摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第9-13页 |
第一章 引言 | 第13-26页 |
·马传染性贫血病毒细胞受体 | 第14-17页 |
·马传染性贫血病毒(EIAV) | 第14-15页 |
·EIAV 的细胞受体 | 第15-17页 |
·EIAV 受体研究背景 | 第17页 |
·选择性剪接异构体(Alternative splice variants) | 第17-22页 |
·Pre-mRNA 选择性剪接(Pre-mRNA spliciling)的分子机制 | 第18-20页 |
·选择性剪接的功能 | 第20-22页 |
·可溶型受体概述 | 第22-25页 |
·可溶型受体产生机制 | 第23页 |
·可溶型受体作用机制 | 第23页 |
·可溶型受体的生物学意义 | 第23-25页 |
·本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-34页 |
·实验材料 | 第26-28页 |
·实验用菌种及质粒 | 第26页 |
·实验动物及细胞 | 第26-27页 |
·主要试剂与试剂盒 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-34页 |
·质粒 DNA 的小量制备 | 第28页 |
·质粒中量提取 | 第28-29页 |
·脂质体法质粒 DNA 转染 | 第29页 |
·逆转录酶(Reverse transcriptase)活性检测 | 第29页 |
·马原代巨噬细胞的培养 | 第29-30页 |
·血液 RNA 小量提取 | 第30页 |
·cDNA 的合成 | 第30-31页 |
·扩增目的基因 | 第31页 |
·PCR 产物纯化回收 | 第31页 |
·PCR 产物的克隆与纯化 | 第31-32页 |
·序列分析 | 第32页 |
·通过融合 PCR 构建 ELR1-GFP 和 ELR1-IN-GFP 真核表达质粒 | 第32页 |
·重组蛋白 Western blotting 检测 | 第32-33页 |
·荧光定量 PCR 标准品的制备 | 第33页 |
·SYBR Green Real-time PCR 检测 ELR1 和 ELR1-IN 的表达 | 第33-34页 |
第三章 结果 | 第34-44页 |
·ELR1 选择性剪接异构体的鉴定 | 第34-38页 |
·RT-PCR 扩增 EIAV 细胞受体 | 第34页 |
·序列比对结果 | 第34-38页 |
·ELR1 选择性剪接异构体的表达形式鉴定 | 第38-39页 |
·生物信息软件 Tmap 预测 | 第38页 |
·Western blot 鉴定 ELR1-IN 的表达形式 | 第38-39页 |
·构建 pELR1-GFP 和 pELR1-IN-GFP 载体 | 第39页 |
·ELR1-IN 表达的可溶型受体SELR1功能研究 | 第39-42页 |
·可溶型 EIAV 细胞受体(sELR1)与病毒结合对 EIAV | 第39-41页 |
·可溶型受体在靶细胞中过表达对 EIAV 感染的影响 | 第41-42页 |
·EIAV 体外感染马巨噬细胞后 ELR1 与 ELR1-IN 的表达变化 | 第42-44页 |
·荧光定量 PCR 标准曲线的建立 | 第42页 |
·EIAV 体外感染马巨噬细胞后 ELR1 与 ELR1-IN 的表达检测结果 | 第42-44页 |
第四章 讨论 | 第44-47页 |
·ELR1 选择性剪接异构体的形式及特点 | 第44页 |
·插入型 ELR1 异构体(ELR1-IN)的表达形式 | 第44-45页 |
·ELR1-IN 的功能 | 第45页 |
·EIAV 感染对 ELR1-IN 表达的影响 | 第45-47页 |
第五章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简历 | 第52页 |