| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-20页 |
| 前言 | 第20-70页 |
| 1 鱼类疾病与防治 | 第20-25页 |
| ·感染鱼类的疾病种类 | 第20-21页 |
| ·牙鲆养殖及病害防治 | 第21-25页 |
| ·牙鲆养殖 | 第21-22页 |
| ·牙鲆常见疾病及防治 | 第22-25页 |
| 2 DNA 疫苗在水产养殖中的应用 | 第25-35页 |
| ·DNA 疫苗的发展 | 第26页 |
| ·鱼用DNA 疫苗的构建 | 第26-27页 |
| ·核酸疫苗产品的质量控制 | 第27-33页 |
| ·原材料的质量控制 | 第28页 |
| ·对核酸疫苗的要求 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA 载体的结构 | 第28-29页 |
| ·DNA 序列信息 | 第29页 |
| ·对工程菌的要求 | 第29页 |
| ·培养过程的质量控制 | 第29-30页 |
| ·纯化过程中的质量控制 | 第30页 |
| ·最终产品的质量控制 | 第30-33页 |
| ·鱼类DNA 疫苗的应用效果 | 第33-35页 |
| 3 疫苗免疫途径研究进展 | 第35-51页 |
| ·鱼用疫苗接种方法 | 第35-36页 |
| ·疫苗微胶囊化技术平台 | 第36-38页 |
| ·微球胶囊化技术 | 第38-40页 |
| ·微胶囊疫苗的释放 | 第40-42页 |
| ·口服疫苗接种传递系统 | 第42-50页 |
| ·OVDS的优越性 | 第43页 |
| ·OVDS的常用载体材料 | 第43-44页 |
| ·OVDS的制备 | 第44-47页 |
| ·PLA／PLGA微球的制备 | 第44-45页 |
| ·海藻酸微囊的制备 | 第45-46页 |
| ·改性淀粉微囊的制备 | 第46页 |
| ·肠溶包衣微粒的制备 | 第46-47页 |
| ·偶联抗原的生物囊泡制备 | 第47页 |
| ·微粒型OVDS的小肠吸收 | 第47-48页 |
| ·影响微粒吸收的因素 | 第48-49页 |
| ·粒径和微粒的疏水性 | 第48页 |
| ·微粒的剂量和给药赋形剂 | 第48-49页 |
| ·动物种类年龄及其进食情况 | 第49页 |
| ·提高微粒吸收率的方法 | 第49-50页 |
| ·存在问题和发展趋势 | 第50-51页 |
| 4 牙鲆淋巴囊肿病研究现状 | 第51-53页 |
| 5 鱼用核酸疫苗研究目的及展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-70页 |
| 1 核酸疫苗的制备及纯化 | 第70-79页 |
| 引言 | 第70-71页 |
| 1 材料与方法 | 第71-77页 |
| ·菌种和质粒 | 第71-72页 |
| ·工具酶及试剂 | 第72页 |
| ·重组真核表达载体的构建 | 第72-73页 |
| ·细菌小量培养 | 第73页 |
| ·细菌大量培养 | 第73页 |
| ·质粒DNA 少量快速提取 | 第73-75页 |
| ·煮沸法 | 第74页 |
| ·碱裂解法 | 第74-75页 |
| ·内毒素的清除 | 第75页 |
| ·内毒素的检测 | 第75-76页 |
| ·DNA 酶切反应 | 第76页 |
| ·质粒DNA 的纯度测定 | 第76-77页 |
| 2 结果与讨论 | 第77-79页 |
| ·内毒素的清除和鉴定 | 第77页 |
| ·重组子(pEGFP-N2-LCDV-cn- MCP0.6kb)酶切鉴定 | 第77-79页 |
| 2 淋巴囊肿病毒海藻酸盐口服微囊核酸疫苗的研制与免疫效果研究 | 第79-103页 |
| 摘要 | 第79-80页 |
| 1 引言 | 第80-81页 |
| 2 材料与方法 | 第81-88页 |
| ·材料 | 第81页 |
| ·核酸疫苗（pDNA）的制备 | 第81页 |
| ·海藻酸盐微球的制备工艺（载核酸疫苗） | 第81-82页 |
| ·微球特征的检测 | 第82-84页 |
| ·微球粒径分析 | 第82页 |
| ·微球表面形态分析 | 第82-83页 |
| ·傅立叶红外光谱分析 | 第83页 |
| ·产率，载药量和包被效率检测 | 第83页 |
| ·胃肠条件下的模拟释放 | 第83-84页 |
| ·包被在微球中超螺旋结构的百分比的检测 | 第84页 |
| ·微囊核酸疫苗的口服管理 | 第84-85页 |
