| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-31页 |
| ·苏云金芽孢杆菌研究概况 | 第12-14页 |
| ·苏云金芽孢杆菌毒素 | 第14-15页 |
| ·苏云金芽孢杆菌VIPs | 第15-29页 |
| ·VIPs类型及其杀虫活性 | 第15-18页 |
| ·VIPs作用机理 | 第18-22页 |
| ·VIPs应用及前景 | 第22-29页 |
| ·研究趋势及展望 | 第29-31页 |
| 2 vip3A基因的检测及鉴定 | 第31-40页 |
| ·材料与方法 | 第31-34页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·供试菌株 | 第31页 |
| ·供试昆虫 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·酶类 | 第31页 |
| ·试剂盒 | 第31页 |
| ·缓冲液 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·总DNA提取与定量 | 第32页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·PCR | 第33页 |
| ·PCR产物回收 | 第33-34页 |
| ·DNA序列测定与分析 | 第34页 |
| ·生物测定 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-39页 |
| ·vip3A基因的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·vip3A基因片段的序列比较 | 第35-37页 |
| ·生物测定 | 第37-39页 |
| ·小结与讨论 | 第39-40页 |
| 3 vip3A基因的克隆及序列分析 | 第40-60页 |
| ·材料与方法 | 第40-46页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·供试菌株 | 第40页 |
| ·质粒载体 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·试剂盒 | 第40页 |
| ·酶类 | 第40页 |
| ·缓冲液 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-46页 |
| ·制备PCR简易模板 | 第41-42页 |
| ·引物设计 | 第42页 |
| ·高保真酶PCR | 第42-43页 |
| ·琼脂糖凝胶回收PCR产物 | 第43页 |
| ·PCR产物加A尾 | 第43-44页 |
| ·质粒连接 | 第44页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第44页 |
| ·转化 | 第44-45页 |
| ·质粒提取 | 第45页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组克隆的PCR快速鉴定 | 第46页 |
| ·DNA序列测定及分析 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-58页 |
| ·PCR产物及重组质粒的酶切鉴定 | 第46-48页 |
| ·序列分析 | 第48-58页 |
| ·小结与讨论 | 第58-60页 |
| 4 vip3A基因表达、蛋白纯化及多克隆抗体制备 | 第60-73页 |
| ·材料与方法 | 第60-65页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·供试菌株 | 第60页 |
| ·供试昆虫 | 第60页 |
| ·免疫用家兔 | 第60页 |
| ·培养基 | 第60页 |
| ·试剂盒 | 第60页 |
| ·酶类 | 第60页 |
| ·缓冲液 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61-65页 |
| ·原核表达载体pETvip-WB5的构建 | 第61-63页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第63页 |
| ·生物测定 | 第63页 |
| ·目的蛋白的可溶性分析 | 第63-64页 |
| ·包含体的透射电镜观察 | 第64页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第64页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-71页 |
| ·原核表达载体pETvip-WB5的构建 | 第65页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第65-66页 |
| ·生物测定 | 第66页 |
| ·目的蛋白的可溶性分析 | 第66-68页 |
| ·包含体的透射电镜观察 | 第68-69页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第69-71页 |
| ·小结与讨论 | 第71-73页 |
| 5 工程菌的构建及检测 | 第73-85页 |
| ·材料与方法 | 第73-79页 |
| ·材料 | 第73-74页 |
| ·供试菌株 | 第73页 |
| ·供试植物及品种 | 第73页 |
| ·供试昆虫 | 第73页 |
| ·质粒载体 | 第73页 |
| ·培养基 | 第73页 |
| ·试剂盒 | 第73页 |
| ·酶类 | 第73页 |
| ·缓冲液 | 第73-74页 |
| ·方法 | 第74-79页 |
| ·PCR | 第74-75页 |
| ·重组表达质粒pUS186vip-WB5的构建及DNA序列测定 | 第75-78页 |
| ·构建工程菌 | 第78页 |
| ·工程菌检测 | 第78-79页 |
| ·结果与分析 | 第79-83页 |
| ·PCR产物及重组表达质粒的酶切鉴定 | 第79-80页 |
| ·DNA序列分析 | 第80页 |
| ·工程菌质粒的酶切鉴定 | 第80-81页 |
| ·工程菌的抑菌作用 | 第81页 |
| ·工程菌的内生定殖 | 第81页 |
| ·工程菌的促生作用 | 第81-83页 |
| ·小结与讨论 | 第83-85页 |
| 总结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
| 附录1 缩略词 | 第94-98页 |
| 附录2 博士期间发表(或投稿)论文及参加课题 | 第98-100页 |
| 附录3 vip3A-WB5序列GenBank登录号 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |