| 提要 | 第1-6页 |
| 英文缩写词表 | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-13页 |
| 1 IL-4的研究背景 | 第7-9页 |
| ·IL-4的产生、分子结构、基因及其受体 | 第7页 |
| ·IL-4的生物学活性 | 第7-8页 |
| ·IL-4的应用价值 | 第8-9页 |
| 2 分子伴侣的研究现状 | 第9-11页 |
| ·分子伴侣的性质 | 第9页 |
| ·分子伴侣的分类 | 第9-10页 |
| ·分子伴侣的功能 | 第10页 |
| ·分子伴侣在基因重组技术中的应用 | 第10-11页 |
| 3 固定化金属螯合亲和层析研究进展 | 第11-13页 |
| ·固定化金属螯合亲和层析的基本原理 | 第11页 |
| ·固定化金属螯合亲和层析在生命科学领域中的应用 | 第11-13页 |
| 材料与方法 | 第13-24页 |
| 1 主要材料 | 第13-14页 |
| ·限制性内切酶及其它试剂 | 第13页 |
| ·质粒与菌株 | 第13页 |
| ·引物合成:由上海生物工程公司合成 | 第13-14页 |
| ·层析柱 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14页 |
| 2 主要方法 | 第14-24页 |
| ·采用PCR法扩增目的基因 | 第14-16页 |
| ·DNA片段的TA克隆 | 第16-18页 |
| ·相关质粒的构建 | 第18-19页 |
| ·重组IL-4融合蛋白的诱导表达 | 第19页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表达产物 | 第19-20页 |
| ·Western印记鉴定表达产物 | 第20-22页 |
| ·用镍亲和层析的方法分别纯化两种重组融合蛋白 | 第22-24页 |
| 实验结果 | 第24-28页 |
| 1 PCR法扩增目的基因及目的片段的TA克隆 | 第24页 |
| ·FIL-4与HisFIL-4基因的扩增及TA克隆 | 第24页 |
| ·HisCpn10基因的扩增及TA克隆 | 第24页 |
| 2 重组质粒pET28a-FIL-4的构建 | 第24-25页 |
| 3 重组质粒pET28a-HisCpn10与pET28a-Cpn10的构建 | 第25页 |
| ·重组质粒pET28a-HisCpn10的构建 | 第25页 |
| ·重组质粒pET28a-Cpn10的构建 | 第25页 |
| 4 重组质粒ET28a-HisCpn10-FIL-4pET28a-Cpn10-HisFIL-4的构建 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pET28a-HisCpn10-FIL-4的构建 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pET28a-Cpn10-HisFIL-4的构建 | 第26页 |
| 5 FIL-4、HisCpn10-FIL-4和Cpn10-HisFIL-4三种重组融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达及SDS-PAGE鉴定 | 第26页 |
| 6 Western印记结果 | 第26-27页 |
| 7 镍亲和层析纯化结果 | 第27-28页 |
| 图和照片 | 第28-48页 |
| 讨论 | 第48-52页 |
| 1 重组IL-4融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第48-50页 |
| 2 6×His tag在重组蛋白中的位置对镍亲和层析的影响 | 第50-52页 |
| 结 论 | 第52-53页 |
| 参 考 文 献 | 第53-61页 |
| 致 谢 | 第61-62页 |
| 攻读硕士学位期间已(待)发表的文章 | 第62-63页 |
| 中文摘要 | 第63-66页 |
| ABSTRACT | 第66-69页 |
