| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 插图 | 第11-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-35页 |
| 1 引言 | 第14页 |
| 2 植物功能基因组研究的方法 | 第14-29页 |
| ·基因表达差异分析 | 第14-16页 |
| ·系统性基因突变 | 第16-29页 |
| ·物理化学法建立突变体库研究基因功能 | 第17页 |
| ·DNA标签法(DNA tagging)建立植物突变体库研究植物基因功能 | 第17-29页 |
| ·DNA标签 | 第18-21页 |
| ·T-DNA | 第18-19页 |
| ·转座子 | 第19-21页 |
| ·标记策略 | 第21-28页 |
| ·插入突变 | 第21-22页 |
| ·基因捕捉(gene trap) | 第22-25页 |
| ·激活标签(activation tagging) | 第25-26页 |
| ·多功能标签 | 第26-27页 |
| ·可诱导表达标签 | 第27-28页 |
| ·标记基因的克隆和功能鉴定 | 第28-29页 |
| ·标记基因的克隆 | 第28页 |
| ·基因功能的鉴定 | 第28-29页 |
| 3 水稻功能基因组研究进展 | 第29-32页 |
| ·基因表达分析 | 第29页 |
| ·突变体库的建立 | 第29-31页 |
| ·重要功能基因的克隆 | 第31-32页 |
| 4 农杆菌转化水稻的影响因素 | 第32-34页 |
| ·起始材料的选择 | 第32-33页 |
| ·Vir基因的诱导 | 第33页 |
| ·培养基成分 | 第33页 |
| ·农杆菌菌株及载体 | 第33-34页 |
| ·水稻基因型 | 第34页 |
| ·筛选剂 | 第34页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第34-35页 |
| 第二章 农杆菌介导的日本晴转化系统的优化 | 第35-49页 |
| 1 引言 | 第35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-41页 |
| ·实验材料 | 第35-38页 |
| ·供试水稻品种 | 第35页 |
| ·菌株及质粒 | 第35-36页 |
| ·培养基 | 第36-38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第38-40页 |
| ·大肠杆菌受体菌的培养 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·质粒的转化 | 第38页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第38-39页 |
| ·质粒的大量提取 | 第39-40页 |
| ·双元载体导入农杆菌及其鉴定 | 第40页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第40页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第40页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导及继代培养 | 第40-41页 |
| ·工程菌液的制备及水稻转化 | 第41页 |
| ·工程农杆菌的制备 | 第41页 |
| ·根癌农杆菌转化水稻愈伤 | 第41页 |
| ·抗性愈伤的筛选和植株再生 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·培养基的选择 | 第41-42页 |
| ·愈伤诱导与继代 | 第41-42页 |
| ·筛选培养基的选择 | 第42页 |
| ·分化培养基的选择 | 第42页 |
| ·共培养的改进 | 第42-43页 |
| ·对共培养的新尝试 | 第43-44页 |
| 4 小结 | 第44页 |
| 5 讨论 | 第44-49页 |
| 第三章 水稻突变体库的建立和初步分析 | 第49-60页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·材料、质粒与菌株 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导及继代培养 | 第50页 |
| ·根癌农杆菌转化水稻愈伤 | 第50页 |
| ·抗性愈伤的筛选和植株再生 | 第50页 |
| ·水稻总DNA的提取 | 第50-51页 |
| ·转化植株的PCR分析 | 第51-52页 |
| ·引物 | 第51页 |
| ·扩增体系及扩增步骤 | 第51-52页 |
| ·扩增体系 | 第51页 |
| ·扩增步骤 | 第51-52页 |
| ·GUS组织化学染色检测 | 第52页 |
| ·试剂配制 | 第52页 |
| ·染色方法 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-55页 |
| ·T-DNA标记群体的获得 | 第52页 |
| ·拟转基因植株的PCR检测 | 第52-53页 |
| ·GUS组织检测 | 第53-54页 |
| ·突变体分析 | 第54-55页 |
| 3 小结 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |