| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 细胞毒素Gelonin的结构、功能及其在抗癌治疗中的应用(综述) | 第12-22页 |
| 1 前言 | 第12页 |
| 2 核糖体失活蛋白 | 第12-13页 |
| 3 细胞毒素Gelonin | 第13页 |
| 4 一级结构及分子构象 | 第13-15页 |
| 5 糖苷酶活性 | 第15页 |
| 6 糖基化酶活性 | 第15-16页 |
| 7 类DNase活性 | 第16页 |
| 8 其免疫毒素 | 第16-18页 |
| 9 光化学内化及在抗癌治疗中的应用 | 第18页 |
| 结束语 | 第18页 |
| 参考文献 | 第18-22页 |
| 第二章 化学与酶促相结合合成并克隆核糖体失活蛋白Gelonin基因 | 第22-30页 |
| 1 前言 | 第22页 |
| 2 材料 | 第22-23页 |
| 3 方法 | 第23-24页 |
| 3．1 双链寡核苷酸片段的合成与连接 | 第23页 |
| 3．2 重组子构建及DNA序列分析 | 第23页 |
| 3．3 工程菌 E．coliBL21／pET-gel的表达 | 第23页 |
| 3．4 无细胞体系中蛋白质合成的测定 | 第23页 |
| 3．5 ELISA | 第23-24页 |
| 4 结果 | 第24-27页 |
| 4．1 Gelonin基因碱基的优化 | 第24-25页 |
| 4．2 Gelonin基因的化学合成策略 | 第25页 |
| 4．3 表达质粒pET-gel的构建 | 第25-26页 |
| 4．4 重组gelonin基因的表达 | 第26-27页 |
| 4．5 表达产物的细胞毒性测定 | 第27页 |
| 4．6 表达产物的免疫活性分析 | 第27页 |
| 5 讨论 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-30页 |
| 第三章 截短型细胞毒素Gelonin的克隆、表达与纯化 | 第30-40页 |
| 1 前言 | 第30页 |
| 2 材料 | 第30-32页 |
| 3 方法 | 第32-35页 |
| 3．1 含截短型细胞毒素Gelonin基因片段的重组子构建 | 第32-33页 |
| 3．2 感受态细胞的制备 | 第33页 |
| 3．3 连接产物的转化 | 第33页 |
| 3．4 阳性克隆的筛选 | 第33页 |
| 3．5 截短型Gelonin的表达与纯化 | 第33-35页 |
| 4 结果与讨论 | 第35-38页 |
| 4．1 重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| 4．2 重组菌的表达分析 | 第36页 |
| 4．3 目的蛋白的表达与纯化 | 第36-37页 |
| 4．4 表达产物的Western blot分析 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 第四章 细胞毒素Gelonin的分子构象分析 | 第40-44页 |
| 1 前言 | 第40页 |
| 2 材料 | 第40页 |
| 3 方法 | 第40页 |
| 4 结果与讨论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 第五章 细胞毒素Gelonin的体内外生物活性 | 第44-48页 |
| 1 前言 | 第44页 |
| 2 材料 | 第44页 |
| 3 方法 | 第44-45页 |
| 4 结果与讨论 | 第45-47页 |
| 4．1 类DNase活性 | 第45页 |
| 4．2 肿瘤抑制活性 | 第45-46页 |
| 4．3 对肿瘤细胞核DNA合成的影响 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-48页 |
| 攻读硕士期间发表投送的文章或会议论文 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-52页 |
| 个人简况及联系方式 | 第52-53页 |
| 承诺书 | 第53页 |
