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大肠杆菌无细胞体系合成异源蛋白质的初探

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
前言第7-8页
第一章 文献综述第8-26页
   ·无细胞蛋白表达系统概述第8-10页
     ·大肠杆菌无细胞蛋白表达系统第8-9页
     ·嗜热性细菌抽提物系统第9页
     ·兔网织红细胞系统第9页
     ·麦胚提取物系统第9-10页
     ·酵母细胞抽提物系统第10页
   ·无细胞蛋白表达系统的研究进展第10-17页
     ·利用无细胞蛋白质合成系统合成的产物第11页
     ·大肠杆菌无细胞系统蛋白质合成的机制第11-12页
     ·无细胞系统中蛋白质合成优越性第12页
     ·无细胞系统中蛋白合成的能量供应问题第12-14页
     ·无细胞系统中的遗传模板的稳定性问题第14-16页
     ·无细胞系统蛋白质合成系统的应用和发展前景第16-17页
   ·HIV综述第17-22页
     ·HIV基因组与HIV侵入靶细胞的机制第18-19页
     ·AIDS的针对性治疗药物第19-22页
   ·S-腺苷-L-甲硫氨酸概述第22-24页
     ·SAM的作用第22页
     ·SAM的高产途径第22-24页
   ·5-氨基乙酰丙酸概述第24-26页
     ·ALA的生理作用第24页
     ·ALA在农业生产中的应用第24-25页
     ·ALA的生物合成与化学合成第25-26页
第二章 实验材料和方法第26-32页
   ·实验材料第26-28页
     ·实验仪器:第26-27页
     ·质粒第27页
     ·大肠杆菌菌种第27页
     ·工具酶及试剂盒第27页
     ·试剂第27-28页
   ·实验方法第28-29页
     ·E.coli S30 extract的制备方法第28页
     ·体外反应条件第28页
     ·体外反应结果的检测第28-29页
     ·HIV部分基因的无细胞表达第29页
 附录:分子克隆相关实验及试剂盒操作方法第29-32页
第三章 大肠杆菌无细胞表达系统产率的提高第32-41页
   ·大肠杆菌抽提物S30的制备过程的优化第32-36页
     ·菌株的选择和收获时间的选择第34-36页
     ·发酵培养基和发酵条件的选择第36页
   ·本实验室的大肠杆菌无细胞蛋白表达体系的体外反应的优化第36-41页
第四章 部分HIV基因的无细胞系统的表达第41-47页
   ·vif、p32、p9、vpu、p66、gp41基因表达载体的构建第41-44页
     ·vif基因表达载体的构建第41-43页
     ·p32、p9、vpu、p66、gp41基因表达载体的构建第43-44页
   ·vif在大肠杆菌无细胞体系中的表达第44-45页
   ·讨论第45-47页
第五章 SAM合成酶和ALA合成酶表达载体的构建第47-52页
   ·S-腺苷-L-甲硫氨酸合成酶表达载体的构建第47-49页
   ·ALA合成酶表达载体的构建第49-51页
   ·讨论第51-52页
第六章 总结与展望第52-53页
参考文献第53-59页
致谢第59页

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