| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-50页 |
| ·高等植物非生物胁迫研究进展 | 第14-21页 |
| ·高等植物非生物胁迫与基因 | 第14-17页 |
| ·高等植物非生物胁迫与转录因子 | 第17-19页 |
| ·高等植物非生物胁迫与蛋白质组学 | 第19-21页 |
| ·展望 | 第21页 |
| ·蜡梅(Chimonanthus.praecox)研究进展 | 第21-26页 |
| ·蜡梅品种分类 | 第22-24页 |
| ·蜡梅栽培与繁殖 | 第24-25页 |
| ·蜡梅观赏应用研究 | 第25页 |
| ·蜡梅化学成分及药理作用研究 | 第25-26页 |
| ·蜡梅分子生物学研究 | 第26页 |
| ·非特异性脂转移蛋白研究进展 | 第26-33页 |
| ·植物非特异脂转移蛋白的分类 | 第27-28页 |
| ·植物非特异脂转移蛋白的结构 | 第28-29页 |
| ·植物非特异脂转移蛋白的脂转移活性 | 第29-30页 |
| ·植物非特异脂转移蛋白的抗菌活性 | 第30-31页 |
| ·植物非特异脂转移蛋白--食物过敏原 | 第31-33页 |
| ·植物非特异脂转移蛋白与植物抗逆反应 | 第33页 |
| ·高等植物启动子的研究进展 | 第33-50页 |
| ·高等植物启动子的结构特征 | 第34-36页 |
| ·高等植物启动子的分类 | 第36-39页 |
| ·植物启动子的克隆方法 | 第39-44页 |
| ·启动子结构和功能的研究方法 | 第44-48页 |
| ·展望 | 第48-50页 |
| 第2章 引言 | 第50-52页 |
| 第3章 蜡梅nsLTP基因家族4个成员的克隆与分子特征分析 | 第52-78页 |
| ·实验材料 | 第52-54页 |
| ·方法 | 第54-60页 |
| ·EST序列特征分析及蜡梅非特异性脂转移蛋白cDNA序列的获得 | 第54页 |
| ·CpLTP基因cDNA序列真实性鉴定及生物信息学分析 | 第54-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-76页 |
| ·蜡梅nsLTP基因家族4个成员cDNA全长序列的获得与基因命名 | 第60-61页 |
| ·蜡梅nsLTP基因家族4个成员DNA片段克隆 | 第61页 |
| ·蜡梅nsLTP基因家族4个成员cDNA序列结构特征 | 第61-62页 |
| ·蜡梅nsLTP基因家族4个成员编码蛋白同源性 | 第62-66页 |
| ·蜡梅nsLTP基因家族4个成员编码蛋白性质与结构分析 | 第66-76页 |
| ·讨论 | 第76-77页 |
| ·小结 | 第77-78页 |
| 第4章 蜡梅nsLTP基因家族4个成员的原核表达及其产物抑菌活性分析 | 第78-96页 |
| ·实验材料 | 第78-80页 |
| ·蜡梅花cDNA文库 | 第78页 |
| ·菌种和载体 | 第78页 |
| ·主要试剂 | 第78页 |
| ·自配的主要试剂 | 第78-80页 |
| ·实验方法 | 第80-87页 |
| ·蜡梅nsLTP基因家族4个成员原核表达载体的构建 | 第80-83页 |
| ·异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导LTP-pET融合蛋白的表达 | 第83-84页 |
| ·SDS-PAGE检测融合蛋白的表达 | 第84页 |
| ·诱导条件优化 | 第84-85页 |
| ·融合蛋白的纯化回收 | 第85-86页 |
| ·抑菌试验 | 第86-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-94页 |
| ·蜡梅nsLTP基因家族4个成员原核表达载体的构建 | 第87-88页 |
| ·融合蛋白的小量表达分析 | 第88-89页 |
| ·诱导条件的优化 | 第89-92页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第92-93页 |
| ·体外抑菌实验 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| ·小结 | 第95-96页 |
| 第5章 蜡梅nsLTP基因家族4个成员非生物胁迫表达的荧光定量分析 | 第96-108页 |
| ·实验材料 | 第96页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第96页 |
| ·主要试剂 | 第96页 |
| ·实验方法 | 第96-100页 |
| ·蜡梅的不同胁迫处理 | 第96-97页 |
| ·RNA提取和cDNA—链合成 | 第97页 |
| ·蜡梅nsLTP基因在不同胁迫下表达的荧光定量分析 | 第97-100页 |
| ·结果与分析 | 第100-106页 |
| ·总RNA提取 | 第100-101页 |
| ·蜡梅nsLTP基因在不同胁迫下表达的荧光定量分析 | 第101-106页 |
| ·讨论 | 第106-107页 |
| ·小结 | 第107-108页 |
| 第6章 CpLTP3、CpLTP4基因启动子克隆及瞬时表达分析 | 第108-130页 |
| ·实验材料 | 第108-110页 |
| ·植物材料 | 第108页 |
| ·菌种和载体 | 第108页 |
| ·主要试剂 | 第108页 |
| ·主要设备 | 第108-109页 |
| ·常用溶液配方 | 第109页 |
| ·基本培养基配方 | 第109-110页 |
| ·实验方法 | 第110-116页 |
| ·蜡梅基因组DNA的提取、纯化 | 第110页 |
| ·hiTAIL-PCR法扩增启动子序列 | 第110-112页 |
| ·CpLTP3pro,CpLTP4pro启动子片段的获得 | 第112页 |
| ·克隆载体pMD-CpLTP3pro和pMD-CpLTP4pro的构建 | 第112-113页 |
| ·植物表达载体pBI121-CpLTP3pro和pBI121-CpLTP4pro的构建 | 第113-114页 |
| ·农杆菌感受态制备、转化及转化子的选择鉴定 | 第114-115页 |
| ·农杆菌介导的瞬时表达技术检测启动子活性 | 第115页 |
| ·转基因烟草的GUS活性组织化学染色检测 | 第115-116页 |
| ·结果与分析 | 第116-127页 |
| ·蜡梅基因组DNA的提取 | 第116页 |
| ·3 轮TAIL-PCR产物电泳结果 | 第116-118页 |
| ·目的片段回收及测序 | 第118-119页 |
| ·启动子的生物信息学分析 | 第119-123页 |
| ·克隆载体pMD-CpLTP3pro和pMD-CpLTP4pro的构建 | 第123-124页 |
| ·植物表达载体pBI121-CpLTP3pro和pBI121-CpLTP4pro的构建 | 第124-125页 |
| ·含植物表达载体质粒pBI121-CpLTP3pro和pBI121-CpLTP4pro农杆菌L8A4404的获得 | 第125-127页 |
| ·瞬时表达技术检测启动子活性 | 第127页 |
| ·讨论 | 第127-129页 |
| ·小结 | 第129-130页 |
| 第7章 总结 | 第130-132页 |
| ·主要结论 | 第130页 |
| ·主要创新点 | 第130-131页 |
| ·下一步研究设想 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-146页 |
| 附录1 缩略词表 | 第146-148页 |
| 附录2 学习期间发表的论文和参加的科研项目 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
