| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-7页 |
| 前言 | 第7-18页 |
| 1． 禽传染性支气管炎病概况 | 第7页 |
| 2． IBV抗体检测方法的研究进展 | 第7-9页 |
| 3． IBV疫苗的研究进展 | 第9-12页 |
| 4． IBV主要结构蛋白的体外表达及其应用研究进展 | 第12-15页 |
| 5． 存在的问题 | 第15页 |
| 6． 前期工作基础 | 第15-16页 |
| 7． 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 8． 技术路线 | 第17-18页 |
| 第一部分 间接 ELISA检测 IBV DNA疫苗免疫抗体的研究 | 第18-29页 |
| 1． 材料和仪器 | 第18-19页 |
| 2． 方法 | 第19-21页 |
| 2．1 IBV的纯化 | 第19页 |
| 2．2 间接ELISA条件的筛选 | 第19-21页 |
| 2．3 间接EUSA检测IBV DNA疫苗免疫抗体 | 第21页 |
| 2．4 DNA疫苗免疫的攻毒实验 | 第21页 |
| 3． 结果 | 第21-26页 |
| 3．1 病毒纯化 | 第21-22页 |
| 3．2 间接EUSA反应条件 | 第22-23页 |
| 3．3 间接ELISA检测IBV DNA疫苗免疫抗体结果 | 第23-25页 |
| 3．4 DNA疫苗免疫的攻毒实验结果 | 第25-26页 |
| 4． 讨论 | 第26-28页 |
| 4．1 ELISA反应条件 | 第26页 |
| 4．2 DNA疫苗的免疫效果及攻毒保护 | 第26-28页 |
| 5． 结论 | 第28-29页 |
| 第二部分 IBV M基因在大肠杆菌中的表达研究 | 第29-44页 |
| 1． 材料和仪器 | 第29-31页 |
| 2． 方法 | 第31-36页 |
| 2．1 IBV M基因的RT-PCR | 第31-32页 |
| 2．2 IBV M基因表达片段的克隆及鉴定 | 第32-33页 |
| 2．3 IBV M基因pET30-b(+)融合表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2．4 IBV M基因表达载体在大肠杆菌中的诱导表达 | 第34-35页 |
| 2．5 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第35页 |
| 2．6 表达产物的Western blotting | 第35-36页 |
| 3． 结果 | 第36-40页 |
| 3．1 IBV M基因的RT-PCR及克隆鉴定 | 第36-37页 |
| 3．2 IBV M基因PET-30b(+)融合表达载体的鉴定 | 第37页 |
| 3．3 IBV M基因在大肠杆菌中的诱导表达结果 | 第37-40页 |
| 3．4 表达产物的Westem blotting结果 | 第40页 |
| 4． 讨论 | 第40-43页 |
| 4．1 IBV M基因表达的应用前景 | 第40-41页 |
| 4．2 IBV M基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第41-42页 |
| 4．3 IBV M基因表达中存在的问题 | 第42页 |
| 4．4 进一步提高IBVM基因表达量的措施 | 第42-43页 |
| 5． 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第52页 |
