摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
·植物抵抗逆境胁迫的分子机制 | 第12-13页 |
·植物对逆境胁迫应答的信号转导途径 | 第13-16页 |
·不依赖Ca~(2+)的MAPK 信号转导通路 | 第13-14页 |
·依赖于Ca~(2+)的CDPK 信号转导通路 | 第14-15页 |
·依赖于Ca~(2+)的SOS 信号转导通路 | 第15-16页 |
·转录水平下植物水分胁迫应答基因的表达调控 | 第16-17页 |
·依赖ABA 信号转导的途径 | 第16页 |
·依赖ABA 但不需要蛋白质合成的信号传递途径 | 第16页 |
·依赖ABA 且需要蛋白质合成的信号转导途径 | 第16页 |
·不依赖ABA 的信号转导途径 | 第16-17页 |
·DREB 转录因子研究进展 | 第17-21页 |
·DREB 基因的结构特征及分类 | 第17-18页 |
·DREB 基因转录应答多种非生物胁迫 | 第18-19页 |
·DREB 参与生物胁迫 | 第19页 |
·DREB 参与依赖ABA 和非依赖ABA 的信号转导途径 | 第19-20页 |
·DREB 超表达在植物抗逆基因工程中的作用 | 第20-21页 |
·立题意义、研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
·立题意义 | 第21页 |
·研究内容 | 第21-22页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
第二章 小麦DREB 转录因子基因的表达特性分析 | 第23-30页 |
·材料与方法 | 第23-25页 |
·实验材料 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-25页 |
·植物材料的胁迫处理 | 第23-24页 |
·植物总RNA 提取与纯化 | 第24页 |
·RT-PCR(Reverse Transcription PCR) | 第24-25页 |
·结果与分析 | 第25-28页 |
·植物总RNA 提取 | 第25页 |
·基因表达特性分析 | 第25-28页 |
·W42 基因的表达特性分析 | 第25-26页 |
·TaDRE83 基因的表达特性分析 | 第26-27页 |
·TaDRE89 基因的表达特性分析 | 第27页 |
·TaDRE810 基因的表达特性分析 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
第三章 小麦DREB 转录因子基因的亚细胞定位分析 | 第30-46页 |
·材料与方法 | 第30-34页 |
·质粒、菌株和试剂 | 第30页 |
·方法 | 第30-34页 |
·NLS 区段的预测 | 第30页 |
·质粒提取 | 第30-31页 |
·E. coli DH5α热击感受态的制备 | 第31-32页 |
·PCR 产物和酶切产物的片段纯化 | 第32页 |
·连接产物热击转化 | 第32页 |
·亚细胞载体构建 | 第32-33页 |
·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-44页 |
·WoLF PSORT 预测结果 | 第34页 |
·目标片段的扩增及载体的构建 | 第34-40页 |
·TaDRE83 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第34-35页 |
·TaDRF1 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第35-37页 |
·W42 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第37-38页 |
·TaDRE89 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第38-39页 |
·TaDRE810 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第39-40页 |
·基因的亚细胞定位 | 第40-44页 |
·TaDRE83 基因的亚细胞定位 | 第40-41页 |
·TaDRF1 基因的亚细胞定位 | 第41-42页 |
·W42 基因的亚细胞定位 | 第42-43页 |
·TaDRE89 基因的亚细胞定位 | 第43-44页 |
·TaDRE810 基因的亚细胞定位 | 第44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
第四章 小麦DREB 转录因子的体内结合特异性和转录激活活性分析 | 第46-62页 |
·材料与方法 | 第46-51页 |
·质粒、菌株和试剂 | 第46页 |
·方法 | 第46-51页 |
·YepGAP 表达载体的构建 | 第46-48页 |
·酵母感受态的制备及转化 | 第48页 |
·酵母感受态的制备 | 第48页 |
·酵母热击转化 | 第48页 |
·转录因子的体内结合特异性和激活功能分析 | 第48-51页 |
·YepGAP 表达载体转化酵母报道子 | 第48-49页 |
·体内结合特异性和转录激活活性分析 | 第49页 |
·酵母的显色反应 | 第49-51页 |
·结果与分析 | 第51-61页 |
·YepGAP 表达载体的构建 | 第51-54页 |
·W42 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第51-52页 |
·TaDRF1 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第52页 |
·TaDRE82 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第52-53页 |
·TaDRE83 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第53页 |
·TaDRE89 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第53-54页 |
·TaDRE810 基因目标片段的扩增及载体的构建 | 第54页 |
·转录因子的体内结合特异性和转录激活分析 | 第54-61页 |
·W42 基因的体内结合特异性和转录激活分析 | 第54-56页 |
·TaDRF1 基因的体内结合特异性和转录激活分析 | 第56-57页 |
·TaDRE82 基因的体内结合特异性和转录激活分析 | 第57-58页 |
·TaDRE83 基因的体内结合特异性和转录激活分析 | 第58-59页 |
·TaDRE89 基因的体内结合特异性和转录激活分析 | 第59-60页 |
·TaDRE810 基因的体内结合特异性和转录激活分析 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
第五章 小麦DREB 转录因子基因W42 的功能鉴定 | 第62-71页 |
·材料与方法 | 第62-64页 |
·转基因材料、菌株及试剂 | 第62页 |
·方法 | 第62-64页 |
·植物转基因表达载体的构建 | 第62页 |
·农杆菌LBA4404 电击感受态细胞的制备和农杆菌的转化 | 第62-63页 |
·拟南芥种子的处理及播种 | 第63页 |
·农杆菌介导转化拟南芥 | 第63-64页 |
·转基因拟南芥的筛选 | 第64页 |
·转基因拟南芥植株逆境胁迫下的根长实验 | 第64页 |
·转基因拟南芥植株干旱胁迫下的存活率实验 | 第64页 |
·转基因拟南芥种子的萌发实验 | 第64页 |
·结果与分析 | 第64-70页 |
·pBI121-W42 转基因表达载体的构建 | 第64-65页 |
·pBI121-W42 转化农杆菌 | 第65-66页 |
·转基因拟南芥阳性植株筛选 | 第66页 |
·转W42 基因拟南芥植株耐盐性分析 | 第66-68页 |
·转基因拟南芥植株渗透胁迫下的萌发及根长实验 | 第68-69页 |
·转基因拟南芥植株干旱胁迫下的存活率实验 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
第六章 小麦转录因子TaDREB6 基因的克隆及鉴定 | 第71-79页 |
·材料与方法 | 第71-72页 |
·材料、菌株和试剂 | 第71页 |
·实验方法 | 第71-72页 |
·DNA 的提取--酚、氯仿法 | 第71-72页 |
·植物材料的胁迫处理 | 第72页 |
·植物总RNA 提取与纯化 | 第72页 |
·RT-PCR(Reverse Transcription PCR) | 第72页 |
·亚细胞载体的构建 | 第72页 |
·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第72页 |
·利用PCR 技术进行基因的染色体定位 | 第72页 |
·结果与分析 | 第72-77页 |
·TaDREB6 全长cDNA 的克隆及其同源性分析 | 第72-74页 |
·TaDREB6 基因的染色体定位 | 第74-75页 |
·TaDREB6 基因在干旱胁迫下的表达分析 | 第75-76页 |
·TaDREB6 融合载体的构建及亚细胞定位分析 | 第76-77页 |
·TaDREB6 亚细胞载体的构建 | 第76页 |
·TaDREB6 亚细胞定位分析 | 第76-77页 |
·讨论 | 第77-79页 |
第七章 结论与讨论 | 第79-81页 |
·主要结论 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
缩略词 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
作者简介 | 第89页 |