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麦角固醇抑制剂酮康唑对三孢布拉氏霉菌异戊二烯合成途径代谢调控的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
第一章 绪论第13-30页
   ·Blakeslea trispora代谢途径第13-14页
   ·类胡萝卜素的理化性质第14-16页
   ·类胡萝卜素的生理功能第16-17页
   ·辅酶Q的理化性质与生理功能第17-18页
   ·Blakeslea trispora发酵水平的研究第18-22页
     ·发酵培养条件第18-19页
     ·类胡萝卜素合成促进剂第19-20页
     ·番茄红素环化酶阻断剂第20-22页
   ·Blakeslea trispora关键基因及其代谢调控的研究第22-23页
   ·荧光定量PCR技术第23-24页
   ·蛋白质组分析技术第24-28页
     ·蛋白质组学的研究内容第25-26页
       ·蛋白质鉴定第25页
       ·翻译后修饰第25-26页
       ·蛋白质功能确定第26页
       ·分子医学第26页
     ·蛋白质组研究中的样品制备第26-27页
     ·蛋白质组研究中的蛋白质的分离、分析第27-28页
     ·蛋白质组生物信息学第28页
   ·本课题研究目的和意义第28-30页
第二章 酮康唑对Blakeslea trispora代谢产物合成的影响第30-40页
   ·酮康唑的介绍第30-32页
     ·酮康唑的结构与理化性质第30页
     ·酮康唑的作用机理与应用第30-32页
   ·实验材料与方法第32-35页
     ·菌种第32页
     ·培养基第32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要仪器第32-33页
     ·实验方法第33-35页
       ·培养条件第33页
       ·菌体干重的测定第33页
       ·β-胡萝卜素含量的测定第33-34页
       ·麦角固醇的提取与检测第34-35页
       ·辅酶Q_9的提取与测定第35页
   ·结果与讨论第35-38页
     ·酮康唑的添加浓度对代谢产物合成的影响第35-36页
     ·最适浓度酮康唑的添加对菌体合成麦角固醇的影响第36-37页
     ·最适浓度酮康唑的添加对菌体合成β-胡萝卜素和辅酶Q9的影响第37-38页
   ·本章小结第38-40页
第三章 酮康唑对Blakeslea trispora关键基因转录水平的影响第40-52页
   ·实验背景介绍第40页
   ·实验材料与方法第40-45页
     ·菌种第40页
     ·培养基第40页
     ·主要试剂第40-41页
     ·主要仪器第41页
     ·实验方法第41-45页
       ·菌种培养条件第41页
       ·RNA提取所需试剂与材料第41-42页
       ·总RNA的提取与检测第42-43页
       ·总RNA的反转录第43页
       ·tef1基因转录水平测定第43-44页
       ·荧光定量PCR引物设计第44页
       ·荧光定量PCR第44-45页
   ·结果与讨论第45-50页
     ·总RNA的提取与反转录第45-46页
     ·选择tef1作为内参基因的有效性第46-48页
     ·酮康唑的添加浓度对hmgR和carRA基因转录水平的影响第48-49页
     ·最适浓度酮康唑的添加对hmgR和carRA基因转录水平的影响第49-50页
   ·本章小结第50-52页
第四章 用于二维电泳的Blakeslea trispora总蛋白制备方法研究第52-68页
   ·实验背景介绍第52页
   ·实验材料与方法第52-61页
     ·菌种第52页
     ·培养基第52-53页
     ·主要试剂第53页
     ·主要仪器第53页
     ·实验方法第53-61页
       ·菌种培养条件第53页
       ·样品的制备第53页
       ·蛋白定量第53-55页
       ·双向电泳第55-60页
       ·银染第60-61页
   ·结果与讨论第61-67页
     ·用于双向电泳的总蛋白制备方法的建立第61-64页
       ·不同细胞破碎方法对蛋白提取的影响第61-63页
       ·不同提取液对蛋白提取的影响第63-64页
     ·双向电泳优化条件第64-67页
       ·不同IPG胶条的影响第64-66页
       ·不同上样缓冲液对双向电泳结果的影响第66-67页
   ·本章小结第67-68页
第五章 总结与展望第68-71页
   ·结论第68-70页
   ·建议第70-71页
参考文献第71-78页
附录一 实验药品第78-80页
附录二 实验主要设备第80-82页
致谢第82-83页
在读期间发表论文第83-84页
作者与指导教师简介第84-85页
北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书第85-86页

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