目录 | 第1-7页 |
缩略词录 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-14页 |
英文摘要 | 第14-20页 |
前言 | 第20-23页 |
第一部分 双环醇对肝细胞核以及DNA损伤的保护作用 | 第23-57页 |
内容提要 | 第23-24页 |
前言 | 第24-25页 |
材料和方法 | 第25-35页 |
1.动物处理 | 第25-26页 |
2.血清转氨酶测定 | 第26页 |
3.DNA片断化的测定及凋亡条带的观察 | 第26-28页 |
4.肝细胞核的制备 | 第28页 |
5.肝组织DNA的提取 | 第28-29页 |
6.化学发光法测定双环醇对小鼠肝细胞核及DNA氧化损伤的保护作用 | 第29页 |
7.肝中过氧化氢含量测定 | 第29-30页 |
8.血浆中TNFα含量测定 | 第30页 |
9.ELISA方法检测双环醇在体外对人可溶性TNFα受体的拮抗作用 | 第30-31页 |
10.EMSA方法测定肝细胞核提取物中NF-κB的活性 | 第31-33页 |
11.Western Blot分析肝胞浆中细胞色素C的含量 | 第33-35页 |
结果 | 第35-50页 |
1.Con A对小鼠肝脏的损伤作用 | 第35页 |
2.双环醇对Con A引起的小鼠血清中转氨酶升高的保护作用 | 第35-37页 |
3.双环醇对Con A引起肝脏中DNA小片段含量升高的保护作用 | 第37-38页 |
4.DNA凝胶电泳观察双环醇对Con A引起肝脏中DNA片断化(DNA-Ladder)出现的保护作用 | 第38-40页 |
5.化学发光法测定双环醇对CuSO_4-邻啡罗啉-维生素C-H_2O_2系统损伤DNA的保护作用 | 第40-45页 |
6.双环醇对Con A引起小鼠肝脏H_2O_2升高的抑制作用 | 第45页 |
7.双环醇对Con A引起小鼠循环中TNF α含量升高的抑制作用 | 第45-46页 |
8.双环醇在体外对人可溶性TNFα受体的拮抗作用 | 第46-47页 |
9.Western Blot方法检测双环醇对Con A引起小鼠干线粒体细胞色素C释放的影响 | 第47-48页 |
10.双环醇对Con A损伤小鼠肝细胞核中NF-κB活性的影响 | 第48-50页 |
讨论 | 第50-53页 |
小结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
第二部分 双环醇对肝线粒体损伤的保护作用 | 第57-86页 |
内容提要 | 第57-58页 |
前言 | 第58页 |
材料和方法 | 第58-66页 |
1.肝线粒体的制备 | 第58-59页 |
2.血清转氨酶测定 | 第59页 |
3.肝脏病理光镜观察 | 第59-60页 |
4.线粒体中AST以及GSH的测定 | 第60页 |
5.肝线粒体膜流动性测定 | 第60-61页 |
6.肝线粒体肿胀度测定 | 第61-62页 |
7.肝胞浆中细胞色素C的含量分析(Western Blot法) | 第62-64页 |
8.肝细胞核提取物中NF-κB活性检测(EMSA法) | 第64-66页 |
9.肝线粒体超微结构电镜观察 | 第66页 |
实验结果 | 第66-80页 |
1.双环醇对AP引起的小鼠肝脏损伤的保护作用 | 第66-68页 |
2.双环醇对AP引起小鼠肝线粒体GSH和AST降低的保护作用 | 第68-70页 |
3.双环醇对AP引起小鼠肝线粒体膜流动性降低的保护作用 | 第70页 |
4.双环醇对小鼠肝线粒体肿胀的保护作用 | 第70-77页 |
5.Western Blot方法检测双环醇对AP引起小鼠肝线粒体细胞色素C释放的影响 | 第77-78页 |
6.AP损伤小鼠肝细胞核中NF-κB活性的变化 | 第78页 |
7.双环醇对AP引起小鼠肝线粒体超微结构损伤的影响 | 第78-80页 |
讨论 | 第80-82页 |
小结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
第三部分 双环醇对人肝癌细胞株HepG_2促凋亡的作用 | 第86-109页 |
内容提要 | 第86页 |
前言 | 第86-87页 |
材料和方法 | 第87-94页 |
1.药物和试剂 | 第87-88页 |
2.细胞系及细胞培养条件 | 第88页 |
3.实验方法 | 第88-94页 |
·双环醇对HepG_2细胞活力的影响(MTT法) | 第88-89页 |
·流式细胞计数测定双环醇诱导HePG_2细胞凋亡的作用 | 第89-90页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用 | 第90-91页 |
·Hoechst荧光染色显微观察双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用 | 第91页 |
·流式细胞仪测定双环醇对HepG_2细胞线粒体膜电位(△ψm)的作用 | 第91-92页 |
·Western Blot分析双环醇对HepG_2细胞内Caspase 3活性的影响 | 第92-94页 |
实验结果 | 第94-104页 |
1.双环醇对HepG_2细胞存活率的影响(MTT法) | 第94-95页 |
2.流式细胞计数测定双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用 | 第95-98页 |
3.琼脂糖凝胶电泳检测双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用 | 第98页 |
4.Hoechst荧光染色显微观察双环醇诱导HepG_2细胞凋亡的作用 | 第98-101页 |
5.流式细胞仪测定双环醇对HepG_2细胞线粒体膜电位(△ψm)的作用 | 第101-102页 |
6.Western Blot分析双环醇对HePG_2细胞内Caspase3活性的影响 | 第102-104页 |
讨论 | 第104-106页 |
小结 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-109页 |
文献综述 | 第109-119页 |
致谢 | 第119-121页 |
博士期间已发表文章 | 第121-130页 |