| 独创性说明 | 第1-3页 |
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-54页 |
| ·CPT类药物的作用机制、衍生物的开发及在皮肤肿瘤和银屑病中的应用 | 第17-23页 |
| ·CPT类药物的作用机制 | 第17-18页 |
| ·CPT类药物的开发及应用 | 第18-22页 |
| ·CPT类药物与皮肤肿瘤和银屑病 | 第22-23页 |
| ·管新生的机制及在皮肤肿瘤和银屑病中的作用 | 第23-28页 |
| ·血管新生的机制 | 第24-26页 |
| ·血管新生在皮肤肿瘤和银屑病中的作用 | 第26-28页 |
| ·银屑病发病机制与端粒酶表达 | 第28-35页 |
| ·银屑病发病中T细胞活化与端粒酶表达 | 第28-32页 |
| ·银屑病发病中角质形成细胞的增殖和凋亡与端粒酶表达 | 第32-35页 |
| ·以端粒酶为靶点的肿瘤基因治疗 | 第35-41页 |
| ·基因转移 | 第36-37页 |
| ·基因治疗策略 | 第37-40页 |
| ·以端粒酶为靶点的肿瘤基因治疗 | 第40-41页 |
| ·参考文献 | 第41-54页 |
| 2 试验用材料和方法 | 第54-61页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第54-56页 |
| ·细胞株 | 第54页 |
| ·药物 | 第54-55页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第55页 |
| ·引物 | 第55页 |
| ·主要实验设备和仪器 | 第55-56页 |
| ·细胞培养和药物浓度的配制 | 第56页 |
| ·细胞培养 | 第56页 |
| ·药物浓度的配制 | 第56页 |
| ·MTT法检测细胞的增殖抑制 | 第56-57页 |
| ·光镜和电镜观察细胞形态和凋亡细胞 | 第57页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期 | 第57页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳法观察细胞凋亡特征DNA Ladder带 | 第57页 |
| ·端粒酶活性检测 | 第57-58页 |
| ·细胞处理 | 第57-58页 |
| ·单一核细胞分离 | 第58页 |
| ·端粒酶活性测定 | 第58页 |
| ·hTERT基因的制备和整合 | 第58-60页 |
| ·hTERT基因的分离 | 第58-59页 |
| ·hTERT基因反义表达质粒的构建 | 第59页 |
| ·细胞培养 | 第59页 |
| ·反义表达质粒pLNCX-TERT转入Tca8113细胞 | 第59页 |
| ·PCR和Southern blot分析外源基因整合 | 第59-60页 |
| ·hTERT基因整合后对细胞的影响 | 第60页 |
| ·DNA测序法检测端粒酶活性 | 第60页 |
| ·细胞生长速度及倍增时间的测定 | 第60页 |
| ·统计学处理 | 第60-61页 |
| 3 Iso-CPT和CPT抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡和对端粒酶活性的影响 | 第61-73页 |
| ·前言 | 第61页 |
| ·Iso-CPT和CPT对Tca8113和Hela细胞的增殖抑制作用及有效浓度 | 第61-65页 |
| ·光镜和电镜观察细胞形态和凋亡细胞 | 第65-66页 |
| ·倒置显微镜观察 | 第65-66页 |
| ·电子显微镜观察 | 第66页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡 | 第66-68页 |
| ·凝胶电泳法观察细胞凋亡特征DNA梯状带 | 第68-69页 |
| ·Iso-CPT和CPT对Tca8113细胞端粒酶活性的影响 | 第69页 |
| ·Iso-CPT和CPT对Tca8113抑制作用的比较 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 4 Iso-CPT和CPT抑制角质形成细胞增殖、诱导凋亡和对端粒酶活性的影响 | 第73-84页 |
| ·前言 | 第73页 |
| ·Iso-CPT和CPT对HaCaT细胞的增殖抑制作用及有效浓度 | 第73-76页 |
| ·光镜下细胞形态变化 | 第76页 |
| ·电镜下细胞形态 | 第76-77页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期的变化及细胞凋亡 | 第77-79页 |
| ·Iso-CPT和CPT对HaCaT细胞端粒酶活性的影响 | 第79-80页 |
| ·Iso-CPT和CPT对HaCaT细胞增殖抑制作用的比较 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-84页 |
| 5 Iso-CPT和CPT抑制血管内皮细胞增殖、诱导凋亡和对端粒酶活性的影响 | 第84-94页 |
| ·前言 | 第84页 |
| ·Iso-CPT和CPT对ECV304细胞的生长抑制作用及有效浓度 | 第84-87页 |
| ·形态学观察凋亡细胞 | 第87页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡 | 第87-90页 |
| ·Iso-CPT和CPT对ECV304细胞端粒酶活性的影响 | 第90-91页 |
| ·Iso-CPT和CPT对ECV304细胞增殖抑制作用的比较 | 第91页 |
| ·讨论 | 第91-94页 |
| 6 银屑病患者外周血单个核细胞端粒酶活性及与疾病严重程度的关系 | 第94-99页 |
| ·前言 | 第94页 |
| ·临床资料 | 第94-95页 |
| ·淋巴细胞分离 | 第95页 |
| ·端粒酶活性检测 | 第95-96页 |
| ·相关性分析 | 第96-97页 |
| ·讨论 | 第97-99页 |
| 7 hTERT反义基因对舌鳞癌Tca8113细胞端粒酶活性的影响 | 第99-107页 |
| ·引言 | 第99页 |
| ·hTERT基因的分离 | 第99-100页 |
| ·反义表达质粒的鉴定及序列分析 | 第100-101页 |
| ·外源基因在基因组DNA中整合的鉴定结果 | 第101-102页 |
| ·PCR鉴定 | 第101页 |
| ·Southern杂交分析 | 第101-102页 |
| ·反义hTERT基因对端粒酶活性的影响 | 第102-103页 |
| ·反义hTERT基因对细胞生长的影响 | 第103-105页 |
| ·讨论 | 第105-107页 |
| 结论 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-113页 |
| 创新点摘要 | 第113-114页 |
| 攻读博士学位期间发表及完成的学术论文 | 第114-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 大连理工大学学位论文版权使用授权书 | 第117页 |
