| 第1章 引言 | 第1-32页 |
| 第2章 汉滩病毒HTNV76-118 株S 片段的克隆及高效表达 | 第32-37页 |
| 1 材料和方法 | 第32-34页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·S 基因的 PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·表达质粒的构建和转化 | 第33页 |
| ·核蛋白在 E.coli 中的诱导表达 | 第33页 |
| ·核蛋白的Ni~(2+)-NTA 亲和柱纯化 | 第33页 |
| ·Western blot 检测 | 第33-34页 |
| ·ELISA 检测 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-35页 |
| ·汉滩病毒 S 基因的 PCR 扩增及表达载体的构建 | 第34页 |
| ·核蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第34-35页 |
| ·免疫学检测结果 | 第35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 第3章 抗汉滩病毒核蛋白(NP)scFv 融合蛋白的构建 | 第37-45页 |
| 1 材料与方法 | 第37-41页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·菌株与质粒 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·试剂与材料 | 第38页 |
| ·PCR primers | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·PCR 扩增碱性磷酸酶的编码基因 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白表达载体的构建 | 第40页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第40页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第40-41页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第41页 |
| ·融合蛋白质生物活性的鉴定 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-43页 |
| ·融合蛋白表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白大肠杆菌中的高效表达 | 第42-43页 |
| ·融合蛋白质双功能生物活性的鉴定 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| ·连接肽在融合蛋白表达中的作用 | 第43-44页 |
| ·融合蛋白scFv-EAP 的作用 | 第44页 |
| ·融合蛋白scFv-SBP的作用 | 第44-45页 |
| 第4章 汉滩病毒的蛋白芯片检测 | 第45-56页 |
| 1 材料和方法 | 第45-49页 |
| ·刻孔芯片的制备 | 第45-46页 |
| ·扫描芯片的制备 | 第46页 |
| ·抗原片的制作 | 第46页 |
| ·利用scFv-EAP 在蛋白芯片上检测汉滩病毒核蛋白 NP | 第46页 |
| ·利用Cy3标记的scFv检测汉滩病毒核蛋白 | 第46-47页 |
| ·基于单链抗体与荧光纳米颗粒检测汉滩病毒核蛋白 | 第47页 |
| ·基于单克隆抗体与荧光纳米颗粒检测汉滩病毒核蛋白 | 第47-48页 |
| ·直接 ELISA 检测汉滩病毒核蛋白 | 第48页 |
| ·实际样品的检测 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-53页 |
| ·利用scFv-EAP 在蛋白芯片上检测汉滩病毒核蛋白NP | 第49-50页 |
| ·利用 Cy3 标记的单链抗体在蛋白芯片上检测汉滩病毒核蛋白 | 第50-51页 |
| ·利用scFv-SBP和纳米荧光颗粒在蛋白芯片上检测汉滩病毒核蛋白 | 第51页 |
| ·利用单克隆抗体和荧光纳米颗粒在蛋白芯片上检测汉滩病毒核蛋白 | 第51-52页 |
| ·ELISA 检测结果 | 第52页 |
| ·实际样品的检测 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| ·蛋白质芯片的制作 | 第53-54页 |
| ·信号检测分子 | 第54-55页 |
| ·实际样品的检测 | 第55-56页 |
| 第5章 免疫PCR检测汉滩病毒核蛋白 | 第56-59页 |
| 1 材料和方法 | 第56-57页 |
| ·单克隆抗体的纯化和生物素化修饰 | 第56页 |
| ·生物素化 Marker DNA 的制备 | 第56页 |
| ·免疫 PCR 实验方法 | 第56-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第6章 基于水溶性荧光聚合物快速灵敏检测汉滩病毒的初步研究 | 第59-63页 |
| 1 材料和方法 | 第59-60页 |
| 2 结果 | 第60-62页 |
| ·pH 值对聚合物 MPS-PPV 荧光强度的影响 | 第60-61页 |
| ·聚合物的表征 | 第61页 |
| ·生物传感器的构建 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-63页 |
| 第7章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-78页 |
| 发表和待发表文章 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
