与质粒第27页
     ·工具酶和试剂第27页
     ·培养基第27页
     ·引物第27页
   ·方法第27-30页
     ·基因组DNA 的提取第27页
     ·gsh 1 基因的扩增第27-28页
     ·感受态细胞的制备第28页
     ·大肠杆菌细胞转化第28页
     ·酵母菌细胞的转化第28-29页
     ·表达载体pGAPZA-gsh 1 的构建第29页
     ·转化子PCR 验证第29页
     ·酶活测定第29-30页
     ·重组巴斯得毕赤氏酵母x-33(pGAPZA-gsh 1)发酵实验第30页
     ·重组巴斯得毕赤氏酵母的遗传稳定性第30页
   ·结果第30-34页
     ·gsh 1 基因的PCR 扩增结果第30页
     ·表达载体pGAPZA-gsh 1 的构建第30-31页
     ·重组巴斯得毕赤氏酵母x-33(pGAPZA-gsh 1) 的筛选和鉴定第31-32页
     ·酶活测定第32-33页
     ·重组巴斯得毕赤氏酵母x-33(pGAPZA-gsh 1)发酵实验第33页
     ·重组巴斯得毕赤氏酵母的遗传稳定性第33-34页
   ·结论第34-35页
第四章 重组菌发酵条件的初步研究第35-47页
   ·材料第35页
     ·菌株第35页
     ·培养基第35页
   ·方法第35-37页
     ·种子活化第35页
     ·种子培养第35页
     ·发酵第35-36页
     ·分析方法第36-37页
   ·结果第37-46页
     ·重组毕赤氏酵母在不同种子培养基上生长曲线的测定第37页
     ·发酵时间的确定第37-38页
     ·发酵培养基的优化第38-43页
     ·发酵条件的优化第43-45页
     ·优化后重组菌的发酵过程曲线第45-46页
     ·5 L 发酵罐上重组菌的发酵特性第46页
   ·结论第46-47页
主要结论第47-48页
参考文献第48-51页
致谢第51-52页
硕士研究生期间发表的论文第52页

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