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人乳腺癌细胞MCF-7紫杉醇耐药细胞株的建立及其耐药机制的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 绪言第11-18页
   ·背景第11-16页
     ·肿瘤治疗的方法和化疗药物第11-13页
     ·肿瘤多药耐药的产生第13页
     ·肿瘤多药耐药机制第13-14页
     ·肿瘤多药耐药的处理方法第14-16页
     ·体外多药耐药模型建立的意义和方法第16页
   ·课题研究的意义第16-17页
   ·课题研究的内容第17-18页
第二章 两株人乳腺癌细胞MCF-7 紫杉醇耐药模型的建立第18-26页
   ·实验材料、仪器第18-19页
     ·试验材料第18页
     ·实验试剂第18-19页
     ·实验仪器第19页
   ·实验方法第19-22页
     ·细胞培养液第19-20页
     ·细胞培养配置第20页
     ·磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B, SRB)染色法第20页
     ·阿霉素对MCF-7/S 细胞的生长抑制率及IC_(50) 的检测第20-21页
     ·耐药细胞模型的建立第21页
     ·紫杉醇作用于耐药细胞的IC_(50) 及耐药指数第21页
     ·耐药细胞耐药稳定性的测定第21页
     ·细胞内Taxol 聚积的鉴定第21-22页
     ·数据分析第22页
   ·实验结果第22-24页
     ·不同浓度紫杉醇对MCF-7/S 细胞生长抑制率和IC_(50)第22页
     ·紫杉醇对两株耐药细胞的IC_(50)第22-23页
     ·耐药细胞的耐药稳定第23页
     ·耐药细胞中紫杉醇蓄积的鉴定第23-24页
   ·讨论第24-25页
   ·本章小结第25-26页
第三章 耐药细胞多药耐药谱的分析第26-34页
   ·实验材料、仪器第27-28页
     ·实验材料第27页
     ·实验试剂第27-28页
     ·实验仪器第28页
   ·实验方法第28-29页
     ·细胞培养第28页
     ·药物浓度梯度的选择第28页
     ·各种药物对MCF-7/S 和耐药细胞的药敏性的测定第28-29页
     ·数据分析第29页
   ·实验结果第29-32页
     ·耐药谱的测定第29-32页
   ·讨论第32-33页
     ·耐药指数的分析第32-33页
     ·作用机制分析第33页
   ·本章小结第33-34页
第四章 耐药细胞的生物学特性研究第34-50页
   ·实验材料、仪器第34-35页
     ·实验材料第34页
     ·实验试剂第34-35页
     ·实验仪器第35页
   ·实验方法第35-38页
     ·MCF-7/S 和耐药细胞的生长曲线和和倍增时间第35页
     ·MCF-7/S 和耐药细胞在低营养条件下的生长情况第35-36页
     ·形态学观察第36页
     ·流式细胞术(FCM)分析细胞周期分布第36页
     ·免疫细胞化学法检测肿瘤细胞耐药相关蛋白的表达情况第36-38页
     ·侧群(Side Population, SP)细胞的检测第38页
     ·数据分析第38页
   ·实验结果第38-48页
     ·MCF-7/S 细胞和耐药细胞的生长曲线和倍增时间第38-39页
     ·MCF-7/S 细胞和耐药细胞在低营养条件下的生长情况第39-40页
     ·形态学分析第40-41页
     ·细胞周期分布第41-42页
     ·肿瘤细胞生化标志物的表达情况第42-47页
     ·细胞侧群的分布第47-48页
   ·讨论第48-49页
   ·本章小结第49-50页
第五章 肿瘤多药耐药机制的研究第50-64页
   ·实验材料、仪器第50-51页
     ·实验材料第50页
     ·实验试剂第50-51页
     ·实验仪器第51页
   ·实验方法第51-55页
     ·生物素化紫杉醇的合成及其制备第51-52页
     ·生物素化紫杉醇的活性鉴定第52-53页
     ·生物素化紫杉醇和亲和甄别磁珠的偶联第53页
     ·MCF-7/S 和MCF-7/Taxol~a 细胞的收集、裂解、蛋白提取第53页
     ·亲和甄别磁珠的生物淘洗第53-54页
     ·SDS-PAGE 分离、纯化和银染第54-55页
     ·LC-MS/MS 测序比对分析第55页
     ·数据分析第55页
   ·实验结果第55-61页
     ·化学合成反应液的HPLC-MS 分析鉴定及其生物素化紫杉醇的制备第55-57页
     ·生物素化紫杉醇的活性鉴定第57-58页
     ·银染比较生物素化紫杉醇的结合蛋白第58-59页
     ·两株细胞中紫杉醇结合的差异蛋白序列分析第59-61页
   ·讨论第61-63页
   ·本章小结第63-64页
第六章 总结与展望第64-67页
   ·课题总结第64-65页
   ·课题发展方向第65-67页
致谢第67-68页
参考文献第68-72页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第72页

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