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阿米洛利结合蛋白1在小鼠早期妊娠子宫中的表达与调节

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
1 引言第13-29页
   ·早期妊娠过程及分子调控第13-19页
     ·着床及蜕膜化第13-14页
     ·早期妊娠的分子调控第14-19页
   ·组胺、多胺及相关基因第19-23页
     ·组胺和多胺第19-20页
     ·组胺与多胺的相互作用第20-21页
     ·胺类代谢相关酶第21-22页
     ·组胺、腐胺与γ-氨基丁酸第22-23页
   ·组胺、多胺及代谢相关酶与生殖第23-26页
     ·组胺及相关酶与生殖第23-25页
     ·多胺及相关酶与生殖第25-26页
   ·转录因子 Cebpb第26-28页
     ·转录因子调节机制第26页
     ·Cebpb 与早期妊娠第26-28页
   ·研究的目的及意义第28-29页
2 材料和方法第29-46页
   ·实验动物第29页
   ·实验动物模型第29-30页
     ·早期妊娠第29页
     ·假孕模型第29页
     ·延迟着床及激活第29-30页
     ·卵巢类固醇激素处理第30页
     ·人工蜕膜化第30页
   ·小鼠子宫内膜细胞培养第30-32页
     ·培养前的准备工作第30-31页
     ·小鼠子宫内膜原代基质细胞的分离与培养第31-32页
     ·小鼠子宫基质细胞的体外诱导蜕膜化第32页
     ·小鼠子宫蜕膜细胞的分离与培养第32页
   ·原位杂交第32-37页
     ·cRNA 探针的制备第32-35页
     ·原位杂交实验第35-37页
   ·实时定量PCR第37-39页
     ·RNA 提取第37-38页
     ·反转录第38页
     ·引物序列第38页
     ·实时定量PCR 反应第38-39页
     ·融解曲线分析第39页
   ·Western Blot第39-42页
     ·试剂及溶液第39-40页
     ·样品提取及蛋白浓度测定第40页
     ·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳第40-42页
     ·Immunoblot 及ECL 显影第42页
   ·Cebpb 过表达第42-43页
   ·载体构建与荧光素酶活性分析第43-45页
     ·重组质粒Abp1-pGL3 的构建第43-44页
     ·Abp1 启动子序列定点突变第44-45页
     ·荧光素酶活性分析第45页
   ·数据统计第45-46页
3 结果第46-56页
   ·Abp1 探针制备第46页
   ·Abp1 在早期妊娠围着床期小鼠子宫中的表达第46-47页
     ·原位杂交检测Abp1 在早期妊娠围着床期小鼠子宫中的表达第46页
     ·围着床期Abp1 表达的定量分析第46-47页
   ·活性胚泡对 Abp1 表达的影响第47页
     ·原位杂交检测Abp1 mRNA 在假孕子宫中的表达第47页
     ·原位杂交检测Abp1 mRNA 在延迟着床和激活子宫中的表达第47页
   ·蜕膜化过程中ABP1 的表达第47-50页
     ·原位杂交检测Abp1 mRNA 在体内蜕膜化中的表达第47页
     ·实时定量PCR 检测诱导蜕膜化中Abp1 的表达第47-48页
     ·cAMP 对Abp1 表达的调节第48-50页
     ·阿米洛利(amiloride)对蜕膜化过程的调节第50页
   ·类固醇激素对ABP1 作用第50-52页
     ·实时定量PCR 检测激素对Abp1 mRNA 的调节第51页
     ·Western Blot 检测孕酮对Abp1 蛋白的调节第51-52页
   ·组胺和腐胺对子宫基质细胞中ABP1 表达的影响第52页
     ·组胺和腐胺对细胞中Abp1 mRNA 表达水平的调节第52页
     ·组胺对细胞中Abp1 蛋白表达的调节第52页
   ·ABP1 表达的转录水平调节第52-56页
     ·Abp1 基因启动子序列分析预测第52-54页
     ·Cebpb 对Abp1 表达的调节第54-56页
4 讨论第56-64页
   ·ABP1 在早期妊娠子宫中的表达第56-57页
   ·组胺和多胺对ABP1 表达的调节第57-59页
   ·ABP1 与蜕膜化第59-61页
   ·类固醇激素对ABP1 的调节第61-62页
   ·CEBPB 对ABP1 的调节第62-64页
5 结论第64-65页
致谢第65-66页
参考文献第66-81页
图版第81-84页
攻读博士期间发表的论文第84页

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