基因枪介导的ScMV-CP基因遗传转化甘蔗研究
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 一 前言 | 第9-30页 |
| 1 甘蔗花叶病与甘蔗花叶病毒 | 第9-13页 |
| ·甘蔗花叶病的发生情况 | 第9页 |
| ·甘蔗花叶病的传播特点 | 第9页 |
| ·甘蔗花叶病的症状及危害 | 第9-10页 |
| ·甘蔗花叶病毒 | 第10-11页 |
| ·甘蔗花叶病毒株系的分类 | 第10-11页 |
| ·甘蔗花叶病毒的分布 | 第11页 |
| ·甘蔗花叶病毒寄主 | 第11页 |
| ·马铃薯Y病毒属基因组结构及其功能 | 第11-13页 |
| 2 植物抗病毒基因工程的策略 | 第13-23页 |
| ·来源于病毒基因介导的抗性 | 第14-20页 |
| ·外壳蛋白基因介导的抗性 | 第14-15页 |
| ·复制酶基因介导的抗性 | 第15-17页 |
| ·运动蛋白介导的抗性 | 第17-18页 |
| ·卫星RNA介导的抗性 | 第18-19页 |
| ·缺陷干扰型RNA介导的抗性 | 第19页 |
| ·反义RNA介导的抗性 | 第19页 |
| ·核酶基因介导的抗性 | 第19-20页 |
| ·非病毒来源的基因介导抗性 | 第20-22页 |
| ·病程相关蛋白基因介导的抗性 | 第20-21页 |
| ·潜在自杀基因介导的抗性 | 第21页 |
| ·核糖体失活蛋白基因介导的抗性 | 第21页 |
| ·植物抗体基因介导的抗性 | 第21-22页 |
| ·植物抗病基因介导的抗性 | 第22页 |
| ·多基因策略 | 第22-23页 |
| 3 植物抗病毒基因工程的机制 | 第23-26页 |
| ·蛋白质介导的抗性机制 | 第23页 |
| ·RNA介导的抗性机制 | 第23-25页 |
| ·转录水平的基因沉默机制 | 第23-24页 |
| ·转录后基因沉默机制 | 第24-25页 |
| ·RNA介导的抗性与蛋白质介导的抗性差异 | 第25-26页 |
| 4 甘蔗遗传转化的研究进展 | 第26-29页 |
| ·甘蔗遗传转化方法 | 第26-27页 |
| ·基因枪介导法 | 第26页 |
| ·农杆菌介导法 | 第26-27页 |
| ·电击介导法 | 第27页 |
| ·甘蔗遗传转化的现状 | 第27-29页 |
| ·抗病毒基因工程 | 第27-28页 |
| ·抗除草剂基因工程 | 第28页 |
| ·抗虫基因工程 | 第28-29页 |
| ·改善品质基因工程 | 第29页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 二 材料与方法 | 第30-42页 |
| 1 实验材料 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·质粒 | 第30页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第30页 |
| ·化学试剂与耗材 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-42页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| ·供试植物材料的准备 | 第32页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第32页 |
| ·愈伤组织的继代 | 第32页 |
| ·愈伤组织的分化 | 第32页 |
| ·分化苗的生根 | 第32页 |
| ·甘蔗再生体系的优化 | 第32-33页 |
| ·愈伤组织的诱导和继代 | 第32页 |
| ·试验设计 | 第32-33页 |
| ·甘蔗G418筛选体系的建立 | 第33-34页 |
| ·继代培养阶段的G418抗性试验 | 第33页 |
| ·分化培养阶段的G418抗性试验 | 第33页 |
| ·生根培养阶段的G418抗性试验 | 第33-34页 |
| ·基因枪介导的甘蔗遗传转化 | 第34-42页 |
| ·质粒DNA的大量提取、纯化与鉴定 | 第34-36页 |
| ·转化材料的轰击 | 第36-38页 |
| ·愈伤组织的筛选和抗性植株的再生 | 第38页 |
| ·抗性植株的炼苗和移栽 | 第38-39页 |
| ·抗性植株的分子鉴定 | 第39-42页 |
| 三 结果与分析 | 第42-54页 |
| 1 甘蔗再生体系的优化 | 第42-47页 |
| ·各因素对愈伤组织分化的影响 | 第42-43页 |
| ·各因素对分化效率的影响大小 | 第42页 |
| ·各因素不同浓度对愈伤组织分化的影响 | 第42-43页 |
| ·优化配方的获得 | 第43页 |
| ·优化配方与原有再生体系的比较 | 第43-47页 |
| 2 甘蔗G418筛选体系的建立 | 第47-51页 |
| ·G418对甘蔗愈伤组织生长的抑制作用 | 第47-48页 |
| ·G418对甘蔗愈伤组织分化的抑制作用 | 第48-49页 |
| ·G418对甘蔗分化苗生根的抑制作用 | 第49-51页 |
| 3 ScMV-CP基因遗传转化甘蔗研究 | 第51-54页 |
| ·质粒提取和鉴定结果 | 第51页 |
| ·基因枪转化和筛选的再生植株结果 | 第51-52页 |
| ·转化植株的分子鉴定 | 第52-54页 |
| ·PCR检测结果 | 第52-53页 |
| ·PCR-Southern杂交结果 | 第53-54页 |
| ·基因组Southern杂交结果 | 第54页 |
| 四 讨论 | 第54-57页 |
| 1 关于甘蔗再生体系的优化 | 第54-55页 |
| 2 关于甘蔗G418筛选体系的建立 | 第55-56页 |
| 3 关于基因枪法应用中的问题 | 第56页 |
| 4 关于外壳蛋白基因介导的抗性机制 | 第56-57页 |
| 5 关于利用基因工程技术创造转基因甘蔗的可行性 | 第57页 |
| 6 关于后续工作 | 第57页 |
| 五 结论 | 第57-58页 |
| 1 优化了两个糖蔗品种(系)的再生体系 | 第57页 |
| 2 建立了六个糖蔗品种(系)的G418筛选体系 | 第57-58页 |
| 3 尝试用基因枪法将ScMV-CP基因导入糖蔗中 | 第58页 |
| 六 在学期间发表的论文情况 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 附录Ⅰ 缩略词及英汉对照 | 第68-69页 |
| 附录Ⅱ MS培养基配方及其母液的配制 | 第69-71页 |
| 附录Ⅲ 主要溶液的配制 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
