摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
前言 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-26页 |
·无细胞蛋白表达系统概述 | 第8-10页 |
·大肠杆菌无细胞蛋白表达系统 | 第8-9页 |
·嗜热性细菌抽提物系统 | 第9页 |
·兔网织红细胞系统 | 第9页 |
·麦胚提取物系统 | 第9-10页 |
·酵母细胞抽提物系统 | 第10页 |
·无细胞蛋白表达系统的研究进展 | 第10-17页 |
·利用无细胞蛋白质合成系统合成的产物 | 第11页 |
·大肠杆菌无细胞系统蛋白质合成的机制 | 第11-12页 |
·无细胞系统中蛋白质合成优越性 | 第12页 |
·无细胞系统中蛋白合成的能量供应问题 | 第12-14页 |
·无细胞系统中的遗传模板的稳定性问题 | 第14-16页 |
·无细胞系统蛋白质合成系统的应用和发展前景 | 第16-17页 |
·HIV综述 | 第17-22页 |
·HIV基因组与HIV侵入靶细胞的机制 | 第18-19页 |
·AIDS的针对性治疗药物 | 第19-22页 |
·S-腺苷-L-甲硫氨酸概述 | 第22-24页 |
·SAM的作用 | 第22页 |
·SAM的高产途径 | 第22-24页 |
·5-氨基乙酰丙酸概述 | 第24-26页 |
·ALA的生理作用 | 第24页 |
·ALA在农业生产中的应用 | 第24-25页 |
·ALA的生物合成与化学合成 | 第25-26页 |
第二章 实验材料和方法 | 第26-32页 |
·实验材料 | 第26-28页 |
·实验仪器: | 第26-27页 |
·质粒 | 第27页 |
·大肠杆菌菌种 | 第27页 |
·工具酶及试剂盒 | 第27页 |
·试剂 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-29页 |
·E.coli S30 extract的制备方法 | 第28页 |
·体外反应条件 | 第28页 |
·体外反应结果的检测 | 第28-29页 |
·HIV部分基因的无细胞表达 | 第29页 |
附录:分子克隆相关实验及试剂盒操作方法 | 第29-32页 |
第三章 大肠杆菌无细胞表达系统产率的提高 | 第32-41页 |
·大肠杆菌抽提物S30的制备过程的优化 | 第32-36页 |
·菌株的选择和收获时间的选择 | 第34-36页 |
·发酵培养基和发酵条件的选择 | 第36页 |
·本实验室的大肠杆菌无细胞蛋白表达体系的体外反应的优化 | 第36-41页 |
第四章 部分HIV基因的无细胞系统的表达 | 第41-47页 |
·vif、p32、p9、vpu、p66、gp41基因表达载体的构建 | 第41-44页 |
·vif基因表达载体的构建 | 第41-43页 |
·p32、p9、vpu、p66、gp41基因表达载体的构建 | 第43-44页 |
·vif在大肠杆菌无细胞体系中的表达 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第五章 SAM合成酶和ALA合成酶表达载体的构建 | 第47-52页 |
·S-腺苷-L-甲硫氨酸合成酶表达载体的构建 | 第47-49页 |
·ALA合成酶表达载体的构建 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
第六章 总结与展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59页 |