| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-17页 |
| 材料与方法 | 第17-28页 |
| 1 菌株和材料 | 第17页 |
| 2 培养基 | 第17-18页 |
| 3 试剂 | 第18-19页 |
| 4 仪器设备 | 第19页 |
| 5 壳聚糖酶产生菌Penicillium sp.D-1的筛选和分离鉴定 | 第19-20页 |
| ·富集培养与平板筛选 | 第19-20页 |
| ·菌株形态特征鉴定 | 第20页 |
| 6 发酵液壳聚糖酶活力的测定 | 第20-21页 |
| ·氨基葡萄糖标准曲线制作 | 第20页 |
| ·壳聚糖酶活力的测定 | 第20页 |
| ·发酵液中还原糖量的测定 | 第20-21页 |
| 7 Penicillium sp.D-1产壳聚糖酶条件的优化 | 第21-23页 |
| ·Penicillium sp.D-1孢子悬液的制备 | 第21-22页 |
| ·Penicillium sp.D-1产壳聚糖酶的诱导性 | 第22页 |
| ·不同培养温度对Penicillium sp.D-1产壳聚糖酶的影响 | 第22页 |
| ·四因子三水平正交实验 | 第22页 |
| ·培养基不同初始pH值对Penicillium sp.D-1产酶的影响 | 第22页 |
| ·不同培养基装量对Penicillium sp.D-1产酶的影响 | 第22-23页 |
| ·不同底物壳聚糖浓度对Penicillium sp.D-1产酶的影响 | 第23页 |
| ·最适条件下Penicillium sp.D-1的发酵产酶情况 | 第23页 |
| 8 Penicillium sp.D-1壳聚糖酶的提纯与理化性质的初步研究 | 第23-26页 |
| ·Penicillium sp.D-1产壳聚糖酶的分泌性 | 第23页 |
| ·壳聚糖酶粗酶液的提取与纯化 | 第23-24页 |
| ·Penicillium sp.D-1壳聚糖酶理化性质的初步研究 | 第24-26页 |
| 9 Penicillium sp.D-1壳聚糖酶基因的克隆 | 第26-28页 |
| ·Penicillium sp.D-1染色体DNA的提取 | 第26页 |
| ·目的基因DNA片段合成与分析 | 第26-28页 |
| 结果 | 第28-42页 |
| 1 壳聚糖酶产生菌的筛选和鉴定 | 第28-29页 |
| ·富集培养和第一次筛选 | 第28页 |
| ·菌落形态观察和菌株鉴定 | 第28-29页 |
| 2 摇瓶中Penicillium.sp D-1发酵条件的优化 | 第29-32页 |
| ·标准曲线的制定，壳聚糖酶活力测定 | 第29页 |
| ·Penicillium sp.D-1壳聚糖酶的诱导性 | 第29页 |
| ·培养温度对Penicillium sp.D-1产酶的影响 | 第29页 |
| ·正交实验结果 | 第29-30页 |
| ·培养基不同初始pH值对Penicillium sp.D-1产酶的影响 | 第30-31页 |
| ·不同装量对Penicillium sp.D-1产酶的影响 | 第31页 |
| ·不同底物壳聚糖浓度对Penicillium sp.D-1产酶的影响 | 第31-32页 |
| ·最适发酵条件下，Penicillium sp.D-1的发酵产酶情况 | 第32页 |
| 3 Penicillium sp.D-1壳聚糖酶的提纯及理化性质初步研究 | 第32-39页 |
| ·酶的分泌性实验 | 第32-33页 |
| ·酶的提取与分离纯化 | 第33页 |
| ·酶的最适反应温度和温度稳定性 | 第33-35页 |
| ·酶的最适反应pH和酸碱稳定性 | 第35-36页 |
| ·金属离子对酶促反应的影响 | 第36页 |
| ·酶的底物特异性 | 第36页 |
| ·酶的动力学实验 | 第36-37页 |
| ·酶分子量的确定 | 第37-39页 |
| 4 Penicillium sp.D-1壳聚糖酶基因的克隆 | 第39-42页 |
| ·Penicillium sp.D-1染色体DNA的提取 | 第39页 |
| ·目的基因DNA片段合成与序列分析 | 第39-42页 |
| 讨论 | 第42-49页 |
| 1 产壳聚糖酶菌株的筛选和分类鉴定 | 第42-43页 |
| 2 酶活力的测定 | 第43页 |
| 3 Penicillium sp.D-1产壳聚糖酶发酵条件的研究 | 第43-45页 |
| 4 Penicillium sp.D-1壳聚糖酶的分离纯化 | 第45-46页 |
| 5 Penicillium sp.D-1壳聚糖酶酶学性质研究 | 第46-47页 |
| 6 Penicillium sp.D-1壳聚糖酶基因的克隆与序列分析 | 第47-49页 |
| 结束语 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 论文发表 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
