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农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养转化体系优化及Bar基因转化研究

英文缩写表第1页
化学试剂第4-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-10页
1 引言第10-13页
2 材料与方法第13-22页
   ·植物表达载体pCAMBIA3301 转化农杆菌菌株EHA105第13-16页
     ·质粒、菌株、酶第13页
     ·细菌培养基第13页
     ·农杆菌EHA105 感受态的制备和转化第13-14页
     ·大肠杆菌DH5α感受态的制备和转化第14页
     ·碱裂解法小量提取质粒DNA第14-15页
     ·载体构建过程第15-16页
   ·农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养遗传转化第16-18页
     ·植物材料第16页
     ·大豆种子的萌发第16页
     ·农杆菌菌液的制备第16页
     ·农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养转化体系优化第16-17页
     ·农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养遗传转化过程第17-18页
   ·转基因再生植株的草铵膦筛选第18页
     ·植物材料第18页
     ·叶片针刺法和涂抹法草铵膦适宜筛选浓度的摸索第18页
     ·叶片针刺法和涂抹法对转基因再生植株进行草铵膦筛选第18页
   ·转基因植株的分子水平检测第18-22页
     ·T_0/T_1 代转基因植株的PCR 检测第18-20页
     ·T_1 代转基因植株的RT-PCR 检测第20-22页
3 结果与分析第22-36页
   ·植物表达载体pCAMBIA3301 转化农杆菌菌株EHA105 的酶切验证第22页
   ·农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养遗传转化体系的优化第22-28页
     ·蔗糖浓度和表面活性剂Silwet L-77 对转化效率的影响第22-24页
     ·不同侵染方式对转化效率的影响第24-25页
     ·重复侵染次数对转化效率的影响第25-26页
     ·不同侵染液浓度对转化效率的影响第26-27页
     ·不同大豆基因型对转化效率的影响第27页
     ·利用优化的大豆子叶节非组织培养遗传转化体系获得转基因植株第27-28页
   ·转基因植株抗草铵膦的筛选第28-32页
     ·叶片针刺法和涂抹法草铵膦适宜筛选浓度的摸索第28-29页
     ·叶片针刺法和涂抹法筛选效率的比较第29-30页
     ·不同大豆品种针刺法适宜草铵膦筛选浓度的确定第30-32页
   ·转基因植株的分子水平检测第32-36页
     ·冀豆16 号T_0 代转基因植株的PCR 检测第32-34页
     ·冀豆16 号T_1 代转基因植株的PCR 检测第34页
     ·冀豆16 号T_1 代转基因植株的RT-PCR 检测第34-36页
4 讨论第36-39页
   ·表面活性剂Silwet L-77 对转化效率的影响第36页
   ·蔗糖浓度对转化效率的影响第36-37页
   ·重复侵染对转化效率的影响第37页
   ·侵染液浓度对转化效率的影响第37-38页
   ·大豆基因型对转化效率的影响第38页
   ·草铵膦筛选方法及适宜筛选浓度的确定第38页
   ·转化植株的分子检测第38-39页
5 结论第39-40页
参考文献第40-47页
在读期间发表的学术论文第47页
附录第47-48页
作者简介第48-49页
致谢第49-50页

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