中英文摘要 | 第1-7页 |
目录 | 第7-10页 |
符号及缩略语说明 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-33页 |
1 植物在非生物逆境中的基因表达与信号转导 | 第12-20页 |
·植物对非生物逆境的反应 | 第13-14页 |
·水分胁迫诱导基因的功能 | 第14-15页 |
·水分胁迫下基因表达的调控 | 第15-18页 |
·水分胁迫下ABA作用基因的表达(Ⅱ) | 第16-17页 |
·需合成蛋白的ABA依赖性基因表达 | 第17页 |
·水分胁迫中ABA非依赖性基因表达(Ⅳ,Ⅲ) | 第17-18页 |
·水分胁迫的信号转导 | 第18-20页 |
2 转录因子在水分胁迫中的作用 | 第20-30页 |
·转录因子的概念 | 第20页 |
·转录因子的结构与功能 | 第20-24页 |
·DNA结合区 | 第20-21页 |
·转录调控区 | 第21-23页 |
·转录激活区 | 第21-22页 |
·转录抑制区 | 第22-23页 |
·核定位信号 | 第23-24页 |
·寡聚化位点 | 第24页 |
·转录因子的活性 | 第24-26页 |
·转译后修饰 | 第24-25页 |
·细胞核定位 | 第25页 |
·二聚体化作用 | 第25-26页 |
·转录因子的调控作用 | 第26页 |
·与渗透胁迫相关的几类转录因子 | 第26-30页 |
·MYB/MYC转录因子 | 第26-27页 |
·bZIP转录因子 | 第27-28页 |
·EREBP/AP2型转录因子 | 第28-30页 |
3 本研究的目的及其研究内容 | 第30-33页 |
第二章 酵母单杂交方法筛选获得水稻RdreB1转录因子基因及序列结构分析 | 第33-47页 |
前言 | 第33-34页 |
1 材料与方法 | 第34页 |
·试验材料 | 第34页 |
·细菌菌株与质粒 | 第34页 |
·化学试剂与酶制剂 | 第34页 |
·PCR引物 | 第34页 |
·培养基 | 第34页 |
2 实验方法 | 第34-36页 |
·酵母操作技术及质粒转化 | 第34-36页 |
·DNA操作 | 第36页 |
3 结果与分析 | 第36-43页 |
·有关植物抗逆响应顺式调控元件的合成 | 第36-37页 |
·“酵母单杂交体系”的鱼饵质粒构建 | 第37-38页 |
·水稻编码胁迫响应有关转录因子cDNA的筛选 | 第38-39页 |
·酵母阳性克隆中带水稻cDNA的pPC86质粒的鉴定 | 第39页 |
·阳性质粒中插入水稻cDNA的核苷酸顺序与推测的氨基酸顺序 | 第39-40页 |
·按植物偏爱密码子设计并合成水稻RdreB1基因 | 第40-42页 |
·水稻RdreB1基因的序列结构分析 | 第42-43页 |
4 小结与讨论 | 第43-47页 |
·酵母单杂交的优越性和存在的问题 | 第43-44页 |
·一种改良的酵母单杂交系统 | 第44-45页 |
·本章主要研究结果 | 第45-47页 |
第三章 水稻转录因子RdreB1的功能分析 | 第47-71页 |
第一部分 水稻转录因子RdreB1的RT-PCR分析以及与顺式作用元件结合 | 第47-59页 |
前言 | 第47-48页 |
1 材料与方法 | 第48-55页 |
·试验材料 | 第48-50页 |
·细菌菌株和质粒 | 第48页 |
·化学试剂和酶制 | 第48页 |
·植物材料 | 第48页 |
·试验相关溶液的配制 | 第48-50页 |
·引物 | 第50页 |
·测序 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-55页 |
·植物材料处理 | 第50-51页 |
·RNA的提取及DNA的去除 | 第51页 |
·RT-PCR分析 | 第51-52页 |
·融合蛋白表达载体的构建 | 第52页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第52页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第52-53页 |
·凝胶阻滞试验(EMSA) | 第53-55页 |
·cis探针准备 | 第53-54页 |
·非变性聚丙烯酰胺凝胶制备 | 第54页 |
·凝胶滞后 | 第54-55页 |
·放射自显影 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55-57页 |
·RdreB1基因在不同逆境条件下的表达以及在不同组织中的表达 | 第55-56页 |
·融合表达载体的构建及鉴定 | 第56页 |
·融合蛋白表达分析 | 第56-57页 |
·凝胶滞后结果分析 | 第57页 |
3 小结和讨论 | 第57-59页 |
·讨论 | 第57-58页 |
·小结 | 第58-59页 |
第二部分 农杆菌蘸花法转化拟南芥植株分析RdreB1功能 | 第59-71页 |
前言 | 第59-60页 |
1 材料与方法 | 第60-64页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·植物材料 | 第60页 |
·细菌菌株和质粒 | 第60页 |
·化学试剂和酶制剂 | 第60页 |
·培养基 | 第60-61页 |
·测序 | 第61页 |
·实验方法 | 第61-64页 |
·含双CAMV35S启动子的双元载体YH455的构建 | 第61页 |
·电击法转化农杆菌 | 第61页 |
·拟南芥转化 | 第61-63页 |
·拟南芥的培养 | 第61-62页 |
·农杆菌的准备 | 第62页 |
·拟南芥蘸花法转化 | 第62页 |
·拟南芥种子的筛选 | 第62页 |
·GUS组织化学染色分析 | 第62-63页 |
·转基因阳性植株的PCR检测 | 第63页 |
·拟南芥转基因植株的生理分析实验 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-69页 |
·农杆菌转化双元载体的构建 | 第64-66页 |
·RdreB1基因转化拟南芥 | 第66-67页 |
·转RdreB1基因拟南芥的生理功能分析 | 第67-69页 |
3 小结与讨论 | 第69-71页 |
·讨论 | 第69-70页 |
·本章第二部分主要研究结果 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
攻读硕士研究生期间发表的论文 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |