中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-14页 |
第一章 前言 | 第14-43页 |
一、 细菌感受态与自然遗传转化 | 第16-20页 |
1 细菌感受态 | 第16-19页 |
2 细菌的自然遗传转化 | 第19-20页 |
二、 大肠杆菌感受态形成及DNA转化 | 第20-27页 |
1 大肠杆菌细胞的外周结构 | 第21-22页 |
2 Ca~(2+)对细胞的生理作用 | 第22-23页 |
3 大肠杆菌感受态形成的两种观点 | 第23-27页 |
三、 微生物的水平基因转移 | 第27-42页 |
1 生物界中存在的水平基因转移 | 第28-31页 |
2 微生物发生水平基因转移的的主要途径 | 第31-33页 |
3 微生物发生水平基因转移的系统 | 第33-37页 |
4 研究水平基因转移的生物学意义 | 第37-42页 |
四、 本研究的目的和意义 | 第42-43页 |
第二章 金属离子在大肠杆菌感受态建立和DNA转化中的作用 | 第43-59页 |
1 材料和方法 | 第44-45页 |
·菌株和质粒 | 第44页 |
·试剂、培养基及主要缓冲液 | 第44页 |
·实验方法 | 第44-45页 |
2 结果和分析 | 第45-55页 |
·不同金属离子对大肠杆菌质粒转化作用 | 第45-47页 |
·Ca~(2+)对大肠杆菌生长的促进进用 | 第47页 |
·大肠杆菌生长时,培养基中的Ca~(2+)对其感受态形成的影响 | 第47-49页 |
·大肠杆菌细胞在CaCl_2中的长时间处理对其摄取DNA的影响 | 第49-50页 |
·DNA与感受态细胞共冰浴对质粒转化的影响 | 第50-51页 |
·热激处理对转化的影响 | 第51-52页 |
·大肠杆菌标准转化中各步骤对转化效率的影响 | 第52-54页 |
·转化各步骤中DNA与感受态细胞的相互作用 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
4 小结 | 第57-59页 |
第三章 大肠杆菌感受态细胞内Ca~(2+)浓度测定及在细胞中的定位分析 | 第59-72页 |
1 材料和方法 | 第60-62页 |
·菌株和质粒 | 第60页 |
·试剂、培养基、主要缓冲液及仪器 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-62页 |
2 结果和分析 | 第62-69页 |
·Fura-2/AM探针分子在大肠杆菌胞内负载情况的测定 | 第62-63页 |
·胞外钙离子的细胞跨膜行为 | 第63-64页 |
·不同浓度CaCl_2处理大肠杆菌细胞后的胞内Ca~(2+)变化情况 | 第64-65页 |
·钙离子对不同生长时期大肠杆菌细胞的跨膜行为研究 | 第65页 |
·钙离子跨膜进入大肠杆菌细胞的动力学行为 | 第65-67页 |
·大肠杆菌感受态细胞Ca~(2+)的分布 | 第67-68页 |
·细胞内沉淀物的能量色谱分析 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
4 小结 | 第71-72页 |
第四章 大肠杆菌在低Ca~(2+)条件下对外源DNA的摄取 | 第72-81页 |
1 材料和方法 | 第72-75页 |
·菌株和质粒 | 第72-73页 |
·试剂和培养基 | 第73页 |
·实验方法 | 第73-75页 |
2 结果和分析 | 第75-78页 |
·大肠杆菌在低浓度Ca~(2+)条件下对DNA的摄取 | 第75-76页 |
·低浓度Ca~(2+)条件下大肠杆菌摄取质粒DNA的酶切鉴定 | 第76页 |
·低浓度Ca~(2+)条件下大肠杆菌摄取质粒DNA的复制拷贝数测定 | 第76-78页 |
·低浓度Ca~(2+)条件下大肠杆菌摄取质粒DNA的抗性基因表达分析 | 第78页 |
3 讨论 | 第78-80页 |
4 小结 | 第80-81页 |
第五章 AMP及非选择性DNA对大肠杆菌感受态建立和质粒转化的影响 | 第81-98页 |
1 材料和方法 | 第83-85页 |
·菌株和质粒 | 第83页 |
·试剂和培养基 | 第83-84页 |
·实验方法 | 第84-85页 |
2 结果和分析 | 第85-95页 |
·不同核苷酸衍生物对大肠杆菌转化的影响 | 第85-86页 |
·AMP对大肠杆菌不同菌株质粒转化效率的影响 | 第86-87页 |
·不同浓度的AMP对大肠杆菌质粒转化的影响 | 第87-88页 |
·AMP处理不同时间对大肠杆菌质粒转化的影响 | 第88-90页 |
·AMP对大肠杆菌生长的影响 | 第90-91页 |
·AMP对大肠杆菌氨苄青霉素抗性基因表达和β-内酰胺酶活性的影响 | 第91-93页 |
·非选择性DNA对大肠杆菌质粒转化的影响 | 第93-94页 |
·不同非选择性DNA对大肠杆菌质粒转化的影响 | 第94-95页 |
3 讨论 | 第95-97页 |
4 小结 | 第97-98页 |
第六章 以稀土离子La~(3+)为探针探测Ca~(2+)在大肠杆菌感受态建立中的作用 | 第98-111页 |
1 材料和方法 | 第99-101页 |
·菌株和质粒 | 第99页 |
·所用试剂、培养基及仪器 | 第99-100页 |
·实验方法 | 第100-101页 |
2 结果和分析 | 第101-108页 |
·La~(3+)对大肠杆菌生长的影响 | 第101-102页 |
·La~(3+)对大肠杆菌内源代谢的影响 | 第102-104页 |
·La~(3+)对大肠杆菌感受态形成和质粒转化的影响 | 第104-106页 |
·La~(3+)处理后的大肠杆菌细胞的电子显微镜观察 | 第106页 |
·La~(3+)对大肠杆菌氨苄青霉素抗性基因(amp~r)表达的影响 | 第106页 |
·La~(3+)对大肠杆菌LacZ基因表达的影响 | 第106-108页 |
3 讨论 | 第108-110页 |
4 小结 | 第110-111页 |
第七章 量子点作为探针研究大肠杆菌感受态形成机理 | 第111-122页 |
1 材料和方法 | 第113-114页 |
·菌株和质粒 | 第113页 |
·所用试剂和培养基 | 第113页 |
·实验方法 | 第113-114页 |
2 结果和分析 | 第114-119页 |
·大肠杆菌不同处理条件下的感受态的形成情况 | 第114-116页 |
·量子点标记实验和遗传转化的关系 | 第116-118页 |
·量子点处理大肠杆菌细胞后细胞表面的原子力显微镜观察 | 第118-119页 |
3 讨论 | 第119-120页 |
4 小结 | 第120-122页 |
总结 | 第122-126页 |
本研究工作的主要创新点 | 第126-127页 |
参考文献 | 第127-146页 |
在读期间所发表的论文 | 第146页 |