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马传染性贫血病毒受体选择性剪接异构体研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-13页
第一章 引言第13-26页
   ·马传染性贫血病毒细胞受体第14-17页
     ·马传染性贫血病毒(EIAV)第14-15页
     ·EIAV 的细胞受体第15-17页
     ·EIAV 受体研究背景第17页
   ·选择性剪接异构体(Alternative splice variants)第17-22页
     ·Pre-mRNA 选择性剪接(Pre-mRNA spliciling)的分子机制第18-20页
     ·选择性剪接的功能第20-22页
   ·可溶型受体概述第22-25页
     ·可溶型受体产生机制第23页
     ·可溶型受体作用机制第23页
     ·可溶型受体的生物学意义第23-25页
   ·本研究的目的与意义第25-26页
第二章 材料与方法第26-34页
   ·实验材料第26-28页
     ·实验用菌种及质粒第26页
     ·实验动物及细胞第26-27页
     ·主要试剂与试剂盒第27-28页
     ·主要仪器第28页
   ·实验方法第28-34页
     ·质粒 DNA 的小量制备第28页
     ·质粒中量提取第28-29页
     ·脂质体法质粒 DNA 转染第29页
     ·逆转录酶(Reverse transcriptase)活性检测第29页
     ·马原代巨噬细胞的培养第29-30页
     ·血液 RNA 小量提取第30页
     ·cDNA 的合成第30-31页
     ·扩增目的基因第31页
     ·PCR 产物纯化回收第31页
     ·PCR 产物的克隆与纯化第31-32页
     ·序列分析第32页
     ·通过融合 PCR 构建 ELR1-GFP 和 ELR1-IN-GFP 真核表达质粒第32页
     ·重组蛋白 Western blotting 检测第32-33页
     ·荧光定量 PCR 标准品的制备第33页
     ·SYBR Green Real-time PCR 检测 ELR1 和 ELR1-IN 的表达第33-34页
第三章 结果第34-44页
   ·ELR1 选择性剪接异构体的鉴定第34-38页
     ·RT-PCR 扩增 EIAV 细胞受体第34页
     ·序列比对结果第34-38页
   ·ELR1 选择性剪接异构体的表达形式鉴定第38-39页
     ·生物信息软件 Tmap 预测第38页
     ·Western blot 鉴定 ELR1-IN 的表达形式第38-39页
     ·构建 pELR1-GFP 和 pELR1-IN-GFP 载体第39页
   ·ELR1-IN 表达的可溶型受体SELR1功能研究第39-42页
     ·可溶型 EIAV 细胞受体(sELR1)与病毒结合对 EIAV第39-41页
     ·可溶型受体在靶细胞中过表达对 EIAV 感染的影响第41-42页
   ·EIAV 体外感染马巨噬细胞后 ELR1 与 ELR1-IN 的表达变化第42-44页
     ·荧光定量 PCR 标准曲线的建立第42页
     ·EIAV 体外感染马巨噬细胞后 ELR1 与 ELR1-IN 的表达检测结果第42-44页
第四章 讨论第44-47页
   ·ELR1 选择性剪接异构体的形式及特点第44页
   ·插入型 ELR1 异构体(ELR1-IN)的表达形式第44-45页
   ·ELR1-IN 的功能第45页
   ·EIAV 感染对 ELR1-IN 表达的影响第45-47页
第五章 结论第47-48页
参考文献第48-51页
致谢第51-52页
作者简历第52页

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