| ·RT-PCR检测 | 第85-86页 |
| ·绿色免疫荧光蛋白检测 | 第86页 |
| ·病毒的分离和纯化 | 第86-87页 |
| ·间接法酶联免疫吸附试验 | 第87-88页 |
| 3 结果与讨论 | 第88-98页 |
| ·载药海藻酸盐微球的特征 | 第88-90页 |
| ·胃肠模拟条件下pDNA释放 | 第90-91页 |
| ·载核酸疫苗海藻酸盐微球的红外光谱分析 | 第91-92页 |
| ·超螺旋质粒的检测 | 第92-93页 |
| ·RT- PCR分析 | 第93-95页 |
| ·绿色荧光蛋白（GFP）的检测 | 第95-97页 |
| ·鱼对淋巴囊肿病毒（LCDV）的体液免疫响应 | 第97-98页 |
| 4 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-103页 |
| 3 淋巴囊肿病毒聚丙交酯乙二酸(PLGA)口服微囊核酸疫苗的研制与免疫效果研究 | 第103-130页 |
| 摘要 | 第103-104页 |
| 1 引言 | 第104-106页 |
| 2 材料和方法 | 第106-110页 |
| ·聚合物及其他试剂 | 第106页 |
| ·核酸疫苗的制备工艺 | 第106页 |
| ·水包油包水(W/O/W)复乳法微囊的体的合成 | 第106-107页 |
| ·微囊体特征的检测 | 第107-108页 |
| ·质粒（pDNA）完整的估计 | 第108-109页 |
| ·动物口服程序 | 第109页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第109页 |
| ·病毒的分离与纯化 | 第109页 |
| ·MCP 的表达与免疫荧光检测 | 第109-110页 |
| ·酶联免疫吸附试验（Indirect-ELISA) | 第110页 |
| 3 实验结果 | 第110-120页 |
| ·载核酸疫苗微囊体的特征 | 第110-113页 |
| ·PLGA微囊体中质粒的完整性 | 第113-115页 |
| ·RT- PCR 分析 | 第115页 |
| ·主要衣壳蛋白的表达与免疫荧光的检测 | 第115-118页 |
| ·牙鲆对淋巴囊肿病毒的体液免疫响应 | 第118-120页 |
| 4 讨论 | 第120-125页 |
| 5 结论 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-130页 |
| 4 淋巴囊肿病毒壳聚糖口服微囊核酸疫苗的研制和免疫效果研究 | 第130-154页 |
| 摘要 | 第130-131页 |
| 1 引言 | 第131-133页 |
| 2 材料和方法 | 第133-137页 |
| ·聚合物和试剂 | 第133页 |
| ·核酸疫苗的制备 | 第133页 |
| ·油包水乳化法微球的制备方法 | 第133-134页 |
| ·载疫苗微球特征 | 第134-135页 |
| ·包被前后质粒疫苗的完整性 | 第135页 |
| ·壳聚糖微球中的体外释放 | 第135-136页 |
| ·动物口服程序 | 第136页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第136页 |
| ·MCP 的表达与免疫荧光检测 | 第136页 |
| ·病毒的分离与纯化 | 第136页 |
| ·酶联免疫吸附试验（Indirect-ELISA) | 第136页 |
| ·数据分析 | 第136-137页 |
| 3 结果 | 第137-146页 |
| ·壳聚糖微球的特征 | 第137-138页 |
| ·载药壳聚糖微球中核酸疫苗完整性的检测 | 第138-139页 |
| ·载药壳聚糖微球中核酸疫苗的体外释放试验 | 第139-141页 |
| ·MCP基因表达的RT-PCR分析 | 第141-142页 |
| ·绿色荧光蛋白的检测 | 第142-145页 |
| ·鱼对淋巴囊肿病毒（LCDV）的体液免疫响应 | 第145-146页 |
| 4 讨论 | 第146-150页 |
| 5 结论 | 第150-151页 |
| 参考文献 | 第151-154页 |
| 论文结论 | 第154-156页 |
| 本论文的创新点 | 第156-157页 |
| 附录1 英文缩写词表 | 第157-158页 |
| 附录2 pEGFP-N2 载体图谱及多克隆位点 | 第158-162页 |
| 致谢 | 第162-163页 |
| 个人简历 | 第163-164页 |
| 发表的学术论文 | 第164-165页 |
