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水稻转录因子RdreB1的基因克隆和功能分析

中英文摘要第1-7页
目录第7-10页
符号及缩略语说明第10-12页
第一章 文献综述第12-33页
 1 植物在非生物逆境中的基因表达与信号转导第12-20页
   ·植物对非生物逆境的反应第13-14页
   ·水分胁迫诱导基因的功能第14-15页
   ·水分胁迫下基因表达的调控第15-18页
     ·水分胁迫下ABA作用基因的表达(Ⅱ)第16-17页
     ·需合成蛋白的ABA依赖性基因表达第17页
     ·水分胁迫中ABA非依赖性基因表达(Ⅳ,Ⅲ)第17-18页
   ·水分胁迫的信号转导第18-20页
 2 转录因子在水分胁迫中的作用第20-30页
   ·转录因子的概念第20页
   ·转录因子的结构与功能第20-24页
     ·DNA结合区第20-21页
     ·转录调控区第21-23页
       ·转录激活区第21-22页
       ·转录抑制区第22-23页
     ·核定位信号第23-24页
     ·寡聚化位点第24页
   ·转录因子的活性第24-26页
     ·转译后修饰第24-25页
     ·细胞核定位第25页
     ·二聚体化作用第25-26页
   ·转录因子的调控作用第26页
   ·与渗透胁迫相关的几类转录因子第26-30页
     ·MYB/MYC转录因子第26-27页
     ·bZIP转录因子第27-28页
     ·EREBP/AP2型转录因子第28-30页
 3 本研究的目的及其研究内容第30-33页
第二章 酵母单杂交方法筛选获得水稻RdreB1转录因子基因及序列结构分析第33-47页
 前言第33-34页
 1 材料与方法第34页
   ·试验材料第34页
     ·细菌菌株与质粒第34页
     ·化学试剂与酶制剂第34页
     ·PCR引物第34页
     ·培养基第34页
 2 实验方法第34-36页
   ·酵母操作技术及质粒转化第34-36页
   ·DNA操作第36页
 3 结果与分析第36-43页
   ·有关植物抗逆响应顺式调控元件的合成第36-37页
   ·“酵母单杂交体系”的鱼饵质粒构建第37-38页
   ·水稻编码胁迫响应有关转录因子cDNA的筛选第38-39页
   ·酵母阳性克隆中带水稻cDNA的pPC86质粒的鉴定第39页
   ·阳性质粒中插入水稻cDNA的核苷酸顺序与推测的氨基酸顺序第39-40页
   ·按植物偏爱密码子设计并合成水稻RdreB1基因第40-42页
   ·水稻RdreB1基因的序列结构分析第42-43页
 4 小结与讨论第43-47页
   ·酵母单杂交的优越性和存在的问题第43-44页
   ·一种改良的酵母单杂交系统第44-45页
   ·本章主要研究结果第45-47页
第三章 水稻转录因子RdreB1的功能分析第47-71页
 第一部分 水稻转录因子RdreB1的RT-PCR分析以及与顺式作用元件结合第47-59页
  前言第47-48页
  1 材料与方法第48-55页
   ·试验材料第48-50页
     ·细菌菌株和质粒第48页
     ·化学试剂和酶制第48页
     ·植物材料第48页
     ·试验相关溶液的配制第48-50页
     ·引物第50页
     ·测序第50页
   ·试验方法第50-55页
     ·植物材料处理第50-51页
     ·RNA的提取及DNA的去除第51页
     ·RT-PCR分析第51-52页
     ·融合蛋白表达载体的构建第52页
     ·融合蛋白的诱导表达第52页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第52-53页
     ·凝胶阻滞试验(EMSA)第53-55页
       ·cis探针准备第53-54页
       ·非变性聚丙烯酰胺凝胶制备第54页
       ·凝胶滞后第54-55页
       ·放射自显影第55页
  2 结果与分析第55-57页
   ·RdreB1基因在不同逆境条件下的表达以及在不同组织中的表达第55-56页
   ·融合表达载体的构建及鉴定第56页
   ·融合蛋白表达分析第56-57页
   ·凝胶滞后结果分析第57页
  3 小结和讨论第57-59页
   ·讨论第57-58页
   ·小结第58-59页
 第二部分 农杆菌蘸花法转化拟南芥植株分析RdreB1功能第59-71页
  前言第59-60页
  1 材料与方法第60-64页
   ·实验材料第60-61页
     ·植物材料第60页
     ·细菌菌株和质粒第60页
     ·化学试剂和酶制剂第60页
     ·培养基第60-61页
     ·测序第61页
   ·实验方法第61-64页
     ·含双CAMV35S启动子的双元载体YH455的构建第61页
     ·电击法转化农杆菌第61页
     ·拟南芥转化第61-63页
       ·拟南芥的培养第61-62页
       ·农杆菌的准备第62页
       ·拟南芥蘸花法转化第62页
       ·拟南芥种子的筛选第62页
       ·GUS组织化学染色分析第62-63页
     ·转基因阳性植株的PCR检测第63页
     ·拟南芥转基因植株的生理分析实验第63-64页
  2 结果与分析第64-69页
   ·农杆菌转化双元载体的构建第64-66页
   ·RdreB1基因转化拟南芥第66-67页
   ·转RdreB1基因拟南芥的生理功能分析第67-69页
  3 小结与讨论第69-71页
   ·讨论第69-70页
   ·本章第二部分主要研究结果第70-71页
参考文献第71-80页
攻读硕士研究生期间发表的论文第80-81页
致谢第81页

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