转cry8Ca基因烟草抗蛴螬活性的评价
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| ·我国蛴螬的发生危害 | 第11-13页 |
| ·花生蛴螬的危害 | 第11-12页 |
| ·草坪蛴螬的危害 | 第12页 |
| ·蛴螬的其它危害 | 第12-13页 |
| ·金龟子的生态策略和防治对策 | 第13-14页 |
| ·生态策略 | 第13页 |
| ·防治对策 | 第13-14页 |
| ·苏云金芽孢杆菌研究概况 | 第14-16页 |
| ·Bt 产业化现状 | 第14-15页 |
| ·苏云金芽孢杆菌防治蛴螬的研究 | 第15页 |
| ·cry 杀虫蛋白基因 | 第15页 |
| ·对蛴螬有杀虫活性的cry8 类基因 | 第15-16页 |
| ·转BT 基因植物概况 | 第16-17页 |
| ·CRY8 类转基因植物研究 | 第17-18页 |
| ·转BT 基因植物的检测及抗虫性 | 第18-20页 |
| ·外源基因整合水平的检测 | 第18页 |
| ·外源基因转录水平的检测 | 第18-19页 |
| ·蛋白质水平的检测 | 第19页 |
| ·抗虫性鉴定 | 第19-20页 |
| ·本项研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·供试材料 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要溶液的配制 | 第22-24页 |
| ·MS 培养基配方 | 第22页 |
| ·分化培养基 | 第22-23页 |
| ·生根培养基 | 第23页 |
| ·CTAB 溶液的配制 | 第23页 |
| ·免疫球蛋白（IgG）的酶标记所用溶液 | 第23页 |
| ·ELISA 所需缓冲液 | 第23-24页 |
| ·转基因烟草的培植 | 第24页 |
| ·烟草DNA 检测 | 第24-25页 |
| ·CTAB 的方法提取烟草基因组DNA | 第24-25页 |
| ·PCR 检测 | 第25页 |
| ·烟草RNA 斑点杂交分析 | 第25-27页 |
| ·烟草总RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·目的DNA 片段的纯化 | 第26页 |
| ·探针标记 | 第26页 |
| ·杂交 | 第26页 |
| ·严谨洗涤 | 第26-27页 |
| ·免疫检测 | 第27页 |
| ·烟草植株的组织培养 | 第27页 |
| ·双抗夹心ELISA 检测 | 第27-29页 |
| ·免疫球蛋白（IgG）的酶标记 | 第27-28页 |
| ·双抗夹心(DAS)ELISA 的检测程序 | 第28页 |
| ·封闭液的优选 | 第28页 |
| ·TMB 底物作用时间的优选 | 第28页 |
| ·包被液的优选 | 第28页 |
| ·提取液的优选 | 第28-29页 |
| ·转基因烟草蛋白含量的检测 | 第29页 |
| ·数据统计 | 第29页 |
| ·金龟子的人工饲养 | 第29-30页 |
| ·成虫的采集和饲养 | 第29页 |
| ·幼虫的饲养 | 第29页 |
| ·蛹的处理 | 第29-30页 |
| ·转基因烟草抗虫性鉴定 | 第30-31页 |
| ·不同土壤条件对卵和幼虫的影响 | 第30页 |
| ·供试烟草抗虫性指标的调查 | 第30页 |
| ·烟草地下部危害的分级标准 | 第30-31页 |
| ·幼虫死亡率调查 | 第31页 |
| ·数据统计 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-43页 |
| ·烟草种子的表面消毒药剂筛选 | 第32页 |
| ·转基因烟草的PCR 检测 | 第32-33页 |
| ·烟草RNA 斑点杂交分析 | 第33页 |
| ·DAS-ELISA 检测烟草中的杀虫蛋白 | 第33-37页 |
| ·抗体包被量与酶标抗体结合物浓度的优化 | 第33-34页 |
| ·封闭液的优选 | 第34页 |
| ·TMB 底物作用时间的优选 | 第34-35页 |
| ·包被液的优选 | 第35页 |
| ·提取液的优选 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草Cry8C 蛋白的含量 | 第36-37页 |
| ·金龟子饲养和生测条件的优化 | 第37-38页 |
| ·室内种群的建立和继代饲养 | 第37-38页 |
| ·影响金龟子生长发育的条件 | 第38页 |
| ·转基因烟草的抗虫性 | 第38-43页 |
| ·不同土壤条件对铜绿丽金龟和烟草生长的影响 | 第38-39页 |
| ·蛴螬对转cry8Ca 基因烟草生物学性状的影响 | 第39-40页 |
| ·黄褐丽、铜绿丽金龟对转基因烟草的危害测定 | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| ·转基因烟草的分子检测 | 第43页 |
| ·转基因烟草的蛋白表达 | 第43-44页 |
| ·转CRY8CA 基因烟草的抗虫性测定 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 发表论文 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
