| 第1章 引言 | 第1-39页 |
| ·细胞信号转导 | 第13-14页 |
| ·细胞信号转导概述 | 第13-14页 |
| ·细胞信号之间的交叉“对话” | 第14页 |
| ·Wnt 信号通路 | 第14-23页 |
| ·经典Wnt 信号通路 | 第16-17页 |
| ·骨架蛋白Axin 对经典Wnt 信号通路的调节 | 第17-22页 |
| ·非经典Wnt 信号通路 | 第22-23页 |
| ·JNK 信号通路 | 第23-29页 |
| ·MAPK 信号通路 | 第24-25页 |
| ·JNK 信号通路 | 第25-26页 |
| ·Axin 在JNK 信号通路中的作用 | 第26-28页 |
| ·调节Axin 在JNK 信号通路中的功能的其它生物分子 | 第28-29页 |
| ·TGF-β信号通路 | 第29-32页 |
| ·TGF-β超家族和Smad 通路 | 第29-31页 |
| ·Axin 在TGF-β信号通路中的作用 | 第31-32页 |
| ·Ephrin-81 反向信号通路 | 第32-35页 |
| ·Eph 受体和 Ephrin 配体的结构 | 第32-33页 |
| ·Ephrin-81 介导的反向信号通路 | 第33-35页 |
| ·p53 信号通路 | 第35-38页 |
| ·p53 信号通路 | 第36页 |
| ·p53 的翻译后修饰 | 第36-38页 |
| ·本论文的目的和意义 | 第38-39页 |
| 第2 章 材料与方法 | 第39-56页 |
| ·常用药品和试剂 | 第39页 |
| ·DNA 相关实验方法 | 第39-48页 |
| ·质粒载体 | 第39-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和DNA 转化 | 第41-42页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第42-44页 |
| ·质粒DNA 的工具酶处理 | 第44-45页 |
| ·纯化 DNA 片段 | 第45-46页 |
| ·DNA 连接反应 | 第46页 |
| ·PCR 相关实验 | 第46-47页 |
| ·哺乳动物细胞表达质粒的构建 | 第47页 |
| ·细菌表达质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·细胞培养及转染 | 第48-49页 |
| ·细胞培养 | 第48页 |
| ·瞬时转染 | 第48-49页 |
| ·蛋白质相关实验方法 | 第49-54页 |
| ·免疫共沉淀 | 第49页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE 电泳与Western blotting 分析 | 第49-50页 |
| ·免疫激酶试验 | 第50-51页 |
| ·细胞定位实验 | 第51页 |
| ·转染的293 细胞形态变化测活 | 第51页 |
| ·GST pull-down 测活 | 第51页 |
| ·两步法免疫共沉淀 | 第51-52页 |
| ·细胞凋亡测活 | 第52页 |
| ·p53-luciferase 报告基因测活 | 第52页 |
| ·细胞生长抑制测活 | 第52-53页 |
| ·Axin 多克隆抗体的制备 | 第53-54页 |
| ·RNA 干扰试验 | 第54-56页 |
| ·RNA 干扰试验所用表达质粒的构建 | 第54页 |
| ·RNA 干扰试验 | 第54-56页 |
| 第3 章 Ephrin-81 反向信号通路激活JNK 的新机制 | 第56-70页 |
| ·过量表达 Ephrin-81 激活JNK 信号通路 | 第56-59页 |
| ·过量表达Ephrin-81 激活 JNK 信号通路 | 第56-57页 |
| ·293 细胞含有内源性Eph 受体 | 第57页 |
| ·Axin-?MID 不能阻断Ephrin-81 激活JNK | 第57-58页 |
| ·Ephrin-81 通过TAK1 激活JNK | 第58页 |
| ·TAK1-K63W 以剂量依赖方式阻断Ephrin-81 激活JNK | 第58-59页 |
| ·Ephrin-81 激活JNK 需要MKK4/7 | 第59页 |
| ·Ephrin-81 激活JNK 不需要酪氨酸磷酸化 | 第59-61页 |
| ·Ephrin-81 激活JNK 通过反向信号通路 | 第59-60页 |
| ·Ephrin-81 的C 端突变体的表达 | 第60-61页 |
| ·Ephrin-81 的酪氨酸突变不影响激活JNK 途径 | 第61页 |
| ·Ephrin 激活JNK 不需要G164 的介导 | 第61-62页 |
| ·过量表达G164 不影响Ephrin-81 激活JNK | 第61-62页 |
| ·DN-G164 不影响Ephrin-81 激活JNK | 第62页 |
