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和厚朴酚与青蒿素协同抗鼻咽癌细胞的作用及其机制研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
目录第13-17页
引言第17-28页
 参考文献第24-28页
第一部分 文献回顾第28-55页
 第一章 细胞周期与肿瘤第28-34页
     ·肿瘤与细胞周期调控第28页
   ·细胞周期蛋白的种类和作用第28-34页
     ·cyclinD概述第28-29页
     ·cyclinD_1异常与肿瘤第29-30页
     ·cyclinE概述第30-31页
     ·cyclinE与肿瘤第31-32页
     ·P27~(kip1)概述第32-33页
     ·P27~(kip1)与肿瘤第33-34页
 第二章 细胞凋亡与肿瘤第34-39页
     ·细胞凋亡的概念第34页
   ·细胞凋亡的生物学特征及意义第34-35页
     ·形态学变化第34-35页
     ·生物化学变化第35页
     ·生物学意义第35页
     ·细胞凋亡与肿瘤第35-38页
     ·caspase与细胞凋亡第36-37页
     ·caspase的活化机制第37页
     ·与caspase有关的凋亡通路第37-38页
   ·Bcl-2家族与细胞凋亡第38-39页
 第三章 和厚朴酚抗肿瘤作用机制研究进展第39-42页
   ·抑制肿瘤细胞增殖第39页
   ·诱导多种肿瘤细胞凋亡第39-40页
   ·诱导分化第40页
   ·抑制酶的活性第40页
   ·抑制肿瘤新生血管的生成第40-41页
   ·细胞毒作用第41页
   ·与其他化疗药物联合应用发生协同作用第41-42页
 第四章 青蒿素抗肿瘤作用机制研究进展第42-45页
     ·铁-氧化应激-活性氧途径第42页
   ·抗血管生成作用第42-43页
   ·抑制端粒酶活性第43页
   ·下调线粒体膜电位诱导细胞凋亡第43页
   ·肿瘤细胞胀亡和凋亡第43页
   ·细胞周期阻滞第43-44页
   ·青蒿素类药物的联合用药第44-45页
 参考文献第45-55页
第二部分 实验研究第55-102页
 第一章 和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2、SPC-A-1、MGC-803细胞的生长抑制作用第55-66页
   ·材料与仪器第55-56页
     ·细胞株第55页
     ·主要试剂第55-56页
     ·主要实验设备第56页
     ·重要试剂配法第56页
   ·方法第56-58页
     ·细胞复苏和培养第56-57页
     ·细胞培养第57页
     ·药物制备第57页
     ·MTT法检测和厚朴酚、青蒿素对CNE-2、SPC-A-1、MGC-803、L-O2细胞的抑制作用第57页
     ·MTT法测定和厚朴酚与青蒿素合用对CNE-2、SPC-A-1、MGC-803细胞的抑制作用第57-58页
     ·数据分析第58页
   ·结果第58-63页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对细胞形态的影响第58页
     ·和厚朴酚、青蒿素单独作用对CNE-2细胞、SPC-A-1细胞、MGC-803细胞和L02细胞生长抑制作用第58-61页
     ·和厚朴酚、青蒿素联合作用效果第61-63页
   ·讨论第63-65页
  结论第65-66页
 第二章 和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用诱导鼻咽癌CNE-2细胞周期阻滞和细胞凋亡第66-76页
   ·材料与仪器第66-67页
     ·细胞株第66页
     ·主要试剂第66页
     ·主要实验设备第66-67页
   ·方法第67-69页
     ·细胞培养第67页
     ·流式细胞仪PI单染检测细胞周期第67-68页
     ·DAPI染色法观察和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞形态的影响第68页
     ·AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞凋亡的影响第68-69页
     ·数据分析第69页
   ·结果第69-72页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞周期分布的影响第69-70页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞凋亡形态的影响第70-71页
       ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对凋亡CNE-2细胞凋亡的影响第71-72页
   ·讨论第72-75页
     ·和厚朴酚与青蒿素联合应用阻滞CNE-2细胞于G_1期第73-74页
     ·和厚朴酚与青蒿素联合应用诱导CNE-2细胞凋亡第74-75页
  结论第75-76页
 第三章 和厚朴酚、青蒿素及二者联用诱导CNE-2细胞周期阻滞和凋亡的分子机制第76-94页
   ·材料与仪器第76-78页
     ·细胞株第76页
     ·主要试剂第76-77页
     ·主要仪器第77-78页
   ·方法第78-81页
     ·细胞培养第78页
     ·荧光定量PCR检测和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用cyclinD_1、cyclinE_1及P27mRNA的表达第78-80页
     ·Western Blot检测cytochrome c、Bax、Bcl-2 caspase-3的表达第80-81页
     ·流式细胞术检测Fas和FasL蛋白表达第81页
     ·数据分析第81页
   ·结果第81-89页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对cyclinD_1 mRNA表达的影响第81-82页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对cyclinE_1 mRNA表达的影响第82-84页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对P27 mRNA表达的影响第84-85页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对cytochrome c表达的影响第85-86页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞ΔΨm的影响第86-87页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合作用对Bax/Bcl-2的表达影响第87-88页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合作用对caspase-3表达的影响第88页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合作用对Fas/FasL蛋白表达的影响第88-89页
   ·讨论第89-93页
     ·细胞周期素与细胞周期调控第89-91页
     ·细胞凋亡第91-93页
  结论第93-94页
 第四章 和厚朴酚、青蒿素及二者联用对鼻咽癌CNE-2细胞COX-2表达的影响第94-102页
   ·材料与仪器第94-96页
     ·细胞株第94页
     ·主要试剂第94-95页
     ·主要仪器第95-96页
   ·方法第96-99页
     ·细胞培养第96页
     ·RT-PCR分析COX-2 mRNA表达的变化第96-97页
     ·Western Blot检测COX-2蛋白表达的影响第97-98页
     ·数据分析第98-99页
   ·结果第99-100页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对COX-2蛋白表达的影响第99页
     ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对COX-2 mRNA表达的影响第99-100页
   ·讨论第100-101页
     ·COX-2在鼻咽癌中的表达第100-101页
     ·和厚朴酚联合青蒿素作用CNE-2细胞对COX-2蛋白表达的影响第101页
  结论第101-102页
结语第102-103页
参考文献第103-109页
附录一第109-110页
附录二第110-116页
附录三第116-117页
致谢第117页

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