| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| ·PCR技术在隐孢子虫研究中的应用 | 第14-18页 |
| ·PCR扩增引物设计 | 第15页 |
| ·隐孢子虫卵囊提纯和基因组DNA纯化 | 第15-17页 |
| ·PCR技术的应用 | 第17-18页 |
| ·动物模型在隐孢子虫研究中的应用 | 第18-19页 |
| ·动物的选择 | 第18-19页 |
| ·实验动物免疫抑制方式的选择 | 第19页 |
| ·动物模型的应用 | 第19页 |
| ·细胞模型在隐孢子虫研究中的应用 | 第19-22页 |
| ·培养细胞的选择 | 第20页 |
| ·培养成分的优化 | 第20页 |
| ·细胞模型的应用 | 第20-22页 |
| 第二章 隐孢子虫SSU rRNA基因的巢式PCR-RFLP分析 | 第22-38页 |
| ·实验仪器和材料 | 第22-25页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·实验耗材 | 第22页 |
| ·实验试剂 | 第22-23页 |
| ·试剂配制 | 第23-24页 |
| ·实验虫种 | 第24-25页 |
| ·载体和菌种 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-29页 |
| ·改良抗酸染色法镜检隐孢子虫卵囊 | 第25页 |
| ·隐孢子虫卵囊提纯 | 第25页 |
| ·卵囊基因组DNA纯化 | 第25页 |
| ·隐孢子虫SSU rRNA基因扩增及RFLP分析 | 第25-27页 |
| ·隐孢子虫Nest-PCR产物克隆及测序 | 第27-29页 |
| ·系统发育比对 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-35页 |
| ·改良抗酸染色法镜检结果 | 第29-30页 |
| ·Nest-PCR检测结果 | 第30-31页 |
| ·PCR-RFLP鉴定隐孢子虫种类 | 第31页 |
| ·SSU rRNA基因序列分析 | 第31-35页 |
| ·讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 隐孢子虫卵囊基因组DNA纯化方法研究 | 第38-50页 |
| ·实验仪器和材料 | 第38-39页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·实验耗材 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38-39页 |
| ·试剂配制 | 第39页 |
| ·实验虫种 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·隐孢子虫卵囊提纯 | 第39页 |
| ·隐孢子虫卵囊裂解及基因组DNA纯化 | 第39-40页 |
| ·隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)基因扩增 | 第40-41页 |
| ·隐孢子虫COWP基因克隆 | 第41页 |
| ·Real-time PCR测定隐孢子虫卵囊COWP基因拷贝数 | 第41-42页 |
| ·统计学分析 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-48页 |
| ·不同方法提纯隐孢子虫卵囊COWP基因PCR扩增结果 | 第42-43页 |
| ·隐孢子虫卵囊COWP_pGEM重组质粒筛选和鉴定 | 第43-44页 |
| ·Real-time PCR测定卵囊COWP基因拷贝数 | 第44-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 安氏隐孢子虫体外培养研究 | 第50-64页 |
| ·实验仪器和材料 | 第50-53页 |
| ·实验仪器 | 第50-51页 |
| ·实验耗材 | 第51页 |
| ·实验试剂 | 第51页 |
| ·试剂配制 | 第51-53页 |
| ·实验虫种 | 第53页 |
| ·实验细胞 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·安氏隐孢子虫卵囊活率检测 | 第53页 |
| ·安氏隐孢子虫卵囊无菌化处理 | 第53页 |
| ·安氏隐孢子虫卵囊脱囊 | 第53-54页 |
| ·不同改良培养液安氏隐孢子虫的培养和收集 | 第54页 |
| ·培养产物安氏隐孢子虫基因组DNA纯化 | 第54页 |
| ·Real-time PCR测定安氏隐孢子虫卵囊COWP基因拷贝数 | 第54页 |
| ·安氏隐孢子虫体外培养形态学观察 | 第54-55页 |
| ·统计学分析 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-62页 |
| ·隐孢子虫卵囊活率检测结果 | 第55-56页 |
| ·Real-time PCR测定不同改良培养液安氏隐孢子虫COWP基因拷贝数 | 第56-59页 |
| ·光学显微观察培养添加物促安氏隐孢子虫增殖 | 第59-60页 |
| ·透射电镜观察虫体在HCT-8细胞内生长 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 银杏酸和硝唑尼特体外抗隐孢子虫作用 | 第64-72页 |
| ·实验仪器和材料 | 第64-65页 |
| ·实验仪器 | 第64页 |
| ·实验耗材 | 第64页 |
| ·实验试剂 | 第64页 |
| ·试剂配制 | 第64-65页 |
| ·实验药物 | 第65页 |
| ·实验虫种 | 第65页 |
| ·实验细胞 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-67页 |
| ·Real-time PCR法测定NTZ和GAs抗隐孢子虫效果 | 第65-66页 |
| ·透射电镜观察NTZ和GAs体外抗安氏隐孢子虫增殖效果 | 第66-67页 |
| ·结果 | 第67-70页 |
| ·NTZ和GAs对HCT-8细胞毒性 | 第67页 |
| ·Real-time PCR法测定NTZ和GAs抗隐孢子虫效果 | 第67-68页 |
| ·透射电子显微镜观察NTZ和GAs体外抗安氏隐孢子虫效果 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 读硕期间发表论文、参加课题 | 第84-85页 |
