恶性疟原虫四环素诱导性转基因表达系统的构建与检测
| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 文献回顾 | 第14-29页 |
| 四环素可调控基因表达系统的研究进展 | 第14-20页 |
| 1 工作原理 | 第14-15页 |
| 2 基本组成 | 第15-16页 |
| 3 发展改进 | 第16-20页 |
| 寄生原虫的Tet可诱导表达调控系统 | 第20-29页 |
| 1 锥虫 | 第22-23页 |
| 2 阿米巴 | 第23-24页 |
| 3 利什曼 | 第24-26页 |
| 4 弓形虫 | 第26-27页 |
| 5 贾第虫 | 第27页 |
| 6 阴道毛滴虫 | 第27-29页 |
| 研究内容 | 第29-64页 |
| 1 材料 | 第29-37页 |
| ·菌株 | 第29-31页 |
| ·载体 | 第31-33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·GBP130启动子序列 | 第33-35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| ·原虫 | 第35-36页 |
| ·仪器 | 第36-37页 |
| 2 方法 | 第37-44页 |
| ·在GBP130启动子中引入限制性位点 | 第37-39页 |
| ·pUC／KBN系列载体的构建 | 第39页 |
| ·pUC／7T系列载体的构建 | 第39-40页 |
| ·pG／7T系列载体的构建 | 第40页 |
| ·调节载体pDT的构建 | 第40页 |
| ·pGL系列载体的构建 | 第40页 |
| ·红内期疟原虫体外连续培养 | 第40-41页 |
| ·疟原虫同步化处理 | 第41页 |
| ·质粒的大量提取和纯化 | 第41页 |
| ·红内期疟原虫的转染 | 第41-42页 |
| ·转染虫体细胞抽提物的制备 | 第42页 |
| ·CAT活性的检测 | 第42-43页 |
| ·Luciferase活性的检测 | 第43页 |
| ·7cot的插入对GBP130启动子活性的影响 | 第43页 |
| ·脱羟基四环素虫体毒性分析 | 第43页 |
| ·瞬时转染系统诱导性的初步分析 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-54页 |
| ·pUC／KBN系列载体的鉴定 | 第44-46页 |
| ·pUC／7T系列载体的鉴定 | 第46-47页 |
| ·pG／7T系列载体的鉴定 | 第47-49页 |
| ·7cot的插入对启动子活性的影响 | 第49页 |
| ·调节载体pDT的鉴定 | 第49-50页 |
| ·以CAT为报告基因检测系统诱导性 | 第50-52页 |
| ·pGL系列载体的鉴定 | 第52页 |
| ·疟原虫对ATc体外敏感性分析 | 第52-53页 |
| ·以LUC为报告基因检测系统诱导性 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-62页 |
| ·诱导性重组启动子的构建 | 第55-57页 |
| ·TetO元件对启动子的影响 | 第57-58页 |
| ·报告基因的检测 | 第58-60页 |
| ·四环素及其类似物的选用 | 第60页 |
| ·系统诱导性 | 第60-62页 |
| 5 小结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 个人简历 | 第73-74页 |
| 发表主要学术论著 | 第74-75页 |
| 其他相关工作 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
