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Ca~(2+)诱导大肠杆菌摄取外源DNA的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-14页
第一章 前言第14-43页
 一、 细菌感受态与自然遗传转化第16-20页
  1 细菌感受态第16-19页
  2 细菌的自然遗传转化第19-20页
 二、 大肠杆菌感受态形成及DNA转化第20-27页
  1 大肠杆菌细胞的外周结构第21-22页
  2 Ca~(2+)对细胞的生理作用第22-23页
  3 大肠杆菌感受态形成的两种观点第23-27页
 三、 微生物的水平基因转移第27-42页
  1 生物界中存在的水平基因转移第28-31页
  2 微生物发生水平基因转移的的主要途径第31-33页
  3 微生物发生水平基因转移的系统第33-37页
  4 研究水平基因转移的生物学意义第37-42页
 四、 本研究的目的和意义第42-43页
第二章 金属离子在大肠杆菌感受态建立和DNA转化中的作用第43-59页
 1 材料和方法第44-45页
   ·菌株和质粒第44页
   ·试剂、培养基及主要缓冲液第44页
   ·实验方法第44-45页
 2 结果和分析第45-55页
   ·不同金属离子对大肠杆菌质粒转化作用第45-47页
   ·Ca~(2+)对大肠杆菌生长的促进进用第47页
   ·大肠杆菌生长时,培养基中的Ca~(2+)对其感受态形成的影响第47-49页
   ·大肠杆菌细胞在CaCl_2中的长时间处理对其摄取DNA的影响第49-50页
   ·DNA与感受态细胞共冰浴对质粒转化的影响第50-51页
   ·热激处理对转化的影响第51-52页
   ·大肠杆菌标准转化中各步骤对转化效率的影响第52-54页
   ·转化各步骤中DNA与感受态细胞的相互作用第54-55页
 3 讨论第55-57页
 4 小结第57-59页
第三章 大肠杆菌感受态细胞内Ca~(2+)浓度测定及在细胞中的定位分析第59-72页
 1 材料和方法第60-62页
   ·菌株和质粒第60页
   ·试剂、培养基、主要缓冲液及仪器第60-61页
   ·实验方法第61-62页
 2 结果和分析第62-69页
   ·Fura-2/AM探针分子在大肠杆菌胞内负载情况的测定第62-63页
   ·胞外钙离子的细胞跨膜行为第63-64页
   ·不同浓度CaCl_2处理大肠杆菌细胞后的胞内Ca~(2+)变化情况第64-65页
   ·钙离子对不同生长时期大肠杆菌细胞的跨膜行为研究第65页
   ·钙离子跨膜进入大肠杆菌细胞的动力学行为第65-67页
   ·大肠杆菌感受态细胞Ca~(2+)的分布第67-68页
   ·细胞内沉淀物的能量色谱分析第68-69页
 3 讨论第69-71页
 4 小结第71-72页
第四章 大肠杆菌在低Ca~(2+)条件下对外源DNA的摄取第72-81页
 1 材料和方法第72-75页
   ·菌株和质粒第72-73页
   ·试剂和培养基第73页
   ·实验方法第73-75页
 2 结果和分析第75-78页
   ·大肠杆菌在低浓度Ca~(2+)条件下对DNA的摄取第75-76页
   ·低浓度Ca~(2+)条件下大肠杆菌摄取质粒DNA的酶切鉴定第76页
   ·低浓度Ca~(2+)条件下大肠杆菌摄取质粒DNA的复制拷贝数测定第76-78页
   ·低浓度Ca~(2+)条件下大肠杆菌摄取质粒DNA的抗性基因表达分析第78页
 3 讨论第78-80页
 4 小结第80-81页
第五章 AMP及非选择性DNA对大肠杆菌感受态建立和质粒转化的影响第81-98页
 1 材料和方法第83-85页
   ·菌株和质粒第83页
   ·试剂和培养基第83-84页
   ·实验方法第84-85页
 2 结果和分析第85-95页
   ·不同核苷酸衍生物对大肠杆菌转化的影响第85-86页
   ·AMP对大肠杆菌不同菌株质粒转化效率的影响第86-87页
   ·不同浓度的AMP对大肠杆菌质粒转化的影响第87-88页
   ·AMP处理不同时间对大肠杆菌质粒转化的影响第88-90页
   ·AMP对大肠杆菌生长的影响第90-91页
   ·AMP对大肠杆菌氨苄青霉素抗性基因表达和β-内酰胺酶活性的影响第91-93页
   ·非选择性DNA对大肠杆菌质粒转化的影响第93-94页
   ·不同非选择性DNA对大肠杆菌质粒转化的影响第94-95页
 3 讨论第95-97页
 4 小结第97-98页
第六章 以稀土离子La~(3+)为探针探测Ca~(2+)在大肠杆菌感受态建立中的作用第98-111页
 1 材料和方法第99-101页
   ·菌株和质粒第99页
   ·所用试剂、培养基及仪器第99-100页
   ·实验方法第100-101页
 2 结果和分析第101-108页
   ·La~(3+)对大肠杆菌生长的影响第101-102页
   ·La~(3+)对大肠杆菌内源代谢的影响第102-104页
   ·La~(3+)对大肠杆菌感受态形成和质粒转化的影响第104-106页
   ·La~(3+)处理后的大肠杆菌细胞的电子显微镜观察第106页
   ·La~(3+)对大肠杆菌氨苄青霉素抗性基因(amp~r)表达的影响第106页
   ·La~(3+)对大肠杆菌LacZ基因表达的影响第106-108页
 3 讨论第108-110页
 4 小结第110-111页
第七章 量子点作为探针研究大肠杆菌感受态形成机理第111-122页
 1 材料和方法第113-114页
   ·菌株和质粒第113页
   ·所用试剂和培养基第113页
   ·实验方法第113-114页
 2 结果和分析第114-119页
   ·大肠杆菌不同处理条件下的感受态的形成情况第114-116页
   ·量子点标记实验和遗传转化的关系第116-118页
   ·量子点处理大肠杆菌细胞后细胞表面的原子力显微镜观察第118-119页
 3 讨论第119-120页
 4 小结第120-122页
总结第122-126页
本研究工作的主要创新点第126-127页
参考文献第127-146页
在读期间所发表的论文第146页

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