综述部分 | 第1-26页 |
第一章 猪传染性胃肠炎病毒的研究进展 | 第11-26页 |
试验部分 | 第26-49页 |
第二章 应用 RT-nested PCR 检测猪传染性胃肠炎病毒的研究 | 第26-35页 |
1 试验材料 | 第26-28页 |
·组织来源 | 第26页 |
·质粒和菌种 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要溶液 | 第27-28页 |
2 试验方法 | 第28-31页 |
·RNA 的提取 | 第28-29页 |
·RNA 的甲醛凝胶变性电泳 | 第29页 |
·特异性引物设计与合成 | 第29页 |
·RT-PCR 反应 | 第29-30页 |
·嵌套式反转录 PCR(RT-nested PCR) | 第30页 |
·特异性试验 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-33页 |
·总 RNA 提取 | 第31-32页 |
·RT-PCR 扩增 | 第32页 |
·RT-nested PCR 扩增 | 第32页 |
·特异性试验 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-34页 |
5 结论 | 第34-35页 |
第三章 猪传染性胃肠炎病毒M基因的克隆及序列分析 | 第35-49页 |
1 材料与方法 | 第35-40页 |
·组织来源 | 第35页 |
·质粒和菌种 | 第35页 |
·试剂和仪器 | 第35-36页 |
·总RNA的提取 | 第36-37页 |
·RNA 的甲醛凝胶变性电泳 | 第37页 |
·特异性引物设计 | 第37页 |
·RT-PCR 反应 | 第37-38页 |
·PCR 产物的回收 | 第38页 |
·DNA 质粒的连接 | 第38页 |
·感受态细胞的制备(CaCl2法) | 第38-39页 |
·质粒 DNA 的转化及感受态效价测定 | 第39页 |
·质粒 DNA 的纯化 | 第39页 |
·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第39-40页 |
·穿刺及序列测定 | 第40页 |
·穿刺及序列测定 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-46页 |
·小肠组织中提取总 RNA 的完整性 | 第40页 |
·猪传染性胃肠炎病毒 M 基因的扩增 | 第40页 |
·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第40-41页 |
·猪传染性胃肠炎病毒 M 基因的测序 | 第41-42页 |
·猪传染性胃肠炎病毒 M 基因的序列分析 | 第42-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
4 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-60页 |
致谢 | 第60-64页 |