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镉胁迫下青蛤抗氧化酶系活性及免疫相关基因的克隆与表达研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 概述第12-26页
   ·青蛤的相关研究背景第12-13页
     ·青蛤概述第12页
     ·青蛤养殖现状第12-13页
   ·贝类病害及大面积死亡现象第13-16页
     ·我国贝类养殖所面临问题第13-15页
     ·重金属污染与贝类养殖第15-16页
   ·贝类免疫相关研究进展第16-18页
     ·贝类细胞内免疫概述第17页
     ·贝类在重金属胁迫下的体液免疫第17-18页
   ·金属硫蛋白第18-22页
     ·金属硫蛋白的结构第19-20页
     ·金属硫蛋白的种类第20页
     ·金属硫蛋白的功能第20-21页
     ·金属硫蛋白的应用和研究进展第21-22页
   ·硫氧还蛋白第22-24页
     ·硫氧还蛋白的结构第23页
     ·硫氧还蛋白的分类第23页
     ·硫氧还蛋白的功能第23-24页
   ·研究目的、意义及创新点第24-26页
     ·研究目的第24页
     ·研究意义第24-25页
     ·本研究创新点第25-26页
第二章 镉胁迫对青蛤抗氧化酶系活性的影响第26-38页
   ·前言第26-27页
   ·实验材料与方法第27-32页
     ·实验材料第27-28页
       ·实验动物采集第27-28页
       ·实验主要仪器及试剂第28页
     ·实验方法第28-32页
       ·重金属镉胁迫实验第28-29页
       ·实验样品制备第29页
       ·酶液蛋白含量测定第29页
       ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第29-30页
       ·过氧化氢酶(CAT)活性测定第30-31页
       ·谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性测定第31-32页
       ·实验数据处理第32页
   ·实验结果第32-35页
     ·Cd胁迫下青蛤血清和肝脏中SOD酶活力变化第32-33页
     ·Cd胁迫下青蛤血清和肝脏中CAT酶活力变化第33-34页
     ·Cd胁迫下青蛤血清和肝脏中GPx酶活力变化第34-35页
   ·讨论第35-38页
第三章 青蛤金属硫蛋白及硫氧还蛋白基因的克隆与结构分析第38-52页
   ·前言第38-39页
   ·实验材料与方法第39-41页
     ·实验材料第39-40页
       ·实验动物第39页
       ·主要仪器第39页
       ·主要试剂第39-40页
     ·实验方法第40-41页
       ·重金属镉胁迫实验第40页
       ·青蛤cDNA文库的构建与测序第40页
       ·青蛤金属硫蛋白及硫氧还蛋白的筛选与生物信息学分析第40-41页
   ·结果第41-50页
     ·青蛤cDNA文库的评价与金属硫蛋白及硫氧还蛋白基因的筛选第41页
     ·青蛤金属硫蛋白基因的分析第41-45页
       ·青蛤金属硫蛋白全长cDNA序列的分析第41-42页
       ·青蛤金属硫蛋白的空间结构预测第42-43页
       ·青蛤金属硫蛋白基因的同源性分析第43-44页
       ·青蛤金属硫蛋白基因的系统学分析第44-45页
     ·青蛤硫氧还蛋白基因的分析第45-50页
       ·青蛤硫氧还蛋白全长cDNA序列的分析第45-47页
       ·青蛤硫氧还蛋白的空间结构预测第47页
       ·青蛤硫氧还蛋白基因的同源性分析第47-48页
       ·青蛤硫氧还蛋白基因的系统学分析第48-50页
   ·讨论第50-52页
第四章 青蛤金属硫蛋白及硫氧还蛋白基因的表达分析第52-69页
   ·前言第52-56页
     ·研究背景第52-53页
     ·实时定量RT-PCR检测技术第53-56页
   ·实验材料与方法第56-63页
     ·实验材料第56-58页
       ·实验仪器第56页
       ·实验试剂第56-57页
       ·培养基和试剂的配置第57页
       ·引物设计与合成第57-58页
     ·实验方法第58-63页
       ·青蛤暂养与重金属镉胁迫实验第58页
       ·青蛤总RNA的提取第58-59页
       ·cDNA模板第一链的合成第59-60页
       ·青蛤金属硫蛋白(MTs)基因的表达分析第60-62页
       ·青蛤硫氧还蛋白(Trx)基因的表达分析第62-63页
   ·结果第63-67页
     ·青蛤总RNA的提取第63页
     ·检验PCR产物的单一性第63-65页
     ·青蛤金属硫蛋白基因的表达分析第65-66页
     ·青蛤硫氧还蛋白基因的表达分析第66-67页
   ·讨论第67-69页
第五章 小结第69-71页
参考文献第71-84页
附录第84-85页
致谢第85页

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