中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一部分 阳离子白蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸纳米粒的构建和表征 | 第16-36页 |
1 仪器和材料 | 第16-18页 |
·仪器 | 第16-17页 |
·材料和试剂 | 第17-18页 |
2 实验方法 | 第18-26页 |
·纳米粒聚合物材料的选择、合成和表征 | 第18-19页 |
·PEG化纳米粒的制备 | 第19-20页 |
·CBSA的制备和鉴定 | 第20-21页 |
·CBSA的巯基化 | 第21-22页 |
·CBSA-NP的制备 | 第22-24页 |
·CBSA-NP的表征 | 第24-26页 |
3 实验结果 | 第26-34页 |
·MPEG-PLA和Maleimide-PEG-PLA的表征 | 第26-28页 |
·CBSA的鉴定 | 第28-29页 |
·粒径及Zeta电位 | 第29-30页 |
·表面元素分析 | 第30-32页 |
·CBSA-NP的免疫电镜染色 | 第32-33页 |
·纳米粒的CBSA结合数 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-35页 |
·CBSA-NP制备工艺的选择 | 第34页 |
·CBSA-NP的粒径和Zeta电位 | 第34-35页 |
5 小结 | 第35-36页 |
第二部分 体外血脑屏障模型的建立 | 第36-51页 |
1 仪器和材料 | 第38-39页 |
·仪器 | 第38页 |
·材料和试剂 | 第38-39页 |
·实验动物 | 第39页 |
2 实验方法 | 第39-43页 |
·大鼠BCEC的培养和鉴定 | 第39-40页 |
·大鼠星形胶质细胞的培养和鉴定 | 第40-41页 |
·大鼠BCEC和星形胶质细胞共培养模型的制备 | 第41页 |
·共培养模型的鉴定 | 第41-43页 |
3 实验结果 | 第43-48页 |
·大鼠BCEC的培养和鉴定 | 第43-44页 |
·大鼠星形胶质细胞的培养和鉴定 | 第44-45页 |
·大鼠BCEC和星形胶质细胞共培养模型的鉴定 | 第45-47页 |
·跨内皮细胞电阻值的测定 | 第47页 |
·~(14)C-蔗糖的渗透系数的测定 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
·BCEC的原代培养 | 第48页 |
·星形胶质细胞的原代培养 | 第48-49页 |
·影响共培养模型内皮细胞形成致密单层的因素 | 第49页 |
5 小结 | 第49-51页 |
第三部分 阳离子白蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸纳米粒脑内递药特性及毒性的体外评价 | 第51-74页 |
1 仪器和试剂 | 第51-52页 |
·仪器 | 第51页 |
·材料和试剂 | 第51-52页 |
2 实验方法 | 第52-57页 |
·6-香豆素体外HPLC分析方法的建立 | 第52-53页 |
·载6-香豆素荧光探针的CBSA-NP和BSA-NP的制备和表征 | 第53-54页 |
·6-香豆素的体外泄漏试验 | 第54页 |
·大鼠BCEC摄取载6-香豆素的CBSA-NP和BSA-NP的定性观察 | 第54页 |
·大鼠BCEC摄取载6-香豆素CBSA-NP和BSA-NP的定量分析 | 第54-56页 |
·载6-香豆素CBSA-NP和BSA-NP的体外BBB渗透系数 | 第56页 |
·CBSA-NP的体外毒性考察 | 第56-57页 |
3 实验结果 | 第57-72页 |
·6-香豆素体外HPLC分析方法的建立 | 第57-58页 |
·载6-香豆素的CBSA-NP和BSA-NP的制备及表征 | 第58-60页 |
·6-香豆素的体外泄漏试验 | 第60-62页 |
·大鼠BCEC摄取载6-香豆素的CBSA-NP和BSA-NP的定性观察 | 第62-63页 |
·大鼠BCEC摄取载6-香豆素的CBSA-NP和BSA-NP的定量实验 | 第63-67页 |
·体外BBB渗透系数 | 第67-69页 |
·CBSA-NP对BCEC的细胞毒性 | 第69-71页 |
·纳米粒对~(14)C-蔗糖渗透系数的影响 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72-73页 |
·CBSA-NP脑内递药特性的体外评价 | 第72-73页 |
·CBSA-NP的体外毒性 | 第73页 |
5 小结 | 第73-74页 |
第四部分 阳离子白蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸纳米粒脑内递药特性及毒性的体内评价 | 第74-95页 |
