摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
一 文献综述 | 第9-16页 |
1. 禾谷镰刀菌及其致病性 | 第9-11页 |
·麦类赤霉病 | 第9页 |
·禾谷镰刀菌分泌的与致病性有关的物质 | 第9-10页 |
·禾谷镰刀菌致病性的分子机理 | 第10-11页 |
2. 农杆菌介导的丝状真菌的遗传转化 | 第11-15页 |
·影响ATMT转化的因素 | 第12-13页 |
·根癌农杆菌介导的丝状真菌转化的特点 | 第13-15页 |
3. 本研究的目的 | 第15-16页 |
二 材料与方法 | 第16-19页 |
·供试菌种 | 第16页 |
·转化质粒 | 第16页 |
·培养基的配制 | 第16页 |
·方法 | 第16-17页 |
·禾谷镰刀菌孢子的制备 | 第16页 |
·根癌农杆菌的活化及诱导培养 | 第16-17页 |
·禾谷镰刀菌孢子与根癌农杆菌的共培养和转化子的筛选 | 第17页 |
·转化率影响因素的研究 | 第17-18页 |
·筛选培养基对转化率的影响 | 第17页 |
·禾谷镰刀菌孢子浓度对转化率的影响 | 第17页 |
·诱导剂乙酰丁香酮AS浓度对转化率的影响 | 第17页 |
·共培养时间对转化率的影响 | 第17页 |
·共培养基pH值对转化率的影响 | 第17页 |
·根癌农杆菌浓度对转化率的影响 | 第17页 |
·用于转化的禾谷镰刀菌孢子新鲜度的影响 | 第17-18页 |
·抗生素对供试菌株的影响 | 第18页 |
·转化子DNA提取与分析 | 第18-19页 |
·CTAB法提取基因组DNA | 第18页 |
·PCR验证 | 第18-19页 |
·转化子遗传稳定性分析 | 第19页 |
·转化子的表型分析 | 第19页 |
·致病性测定 | 第19页 |
三 结果与分析 | 第19-27页 |
·ATMA转化条件的优化 | 第19-23页 |
·筛选培养基的优化 | 第19-20页 |
·禾谷镰刀菌孢子浓度的优化 | 第20页 |
·AS浓度对转化率的影响 | 第20-21页 |
·共培养时间对转化率的影响 | 第21页 |
·培养基的pH值对转化效率 | 第21-22页 |
·根癌农杆菌浓度对转化率的影响 | 第22-23页 |
·用于转化的禾谷镰刀菌孢子新鲜度的筛选 | 第23页 |
·转化后的高效转化体系和转化库的构建 | 第23页 |
·抗生素对真菌的影响及其适宜的使用浓度 | 第23-24页 |
·潮霉素B对禾谷镰刀菌孢子萌发和菌丝生长的影响 | 第23-24页 |
·头孢霉素和壮观霉素的合适用量 | 第24页 |
·转化子的检测 | 第24-27页 |
·转化子插入稳定性检测 | 第24页 |
·PCR检测 | 第24-25页 |
·转化子的表型分析 | 第25页 |
·转化子的致病性测定结果 | 第25-27页 |
四讨论 | 第27-34页 |
参考文献 | 第34-40页 |
致谢 | 第40页 |