醋酸甲孕酮单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 动物性食品中兽药残留现状 | 第13页 |
| 2 动物性食品中兽药残留的原因 | 第13-14页 |
| 3 食品动物兽药残留的主要危害 | 第14-16页 |
| 4 各国关于动物性食品中兽药残留的规定及控制 | 第16页 |
| 5 兽药残留的检测方法 | 第16-17页 |
| 6 醋酸甲孕酮概况及危害 | 第17-18页 |
| 7 醋酸甲孕酮检测方法研究进展 | 第18-20页 |
| 8 兽药小分子人工抗原合成研究进展 | 第20-24页 |
| 引言 | 第24-25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-33页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·试剂与仪器 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-33页 |
| ·醋酸甲孕酮免疫原的合成 | 第25-26页 |
| ·人工抗原的鉴定 | 第26-27页 |
| ·MPA 多抗制备 | 第27-28页 |
| ·醋酸甲孕酮单抗的制备 | 第28-30页 |
| ·醋酸甲孕酮单抗的鉴定 | 第30-31页 |
| ·醋酸甲孕酮竞争ELISA 方法的建立 | 第31-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·人工抗原鉴定 | 第33-35页 |
| ·MPA-3-(O-羧甲基)肟（MPS）质谱分析 | 第33页 |
| ·人工抗原紫外扫描 | 第33-34页 |
| ·偶联物蛋白浓度的测定 | 第34页 |
| ·偶联物中半抗原与载体蛋白结合比的估算 | 第34页 |
| ·人工抗原及载体SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第34-35页 |
| ·多抗血清抗体效价和特异性测定 | 第35页 |
| ·多抗血清效价测定 | 第35页 |
| ·多抗特异性分析 | 第35页 |
| ·细胞融合及亚克隆 | 第35-36页 |
| ·醋酸甲孕酮单抗的鉴定 | 第36-37页 |
| ·杂交瘤细胞染色体分析 | 第36-37页 |
| ·单抗亚型分析 | 第37页 |
| ·杂交瘤细胞株的稳定性及抗体效价 | 第37页 |
| ·醋酸甲孕酮竞争ELISA 方法建立结果 | 第37-41页 |
| ·包被抗原和一抗工作浓度的确定 | 第37-38页 |
| ·包被条件的确定 | 第38页 |
| ·封闭液的选择 | 第38页 |
| ·封闭时间的选择 | 第38页 |
| ·抗原抗体温育时间的确定 | 第38-39页 |
| ·底物作用时间的确定 | 第39页 |
| ·醋酸甲孕酮单抗 50%抑制质量浓度的测定 | 第39页 |
| ·醋酸甲孕酮单抗特异性鉴定 | 第39-41页 |
| 3 讨论 | 第41-45页 |
| ·完全抗原的制备 | 第41页 |
| ·醋酸甲孕酮完全抗原的定性定量分析 | 第41页 |
| ·偶联比的选择 | 第41-42页 |
| ·免疫程序及对抗体产生的影响 | 第42页 |
| ·细胞培养 | 第42-43页 |
| ·阳性细胞克隆化 | 第43页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第43页 |
| ·抗原抗体最佳工作浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·关于封闭条件的确定 | 第44-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录A 主要试剂配制 | 第50-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
| 在读期间撰写的学术论文 | 第55页 |
