| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 目录 | 第13-17页 |
| 引言 | 第17-28页 |
| 参考文献 | 第24-28页 |
| 第一部分 文献回顾 | 第28-55页 |
| 第一章 细胞周期与肿瘤 | 第28-34页 |
| ·肿瘤与细胞周期调控 | 第28页 |
| ·细胞周期蛋白的种类和作用 | 第28-34页 |
| ·cyclinD概述 | 第28-29页 |
| ·cyclinD_1异常与肿瘤 | 第29-30页 |
| ·cyclinE概述 | 第30-31页 |
| ·cyclinE与肿瘤 | 第31-32页 |
| ·P27~(kip1)概述 | 第32-33页 |
| ·P27~(kip1)与肿瘤 | 第33-34页 |
| 第二章 细胞凋亡与肿瘤 | 第34-39页 |
| ·细胞凋亡的概念 | 第34页 |
| ·细胞凋亡的生物学特征及意义 | 第34-35页 |
| ·形态学变化 | 第34-35页 |
| ·生物化学变化 | 第35页 |
| ·生物学意义 | 第35页 |
| ·细胞凋亡与肿瘤 | 第35-38页 |
| ·caspase与细胞凋亡 | 第36-37页 |
| ·caspase的活化机制 | 第37页 |
| ·与caspase有关的凋亡通路 | 第37-38页 |
| ·Bcl-2家族与细胞凋亡 | 第38-39页 |
| 第三章 和厚朴酚抗肿瘤作用机制研究进展 | 第39-42页 |
| ·抑制肿瘤细胞增殖 | 第39页 |
| ·诱导多种肿瘤细胞凋亡 | 第39-40页 |
| ·诱导分化 | 第40页 |
| ·抑制酶的活性 | 第40页 |
| ·抑制肿瘤新生血管的生成 | 第40-41页 |
| ·细胞毒作用 | 第41页 |
| ·与其他化疗药物联合应用发生协同作用 | 第41-42页 |
| 第四章 青蒿素抗肿瘤作用机制研究进展 | 第42-45页 |
| ·铁-氧化应激-活性氧途径 | 第42页 |
| ·抗血管生成作用 | 第42-43页 |
| ·抑制端粒酶活性 | 第43页 |
| ·下调线粒体膜电位诱导细胞凋亡 | 第43页 |
| ·肿瘤细胞胀亡和凋亡 | 第43页 |
| ·细胞周期阻滞 | 第43-44页 |
| ·青蒿素类药物的联合用药 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-55页 |
| 第二部分 实验研究 | 第55-102页 |
| 第一章 和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2、SPC-A-1、MGC-803细胞的生长抑制作用 | 第55-66页 |
| ·材料与仪器 | 第55-56页 |
| ·细胞株 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·主要实验设备 | 第56页 |
| ·重要试剂配法 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| ·细胞复苏和培养 | 第56-57页 |
| ·细胞培养 | 第57页 |
| ·药物制备 | 第57页 |
| ·MTT法检测和厚朴酚、青蒿素对CNE-2、SPC-A-1、MGC-803、L-O2细胞的抑制作用 | 第57页 |
| ·MTT法测定和厚朴酚与青蒿素合用对CNE-2、SPC-A-1、MGC-803细胞的抑制作用 | 第57-58页 |
| ·数据分析 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-63页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对细胞形态的影响 | 第58页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素单独作用对CNE-2细胞、SPC-A-1细胞、MGC-803细胞和L02细胞生长抑制作用 | 第58-61页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素联合作用效果 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 第二章 和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用诱导鼻咽癌CNE-2细胞周期阻滞和细胞凋亡 | 第66-76页 |
| ·材料与仪器 | 第66-67页 |
| ·细胞株 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·主要实验设备 | 第66-67页 |
| ·方法 | 第67-69页 |
| ·细胞培养 | 第67页 |
| ·流式细胞仪PI单染检测细胞周期 | 第67-68页 |
| ·DAPI染色法观察和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞形态的影响 | 第68页 |
| ·AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞凋亡的影响 | 第68-69页 |
| ·数据分析 | 第69页 |
| ·结果 | 第69-72页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞周期分布的影响 | 第69-70页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞凋亡形态的影响 | 第70-71页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对凋亡CNE-2细胞凋亡的影响 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| ·和厚朴酚与青蒿素联合应用阻滞CNE-2细胞于G_1期 | 第73-74页 |
| ·和厚朴酚与青蒿素联合应用诱导CNE-2细胞凋亡 | 第74-75页 |
| 结论 | 第75-76页 |
| 第三章 和厚朴酚、青蒿素及二者联用诱导CNE-2细胞周期阻滞和凋亡的分子机制 | 第76-94页 |
| ·材料与仪器 | 第76-78页 |
| ·细胞株 | 第76页 |
| ·主要试剂 | 第76-77页 |
| ·主要仪器 | 第77-78页 |
| ·方法 | 第78-81页 |
| ·细胞培养 | 第78页 |
| ·荧光定量PCR检测和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用cyclinD_1、cyclinE_1及P27mRNA的表达 | 第78-80页 |
| ·Western Blot检测cytochrome c、Bax、Bcl-2 caspase-3的表达 | 第80-81页 |
| ·流式细胞术检测Fas和FasL蛋白表达 | 第81页 |
| ·数据分析 | 第81页 |
| ·结果 | 第81-89页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对cyclinD_1 mRNA表达的影响 | 第81-82页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对cyclinE_1 mRNA表达的影响 | 第82-84页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对P27 mRNA表达的影响 | 第84-85页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对cytochrome c表达的影响 | 第85-86页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对CNE-2细胞ΔΨm的影响 | 第86-87页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合作用对Bax/Bcl-2的表达影响 | 第87-88页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合作用对caspase-3表达的影响 | 第88页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合作用对Fas/FasL蛋白表达的影响 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-93页 |
| ·细胞周期素与细胞周期调控 | 第89-91页 |
| ·细胞凋亡 | 第91-93页 |
| 结论 | 第93-94页 |
| 第四章 和厚朴酚、青蒿素及二者联用对鼻咽癌CNE-2细胞COX-2表达的影响 | 第94-102页 |
| ·材料与仪器 | 第94-96页 |
| ·细胞株 | 第94页 |
| ·主要试剂 | 第94-95页 |
| ·主要仪器 | 第95-96页 |
| ·方法 | 第96-99页 |
| ·细胞培养 | 第96页 |
| ·RT-PCR分析COX-2 mRNA表达的变化 | 第96-97页 |
| ·Western Blot检测COX-2蛋白表达的影响 | 第97-98页 |
| ·数据分析 | 第98-99页 |
| ·结果 | 第99-100页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对COX-2蛋白表达的影响 | 第99页 |
| ·和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对COX-2 mRNA表达的影响 | 第99-100页 |
| ·讨论 | 第100-101页 |
| ·COX-2在鼻咽癌中的表达 | 第100-101页 |
| ·和厚朴酚联合青蒿素作用CNE-2细胞对COX-2蛋白表达的影响 | 第101页 |
| 结论 | 第101-102页 |
| 结语 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-109页 |
| 附录一 | 第109-110页 |
| 附录二 | 第110-116页 |
| 附录三 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |