摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 绪言 | 第11-18页 |
·背景 | 第11-16页 |
·肿瘤治疗的方法和化疗药物 | 第11-13页 |
·肿瘤多药耐药的产生 | 第13页 |
·肿瘤多药耐药机制 | 第13-14页 |
·肿瘤多药耐药的处理方法 | 第14-16页 |
·体外多药耐药模型建立的意义和方法 | 第16页 |
·课题研究的意义 | 第16-17页 |
·课题研究的内容 | 第17-18页 |
第二章 两株人乳腺癌细胞MCF-7 紫杉醇耐药模型的建立 | 第18-26页 |
·实验材料、仪器 | 第18-19页 |
·试验材料 | 第18页 |
·实验试剂 | 第18-19页 |
·实验仪器 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-22页 |
·细胞培养液 | 第19-20页 |
·细胞培养配置 | 第20页 |
·磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B, SRB)染色法 | 第20页 |
·阿霉素对MCF-7/S 细胞的生长抑制率及IC_(50) 的检测 | 第20-21页 |
·耐药细胞模型的建立 | 第21页 |
·紫杉醇作用于耐药细胞的IC_(50) 及耐药指数 | 第21页 |
·耐药细胞耐药稳定性的测定 | 第21页 |
·细胞内Taxol 聚积的鉴定 | 第21-22页 |
·数据分析 | 第22页 |
·实验结果 | 第22-24页 |
·不同浓度紫杉醇对MCF-7/S 细胞生长抑制率和IC_(50) | 第22页 |
·紫杉醇对两株耐药细胞的IC_(50) | 第22-23页 |
·耐药细胞的耐药稳定 | 第23页 |
·耐药细胞中紫杉醇蓄积的鉴定 | 第23-24页 |
·讨论 | 第24-25页 |
·本章小结 | 第25-26页 |
第三章 耐药细胞多药耐药谱的分析 | 第26-34页 |
·实验材料、仪器 | 第27-28页 |
·实验材料 | 第27页 |
·实验试剂 | 第27-28页 |
·实验仪器 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-29页 |
·细胞培养 | 第28页 |
·药物浓度梯度的选择 | 第28页 |
·各种药物对MCF-7/S 和耐药细胞的药敏性的测定 | 第28-29页 |
·数据分析 | 第29页 |
·实验结果 | 第29-32页 |
·耐药谱的测定 | 第29-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
·耐药指数的分析 | 第32-33页 |
·作用机制分析 | 第33页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
第四章 耐药细胞的生物学特性研究 | 第34-50页 |
·实验材料、仪器 | 第34-35页 |
·实验材料 | 第34页 |
·实验试剂 | 第34-35页 |
·实验仪器 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-38页 |
·MCF-7/S 和耐药细胞的生长曲线和和倍增时间 | 第35页 |
·MCF-7/S 和耐药细胞在低营养条件下的生长情况 | 第35-36页 |
·形态学观察 | 第36页 |
·流式细胞术(FCM)分析细胞周期分布 | 第36页 |
·免疫细胞化学法检测肿瘤细胞耐药相关蛋白的表达情况 | 第36-38页 |
·侧群(Side Population, SP)细胞的检测 | 第38页 |
·数据分析 | 第38页 |
·实验结果 | 第38-48页 |
·MCF-7/S 细胞和耐药细胞的生长曲线和倍增时间 | 第38-39页 |
·MCF-7/S 细胞和耐药细胞在低营养条件下的生长情况 | 第39-40页 |
·形态学分析 | 第40-41页 |
·细胞周期分布 | 第41-42页 |
·肿瘤细胞生化标志物的表达情况 | 第42-47页 |
·细胞侧群的分布 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·本章小结 | 第49-50页 |
第五章 肿瘤多药耐药机制的研究 | 第50-64页 |
·实验材料、仪器 | 第50-51页 |
·实验材料 | 第50页 |
·实验试剂 | 第50-51页 |
·实验仪器 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-55页 |
·生物素化紫杉醇的合成及其制备 | 第51-52页 |
·生物素化紫杉醇的活性鉴定 | 第52-53页 |
·生物素化紫杉醇和亲和甄别磁珠的偶联 | 第53页 |
·MCF-7/S 和MCF-7/Taxol~a 细胞的收集、裂解、蛋白提取 | 第53页 |
·亲和甄别磁珠的生物淘洗 | 第53-54页 |
·SDS-PAGE 分离、纯化和银染 | 第54-55页 |
·LC-MS/MS 测序比对分析 | 第55页 |
·数据分析 | 第55页 |
·实验结果 | 第55-61页 |
·化学合成反应液的HPLC-MS 分析鉴定及其生物素化紫杉醇的制备 | 第55-57页 |
·生物素化紫杉醇的活性鉴定 | 第57-58页 |
·银染比较生物素化紫杉醇的结合蛋白 | 第58-59页 |
·两株细胞中紫杉醇结合的差异蛋白序列分析 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
·本章小结 | 第63-64页 |
第六章 总结与展望 | 第64-67页 |
·课题总结 | 第64-65页 |
·课题发展方向 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第72页 |