| ·过量表达的Ephrin-81 被 Src 激酶磷酸化 | 第62-63页 |
| ·Ephrin-81 在293T 细胞中被磷酸化 | 第62-63页 |
| ·Ephrin-81 在293T 细胞中被Src 激酶磷酸化 | 第63页 |
| ·Ephrin-81 反向信号通路导致酪氨酸非依赖性细胞形变 | 第63-65页 |
| ·Ephrin-81 反向信号通路介导的JNK 激活参与细胞形变过程 | 第65-67页 |
| ·JNK 抑制药物SP600125 不影响Ephrin-81 的表达 | 第65页 |
| ·SP600125 而不是PP2 可以抑制Ephrin-81 激活JNK | 第65-66页 |
| ·SP600125 而不是PP2 可以挽救Ephrin-81 介导的细胞形变 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| 第4 章 Axin 与HIPK2 及p53 形成复合物激活p53 的功能 | 第70-88页 |
| ·Axin 与HIPK2 及p53 形成复合物 | 第70-72页 |
| ·Axin、HIPK2 和p53 在内源水平上有相互作用 | 第70-71页 |
| ·Axin 和p53 在体外有直接相互作用 | 第71页 |
| ·Axin、HIPK2 和p53 形成复合物 | 第71页 |
| ·复合物的形成不需要Axin 的二聚化 | 第71-72页 |
| ·鉴定Axin 和HIPK2 相互作用位点 | 第72-74页 |
| ·HIPK2 与Axin 的氨基酸678-753 结合 | 第72-73页 |
| ·Axin 与HIPK2 的氨基酸935-1050 结合 | 第73-74页 |
| ·鉴定Axin 和p53 相互作用位点 | 第74-75页 |
| ·p53 与Axin 的氨基酸209-338 和氨基酸678-753 结合 | 第74页 |
| ·Axin 与p53 的氨基酸236-290 结合 | 第74-75页 |
| ·Axin 增强p53 依赖性的转录激活 | 第75-77页 |
| ·在293 细胞中过量表达Aixn 增强p53 转录活性 | 第75页 |
| ·Axin 增强p53 转录活性需要结合p53 和HIPK2 | 第75-76页 |
| ·p53-R175H 阻断Axin 激活p53 的转录活性 | 第76页 |
| ·Axin 增强p53 转录活性需要p53 | 第76-77页 |
| ·Axin 与HIPK2 协同增加p53-Luc 的活性 | 第77-80页 |
| ·Axin 与HIPK2 协同增加p53-Luc 的活性 | 第77页 |
| ·Axin 激活p53-Luc 需要HIPK2 激酶的活性 | 第77-78页 |
| ·Axin 激活p53-Luc 需要 HIPK2 的介导 | 第78页 |
| ·HIPK2 激活p53-Luc 需要Axin | 第78页 |
| ·HIPK2 激活p53-Luc 需要与Axin 相互作用 | 第78-79页 |
| ·HIPK2 上结合Axin 的区域是自抑制结构域 | 第79-80页 |
| ·Axin 促进 HIPK2 介导的p53 丝氨酸46 的磷酸化 | 第80-83页 |
| ·Axin 以剂量依赖方式增加p53 的丝氨酸46 的磷酸化 | 第80页 |
| ·Axin 与HIPK2 协同增加p53 的丝氨酸46 的磷酸化 | 第80-81页 |
| ·Axin 增加p53 的丝氨酸46 的磷酸化需要HIPK2 | 第81页 |
| ·HIPK2△Axin 进一步增强对p53 的丝氨酸46 的磷酸化 | 第81-82页 |
| ·HIPK2 △p53/ ?Axin 不能磷酸化p53 的丝氨酸46 | 第82页 |
| ·Axin 诱导p53 的丝氨酸46 磷酸化需要结合p53 和HIPK2 | 第82-83页 |
| ·Axin 需要p53 诱导细胞凋亡 | 第83-86页 |
| ·Axin 需要外源p53 诱导细胞凋亡 | 第83-84页 |
| ·Axin 需要HIPK2 结合域和p53 结合域诱导细胞凋亡 | 第84-85页 |
| ·pSUPER-p53 和p53-R175H 降低 Axin 诱导细胞凋亡程度 | 第85页 |
| ·Axin 诱导p53 依赖性的细胞生长抑制 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| 第5章 结论 | 第88-95页 |
| 参考文献 | 第95-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
| 声明 | 第108-109页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第109页 |
| 个人简历 | 第109页 |
| 发表的学术论文 | 第109页 |
| 其它的学术论文 | 第109页 |