1 仪器和试剂 | 第74-75页 |
·仪器 | 第74-75页 |
·材料和试剂 | 第75页 |
·实验动物 | 第75页 |
2 实验方法 | 第75-77页 |
·6-香豆素体内HPLC分析方法的建立 | 第75-76页 |
·纳米粒在小鼠大脑和血中的药动学 | 第76页 |
·载6-香豆素CBSA-NP和BSA-NP的脑组织分布观察 | 第76页 |
·CD 68免疫组化染色 | 第76-77页 |
3 实验结果 | 第77-92页 |
·6-香豆素体内HPLC分析方法的建立 | 第77-79页 |
·载6-香豆素CBSA-NP和NP在小鼠大脑和血中的药动学 | 第79-84页 |
·载6-香豆素CBSA-NP和BSA-NP在小鼠脑内的分布 | 第84-85页 |
·CD 68免疫组化染色 | 第85-92页 |
4 讨论 | 第92-94页 |
·CBSA-NP脑内特异性转运的机理 | 第92-93页 |
·对CBSA-NP脑内特异性转运的处方优化 | 第93-94页 |
5 小结 | 第94-95页 |
第五部分 阳离子白蛋白结合聚乙醇—聚乳酸纳米粒介导hTRAIL基因靶向性治疗胶质瘤 | 第95-121页 |
1 仪器和试剂 | 第97页 |
·仪器 | 第97页 |
·材料和试剂 | 第97页 |
·实验动物 | 第97页 |
2 实验方法 | 第97-103页 |
·CBSA-NP-hTRAIL基因治疗系统的制备和表征 | 第98页 |
·CBSA-NP的胞吞机制 | 第98-99页 |
·CBSA-NP介导hTRAIL基因传递的细胞内示踪 | 第99-100页 |
·C6细胞体外转染和凋亡检测 | 第100页 |
·原位杂交检测脑内hTRAIL mRNA的特异性表达 | 第100-101页 |
·免疫荧光染色检测脑内hTRAIL蛋白的特异性表达 | 第101页 |
·CBSA-NP介导TRAIL基因对胶质瘤的靶向性治疗 | 第101-103页 |
3 结果 | 第103-117页 |
·CBSA-NP-hTRAIL基因治疗系统的表征 | 第103-104页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第104-105页 |
·纳米粒的摄取机制 | 第105-107页 |
·CBSA-NP介导hTRAIL基因传递的细胞内示踪 | 第107-109页 |
·体外转染和凋亡检测 | 第109-111页 |
·脑内hTRAIL mRNA的特异性表达 | 第111-112页 |
·CBSA-NP-hTRAIL实现脑内hTRAIL蛋白的表达 | 第112-114页 |
·CBSA-NP-hTRAIL诱导C6胶质瘤细胞的凋亡 | 第114-117页 |
4 讨论 | 第117-120页 |
·CBSA-NP介导基因胞内输送的机理——内体—溶酶体逃脱 | 第117-118页 |
·CBSA-NP介导hTRAIL基因的体内转染 | 第118-119页 |
·CBSA-NP介导TRAIL基因对胶质瘤的靶向性治疗 | 第119-120页 |
5 小结 | 第120-121页 |
第六部分 载阿克拉霉素的阳离子白蛋白结合聚乙二醇—聚乳酸纳米粒抑制胶质瘤及脑内递药的初步评价 | 第121-133页 |
1 仪器和试剂 | 第121-122页 |
·仪器 | 第121-122页 |
·材料和试剂 | 第122页 |
·实验动物 | 第122页 |
2 实验方法 | 第122-125页 |
·载阿克拉霉素CBSA-NP的制备 | 第122-123页 |
·载阿克拉霉素CBSA-NP对C6的体外抑制实验 | 第123页 |
·生物样品预处理和分析方法 | 第123-124页 |
·微透析法测定脑肿瘤细胞间液游离药物浓度 | 第124-125页 |
3 结果 | 第125-131页 |
·载阿克拉霉素CBSA-NP的表征 | 第125页 |
·载阿克拉霉素CBSA-NP对C6的抑制 | 第125-126页 |
·阿克拉霉素体内HPLC分析方法的建立 | 第126-127页 |
·微透析实验 | 第127-131页 |
4 讨论 | 第131页 |
·载阿克拉霉素CBSA-NP的制备 | 第131页 |
·载阿克拉霉素CBSA-NP对C6的抑制 | 第131页 |
·载阿克拉霉素CBSA-NP治疗胶质瘤的体内研究 | 第131页 |
5 小结 | 第131-133页 |
总结 | 第133-135页 |
课题的创新性 | 第135-136页 |
参考文献 | 第136-145页 |
综述 | 第145-149页 |
中英文缩写对照 | 第149-151页 |
作者简介 | 第151-155页 |
附件 | 第155-167页 |
致谢 | 第167-170页 |
论文独创性声明 | 第170页 |
论文使用授权声明 | 第170页 |