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阳离子白蛋白结合聚乙二醇-聚乳酸纳米粒的脑内递药研究

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-14页
前言第14-16页
第一部分 阳离子白蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸纳米粒的构建和表征第16-36页
 1 仪器和材料第16-18页
   ·仪器第16-17页
   ·材料和试剂第17-18页
 2 实验方法第18-26页
   ·纳米粒聚合物材料的选择、合成和表征第18-19页
   ·PEG化纳米粒的制备第19-20页
   ·CBSA的制备和鉴定第20-21页
   ·CBSA的巯基化第21-22页
   ·CBSA-NP的制备第22-24页
   ·CBSA-NP的表征第24-26页
 3 实验结果第26-34页
   ·MPEG-PLA和Maleimide-PEG-PLA的表征第26-28页
   ·CBSA的鉴定第28-29页
   ·粒径及Zeta电位第29-30页
   ·表面元素分析第30-32页
   ·CBSA-NP的免疫电镜染色第32-33页
   ·纳米粒的CBSA结合数第33-34页
 4 讨论第34-35页
   ·CBSA-NP制备工艺的选择第34页
   ·CBSA-NP的粒径和Zeta电位第34-35页
 5 小结第35-36页
第二部分 体外血脑屏障模型的建立第36-51页
 1 仪器和材料第38-39页
   ·仪器第38页
   ·材料和试剂第38-39页
   ·实验动物第39页
 2 实验方法第39-43页
   ·大鼠BCEC的培养和鉴定第39-40页
   ·大鼠星形胶质细胞的培养和鉴定第40-41页
   ·大鼠BCEC和星形胶质细胞共培养模型的制备第41页
   ·共培养模型的鉴定第41-43页
 3 实验结果第43-48页
   ·大鼠BCEC的培养和鉴定第43-44页
   ·大鼠星形胶质细胞的培养和鉴定第44-45页
   ·大鼠BCEC和星形胶质细胞共培养模型的鉴定第45-47页
   ·跨内皮细胞电阻值的测定第47页
   ·~(14)C-蔗糖的渗透系数的测定第47-48页
 4 讨论第48-49页
   ·BCEC的原代培养第48页
   ·星形胶质细胞的原代培养第48-49页
   ·影响共培养模型内皮细胞形成致密单层的因素第49页
 5 小结第49-51页
第三部分 阳离子白蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸纳米粒脑内递药特性及毒性的体外评价第51-74页
 1 仪器和试剂第51-52页
   ·仪器第51页
   ·材料和试剂第51-52页
 2 实验方法第52-57页
   ·6-香豆素体外HPLC分析方法的建立第52-53页
   ·载6-香豆素荧光探针的CBSA-NP和BSA-NP的制备和表征第53-54页
   ·6-香豆素的体外泄漏试验第54页
   ·大鼠BCEC摄取载6-香豆素的CBSA-NP和BSA-NP的定性观察第54页
   ·大鼠BCEC摄取载6-香豆素CBSA-NP和BSA-NP的定量分析第54-56页
   ·载6-香豆素CBSA-NP和BSA-NP的体外BBB渗透系数第56页
   ·CBSA-NP的体外毒性考察第56-57页
 3 实验结果第57-72页
   ·6-香豆素体外HPLC分析方法的建立第57-58页
   ·载6-香豆素的CBSA-NP和BSA-NP的制备及表征第58-60页
   ·6-香豆素的体外泄漏试验第60-62页
   ·大鼠BCEC摄取载6-香豆素的CBSA-NP和BSA-NP的定性观察第62-63页
   ·大鼠BCEC摄取载6-香豆素的CBSA-NP和BSA-NP的定量实验第63-67页
   ·体外BBB渗透系数第67-69页
   ·CBSA-NP对BCEC的细胞毒性第69-71页
   ·纳米粒对~(14)C-蔗糖渗透系数的影响第71-72页
 4 讨论第72-73页
   ·CBSA-NP脑内递药特性的体外评价第72-73页
   ·CBSA-NP的体外毒性第73页
 5 小结第73-74页
第四部分 阳离子白蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸纳米粒脑内递药特性及毒性的体内评价第74-95页
