中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-10页 |
本文英汉缩略词对照表 | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-14页 |
第二章 材料和方法 | 第14-35页 |
1.主要实验材料 | 第14-17页 |
·细胞株、菌株及质粒 | 第14-15页 |
·主要试剂及来源 | 第15-16页 |
·主要仪器设备及来源 | 第16-17页 |
2.实验技术路线 | 第17-18页 |
·pcDNA3.1-tat质粒的构建及鉴定 | 第17-18页 |
·pcDNA3.1-tat在huh-7中的表达 | 第18页 |
·pcDNA3.1-tat对HCV复制和基因表达的影响 | 第18页 |
3.实验方法 | 第18-35页 |
·pcDNA3.1和pNL4-3转化、提取与鉴定 | 第18-20页 |
·重组质粒pcDNA3.1-tat的构建及鉴定 | 第20-25页 |
·细胞转染实验 | 第25-27页 |
·RT-PCR检测pcDNA3.1-tat在huh-7中转录 | 第27-30页 |
·HIV-1 Tat蛋白表达的Western blot检测 | 第30-31页 |
·pcDNA3.1-tat与HCV复制子共转染huh-7细 | 第31-32页 |
·RT-PCR检测HCV正链 | 第32-33页 |
·Western blot检测HCV核心蛋白的表达水平 | 第33-35页 |
第三章 结果 | 第35-39页 |
1.Tat目的片断的PCR扩增 | 第35页 |
2.重组质粒pcDNA3.1-tat的酶切鉴定 | 第35-36页 |
3.重组质粒pcDNA3.1-tat的测序鉴定 | 第36页 |
4.RT-PCR检测pcDNA3.1-tat在huh-7中转录从转染 | 第36-37页 |
5.重组真核表达质粒表达鉴定 | 第37页 |
6.RT-PCR检测HIV-1 Tat对HCV RNA在huh-7中的复制的影响 | 第37-38页 |
7.Western blot检测HIV-1 Tat对HCV RNA在huh-7表达核心蛋白的影响 | 第38-39页 |
第四章 讨论 | 第39-44页 |
一、HIV-1 Tat真核表达载体的构建 | 第39-40页 |
二、HIV-1 Tat对HCV RNA复制和蛋白表达的影响 | 第40-44页 |
第五章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
综述 | 第49-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
读研期间学术成果 | 第58页 |