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铁皮石斛的种质保存及其与共生真菌关系的初探

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
文献综述第10-21页
 1 石斛属植物资源研究概述第10-11页
  1.1 石斛属植物概述第10页
  1.2 药用石斛原植物的研究第10-11页
 2 石斛属植物的组织培养研究第11-14页
  2.1 再生植株获得途径第11-12页
  2.2 原球茎的发生第12页
  2.3 外植体的选择第12-13页
   2.3.1 茎段作为外植体第12页
   2.3.2 其他外植体第12-13页
  2.4 培养基和培养条件影响的研究第13页
  2.5 离体开花第13页
  2.6 人工种子制作第13-14页
  2.7 细胞培养与生物反应器的建立第14页
  2.8 药用植物组织培养的开发应用展望第14页
 3 植物中锗的研究进展第14-16页
  3.1 锗对植物生长的影响第15页
  3.2 植物锗资源的开发利用展望第15-16页
 4 近年来石斛属植物其他方面的研究及展望第16-21页
  4.1 药用石斛的化学成分及活性第16-17页
  4.2 石斛的分子鉴定第17-18页
  4.3 基因工程研究第18-19页
  4.4 石斛菌根真菌的研究第19-21页
   4.4.1 菌根概述第19页
   4.4.2 石斛共生真菌的分离鉴定第19-20页
   4.4.3 分子生物学技术在菌根真菌研究中的应用第20-21页
前言第21-22页
第一章 铁皮石斛的种质资源保存和细胞学观察第22-37页
 第一节 铁皮石斛的种质资源保存第22-32页
  一 材料与方法第22-24页
   1 材料第22页
   2 方法第22-24页
    2.1 丛生芽的诱导第22-23页
     2.1.1 无菌材料的获取:第22-23页
     2.1.2 不同培养基对茎段丛生芽诱导的影响第23页
     2.1.3 激素浓度对茎段丛生芽诱导的影响第23页
    2.2 愈伤组织的诱导及增殖第23-24页
    2.3 根的诱导及壮苗第24页
     2.3.1 不同激素浓度对生根壮苗的影响第24页
     2.3.2 天然附加物对生根壮苗的影响第24页
  二 结果与分析第24-28页
   1 丛生芽的诱导第24-26页
    1.1 不同培养基对茎段从生芽诱导的影响第24-25页
    1.2 不同激素及浓度对茎段丛生芽诱导的影响第25-26页
   2 愈伤组织的诱导第26页
   3 丛生芽的壮苗及根的诱导第26-28页
    3.1 不同激素浓度对生根壮苗的影响第26-27页
    3.2 天然附加物对生根壮苗的影响第27-28页
  三 讨论第28-31页
   1 石斛属植物保存种质的不同方式第28-29页
   2 茎段诱导的影响因素第29-30页
   3 试管苗的生根壮苗第30-31页
  四 小结第31-32页
 第二节 细胞学观察第32-35页
  一 材料与方法第32-35页
   1 材料第32页
   2 实验方法第32页
    2.1 愈伤组织的诱导第32页
    2.2 石蜡切片第32页
     2.2.1 目的:第32页
     2.2.2 材料:第32页
     2.2.3 方法:第32页
   3 结果与分析第32-34页
    3.1 丛生芽的诱导第32-33页
    3.2 愈伤组织的诱导和拟原球茎的形成第33-34页
    3.3 幼苗的形成第34页
   4 讨论第34-35页
    4.1 拟原球茎和体细胞胚的关系第34-35页
    4.2 发生和生长过程第35页
 图版说明第35-37页
  图版Ⅰ第35-36页
  图版Ⅱ第36-37页
第二章 锗对组织培养中铁皮石斛原球茎的影响第37-45页
 一 材料与方法第37-39页
  1 材料第37页
  2 方法第37-39页
   2.1 铁皮石斛原球茎的培养第37页
   2.2 试验设计第37-38页
   2.3 生理指标测定第38-39页
    2.3.1 酶液的制备第38页
    2.3.2 叶绿素含量测定第38页
    2.3.3 可溶性蛋白含量的测定第38页
    2.3.4 SOD活性的测定第38页
    2.3.5 CAT活性的测定第38页
    2.3.6 POD活性的测定第38页
    2.3.7 质膜透性的测定第38-39页
 二 结果与分析第39-42页
  2.1 锗对铁皮石斛原球茎生长的影响第39-40页
   2.1.1 锗对铁皮石斛原球茎增殖及生长状况的影响第39-40页
   2.1.2 锗对铁皮石斛原球茎叶绿素含量的影响第40页
   2.1.3 锗对铁皮石斛原球茎可溶性蛋白质含量的影响第40页
  2.2 锗对铁皮石斛原球茎抗氧化酶系统活性的影响第40-42页
   2.2.1 锗对SOD活性的影响第40-41页
   2.2.2 锗对CAT活性的影响第41页
   2.2.3 锗对POD活性的影响第41页
   2.2.4 锗对膜透性的影响第41-42页
 三 讨论第42-44页
 四 小结第44-45页
第三章 铁皮石斛根部共生真菌的初步研究第45-59页
 一、共生真菌对铁皮石斛组培物生长的影响第45-48页
  1 材料和方法第45-46页
   1.1 植物材料第45-46页
    1.1.1 铁皮石斛根系的获得第45页
    1.1.2 铁皮石斛组培物第45-46页
  2 培养基配方第46页
   2.1 马铃薯葡萄糖(PDA)培养基:第46页
   2.2 共培养所用培养基第46页
  3 方法第46页
   3.1 菌根真菌分离第46页
  4 实验设计第46页
  5 结果与分析第46-47页
   5.1 共生真菌的分离第46页
   5.2 不同内生真菌对铁皮石斛组培苗生长的影响第46-47页
  6 讨论第47-48页
   6.1 共生真菌的获得第47-48页
   6.2 石斛属植物根部共生真菌对原植物体的作用第48页
 二.铁皮石斛部分共生真菌的DNA分析第48-59页
  1 材料和方法第49-50页
   1.1 共生真菌的分离纯化第49页
   1.2 共生真菌DNA序列的测定第49-50页
    1.2.1 真菌总DNA的提取第49页
    1.2.2 PCR扩增第49页
    1.2.3 PCR产物纯化第49页
    1.2.4 DNA序列测定第49-50页
  2 结果与分析第50-55页
   2.1 石斛部分共生真菌rDNA ITS区全序列的特征及分析第50-55页
  3 讨论第55-59页
   3.1 兰科植物根内共生真菌种类的研究第55-56页
   3.2 兰科植物与菌根真菌之间的专一性第56-57页
   3.3 真菌总DNA提取方法的改进第57-59页
参考文献第59-67页
致谢第67页

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