摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
目录 | 第9-13页 |
插图和附表清单 | 第13-14页 |
缩略语索引 | 第14-16页 |
第一章 绪论 | 第16-22页 |
·甲型副伤寒的流行病学 | 第16-17页 |
·甲型副伤寒的临床症状及致病机理 | 第17页 |
·甲型副伤寒疫苗的发展状况 | 第17-21页 |
·灭活疫苗 | 第18页 |
·减毒活疫苗 | 第18页 |
·亚单位疫苗 | 第18页 |
·BG(Bacterial Ghost,BG)疫苗 | 第18-21页 |
·本论文的目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 S.paratyphi A BG的构建与鉴定 | 第22-46页 |
·材料 | 第22-26页 |
·菌株与质粒 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·培养基及主要溶液的配制 | 第23-25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-35页 |
·pBV220-E的构建 | 第26-30页 |
·pBV220-E的鉴定 | 第30页 |
·Em(E的突变片段)裂解效果与表达载体关系的摸索 | 第30-32页 |
·pBV220-Em/S.paratyphi A的构建 | 第32-34页 |
·pBV220-Em重组质粒在S paratyphi A中诱导条件的摸索 | 第34页 |
·pBV220-Em/S.paratyphi A诱导后生长曲线的测定 | 第34-35页 |
·TEM观察S.paratyphi A BG形态 | 第35页 |
·结果 | 第35-42页 |
·E基因的PCR扩增 | 第35页 |
·pBV220-E的鉴定 | 第35-36页 |
·测序结果 | 第36-37页 |
·Em PCR结果 | 第37-38页 |
·pFN18the-Em酶切结果 | 第38页 |
·Em裂解效果与表达载体关系 | 第38-39页 |
·pBV220-Em/S.paratyphi A的鉴定 | 第39页 |
·pBV220-Em重组质粒在S.paratyphi A中的诱导表达 | 第39-41页 |
·pBV220-Em/S.paratyphi A的诱导后生长曲线 | 第41页 |
·S.paratyphi A BG的TEM观察结果 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
·E基因引物设计 | 第42-43页 |
·表达载体的选择 | 第43页 |
·Em裂解效果 | 第43-44页 |
·影响裂解率因素 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第三章 S.paratyphi A BG的制备及免疫保护性研究 | 第46-68页 |
·材料 | 第46-48页 |
·菌株与质粒 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46-47页 |
·培养基及主要溶液的配制 | 第47-48页 |
·实验动物 | 第48页 |
·方法 | 第48-55页 |
·S.paratyphi A BG的制备 | 第48-49页 |
·S.paratyphi A灭活疫苗的制备 | 第49-50页 |
·实验动物分组与免疫 | 第50页 |
·小鼠体重称量及免疫后现象观察 | 第50页 |
·血清采集 | 第50-51页 |
·脾淋巴细胞分离 | 第51页 |
·ELISPOT实验 | 第51-52页 |
·全菌ELISA实验 | 第52-53页 |
·MLD的测定 | 第53-54页 |
·攻毒 | 第54页 |
·攻毒后小鼠体重称量及现象观察 | 第54页 |
·攻毒后小鼠脏器菌量测定 | 第54页 |
·噬菌体鉴定小鼠脏器分离的细菌 | 第54页 |
·攻毒后存活小鼠血清特异性IgG抗体滴度测定 | 第54-55页 |
·数据处理 | 第55页 |
·结果 | 第55-63页 |
·S.parathphi A BG的获得 | 第55页 |
·S.paratyphi A灭活疫苗的获得 | 第55页 |
·免疫后小鼠体重及生理变化 | 第55-56页 |
·免疫过程中IgG变化 | 第56-58页 |
·抗原特异性IFN-γ或IL-4分泌细胞 | 第58-59页 |
·MLD测量结果 | 第59-60页 |
·攻毒后小鼠存亡情况 | 第60页 |
·攻毒后存活小鼠体重及生理变化 | 第60-61页 |
·攻毒后小鼠脏器细菌学分析 | 第61-62页 |
·噬菌体鉴定攻毒后小鼠脏器分离的细菌 | 第62页 |
·攻毒后存活小鼠血清抗原特异性IgG抗体滴度 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-67页 |
·BG的应用 | 第63页 |
·膜影菌制备过程中未灭活菌的处理 | 第63页 |
·动物模型的选择 | 第63-64页 |
·细菌攻毒剂量的确定 | 第64页 |
·BG免疫原性评价 | 第64-65页 |
·BG免疫保护性评价 | 第65-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
第四章 全文总结 | 第68-69页 |
第五章 展望 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-74页 |
附录A | 第74页 |