 1 仪器和试剂第74-75页
   ·仪器第74-75页
   ·材料和试剂第75页
   ·实验动物第75页
 2 实验方法第75-77页
   ·6-香豆素体内HPLC分析方法的建立第75-76页
   ·纳米粒在小鼠大脑和血中的药动学第76页
   ·载6-香豆素CBSA-NP和BSA-NP的脑组织分布观察第76页
   ·CD 68免疫组化染色第76-77页
 3 实验结果第77-92页
   ·6-香豆素体内HPLC分析方法的建立第77-79页
   ·载6-香豆素CBSA-NP和NP在小鼠大脑和血中的药动学第79-84页
   ·载6-香豆素CBSA-NP和BSA-NP在小鼠脑内的分布第84-85页
   ·CD 68免疫组化染色第85-92页
 4 讨论第92-94页
   ·CBSA-NP脑内特异性转运的机理第92-93页
   ·对CBSA-NP脑内特异性转运的处方优化第93-94页
 5 小结第94-95页
第五部分 阳离子白蛋白结合聚乙醇—聚乳酸纳米粒介导hTRAIL基因靶向性治疗胶质瘤第95-121页
 1 仪器和试剂第97页
   ·仪器第97页
   ·材料和试剂第97页
   ·实验动物第97页
 2 实验方法第97-103页
   ·CBSA-NP-hTRAIL基因治疗系统的制备和表征第98页
   ·CBSA-NP的胞吞机制第98-99页
   ·CBSA-NP介导hTRAIL基因传递的细胞内示踪第99-100页
   ·C6细胞体外转染和凋亡检测第100页
   ·原位杂交检测脑内hTRAIL mRNA的特异性表达第100-101页
   ·免疫荧光染色检测脑内hTRAIL蛋白的特异性表达第101页
   ·CBSA-NP介导TRAIL基因对胶质瘤的靶向性治疗第101-103页
 3 结果第103-117页
   ·CBSA-NP-hTRAIL基因治疗系统的表征第103-104页
   ·琼脂糖凝胶电泳第104-105页
   ·纳米粒的摄取机制第105-107页
   ·CBSA-NP介导hTRAIL基因传递的细胞内示踪第107-109页
   ·体外转染和凋亡检测第109-111页
   ·脑内hTRAIL mRNA的特异性表达第111-112页
   ·CBSA-NP-hTRAIL实现脑内hTRAIL蛋白的表达第112-114页
   ·CBSA-NP-hTRAIL诱导C6胶质瘤细胞的凋亡第114-117页
 4 讨论第117-120页
   ·CBSA-NP介导基因胞内输送的机理——内体—溶酶体逃脱第117-118页
   ·CBSA-NP介导hTRAIL基因的体内转染第118-119页
   ·CBSA-NP介导TRAIL基因对胶质瘤的靶向性治疗第119-120页
 5 小结第120-121页
第六部分 载阿克拉霉素的阳离子白蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸纳米粒抑制胶质瘤及脑内递药的初步评价第121-133页
 1 仪器和试剂第121-122页
   ·仪器第121-122页
   ·材料和试剂第122页
   ·实验动物第122页
 2 实验方法第122-125页
   ·载阿克拉霉素CBSA-NP的制备第122-123页
   ·载阿克拉霉素CBSA-NP对C6的体外抑制实验第123页
   ·生物样品预处理和分析方法第123-124页
   ·微透析法测定脑肿瘤细胞间液游离药物浓度第124-125页
 3 结果第125-131页
   ·载阿克拉霉素CBSA-NP的表征第125页
   ·载阿克拉霉素CBSA-NP对C6的抑制第125-126页
   ·阿克拉霉素体内HPLC分析方法的建立第126-127页
   ·微透析实验第127-131页
 4 讨论第131页
   ·载阿克拉霉素CBSA-NP的制备第131页
   ·载阿克拉霉素CBSA-NP对C6的抑制第131页
   ·载阿克拉霉素CBSA-NP治疗胶质瘤的体内研究第131页
 5 小结第131-133页
总结第133-135页
课题的创新性第135-136页
参考文献第136-145页
综述第145-149页
中英文缩写对照第149-151页
作者简介第151-155页
附件第155-167页
致谢第167-170页
论文独创性声明第170页
论文使用授权声明第170页

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