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抗肝炎新药双环醇的肝脏药理学作用机理研究

目录第1-7页
缩略词录第7-9页
中文摘要第9-14页
英文摘要第14-20页
前言第20-23页
第一部分 双环醇对肝细胞核以及DNA损伤的保护作用第23-57页
 内容提要第23-24页
 前言第24-25页
 材料和方法第25-35页
  1.动物处理第25-26页
  2.血清转氨酶测定第26页
  3.DNA片断化的测定及凋亡条带的观察第26-28页
  4.肝细胞核的制备第28页
  5.肝组织DNA的提取第28-29页
  6.化学发光法测定双环醇对小鼠肝细胞核及DNA氧化损伤的保护作用第29页
  7.肝中过氧化氢含量测定第29-30页
  8.血浆中TNFα含量测定第30页
  9.ELISA方法检测双环醇在体外对人可溶性TNFα受体的拮抗作用第30-31页
  10.EMSA方法测定肝细胞核提取物中NF-κB的活性第31-33页
  11.Western Blot分析肝胞浆中细胞色素C的含量第33-35页
 结果第35-50页
  1.Con A对小鼠肝脏的损伤作用第35页
  2.双环醇对Con A引起的小鼠血清中转氨酶升高的保护作用第35-37页
  3.双环醇对Con A引起肝脏中DNA小片段含量升高的保护作用第37-38页
  4.DNA凝胶电泳观察双环醇对Con A引起肝脏中DNA片断化(DNA-Ladder)出现的保护作用第38-40页
  5.化学发光法测定双环醇对CuSO_4-邻啡罗啉-维生素C-H_2O_2系统损伤DNA的保护作用第40-45页
  6.双环醇对Con A引起小鼠肝脏H_2O_2升高的抑制作用第45页
  7.双环醇对Con A引起小鼠循环中TNF α含量升高的抑制作用第45-46页
  8.双环醇在体外对人可溶性TNFα受体的拮抗作用第46-47页
  9.Western Blot方法检测双环醇对Con A引起小鼠干线粒体细胞色素C释放的影响第47-48页
  10.双环醇对Con A损伤小鼠肝细胞核中NF-κB活性的影响第48-50页
 讨论第50-53页
 小结第53-54页
 参考文献第54-57页
第二部分 双环醇对肝线粒体损伤的保护作用第57-86页
 内容提要第57-58页
 前言第58页
 材料和方法第58-66页
  1.肝线粒体的制备第58-59页
  2.血清转氨酶测定第59页
  3.肝脏病理光镜观察第59-60页
  4.线粒体中AST以及GSH的测定第60页
  5.肝线粒体膜流动性测定第60-61页
  6.肝线粒体肿胀度测定第61-62页
  7.肝胞浆中细胞色素C的含量分析(Western Blot法)第62-64页
  8.肝细胞核提取物中NF-κB活性检测(EMSA法)第64-66页
  9.肝线粒体超微结构电镜观察第66页
 实验结果第66-80页
  1.双环醇对AP引起的小鼠肝脏损伤的保护作用第66-68页
  2.双环醇对AP引起小鼠肝线粒体GSH和AST降低的保护作用第68-70页
  3.双环醇对AP引起小鼠肝线粒体膜流动性降低的保护作用第70页
  4.双环醇对小鼠肝线粒体肿胀的保护作用第70-77页
  5.Western Blot方法检测双环醇对AP引起小鼠肝线粒体细胞色素C释放的影响第77-78页
  6.AP损伤小鼠肝细胞核中NF-κB活性的变化第78页
  7.双环醇对AP引起小鼠肝线粒体超微结构损伤的影响第78-80页
 讨论第80-82页
 小结第82-83页
 参考文献第83-86页
第三部分 双环醇对人肝癌细胞株HepG_2促凋亡的作用第86-109页
 内容提要第86页
 前言第86-87页
 材料和方法第87-94页
  1.药物和试剂第87-88页
  2.细胞系及细胞培养条件第88页
  3.实验方法第88-94页
   ·双环醇对HepG_2细胞活力的影响(MTT法)第88-89页
   ·流式细胞计数测定双环醇诱导HePG_2细胞凋亡的作用第89-90页
   ·琼脂糖凝胶电泳检测双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用第90-91页
   ·Hoechst荧光染色显微观察双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用第91页
   ·流式细胞仪测定双环醇对HepG_2细胞线粒体膜电位(△ψm)的作用第91-92页
   ·Western Blot分析双环醇对HepG_2细胞内Caspase 3活性的影响第92-94页
 实验结果第94-104页
  1.双环醇对HepG_2细胞存活率的影响(MTT法)第94-95页
  2.流式细胞计数测定双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用第95-98页
  3.琼脂糖凝胶电泳检测双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用第98页
  4.Hoechst荧光染色显微观察双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用第98-101页
  5.流式细胞仪测定双环醇对HepG_2细胞线粒体膜电位(△ψm)的作用第101-102页
  6.Western Blot分析双环醇对HePG_2细胞内Caspase3活性的影响第102-104页
 讨论第104-106页
 小结第106-107页
 参考文献第107-109页
文献综述第109-119页
致谢第119-121页
博士期间已发表文章第121-130页

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