缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第一章 引言 | 第13-52页 |
1 组蛋白密码及乙酰化修饰 | 第13-19页 |
·表观遗传学概述 | 第13-14页 |
·组蛋白密码及乙酰化修饰 | 第14-19页 |
2 Sirtuins(Sir2-related enzymes)蛋白家族 | 第19-34页 |
·Sirtuins家族及其系统进化 | 第20-23页 |
·Sir2的结构、去乙酰化机制与生物学功能 | 第23-31页 |
·NAM抑制Sir2的反应机理 | 第31-34页 |
3 原核生物乙酰化研究进展 | 第34-39页 |
·Salmonella enterica乙酰化研究进展 | 第34-38页 |
·其他原核生物乙酰化研究进展 | 第38-39页 |
4 结语 | 第39-40页 |
5 本课题的研究背景与研究内容 | 第40-45页 |
·研究背景简介 | 第40-41页 |
·国际上研究Sir2的主要课题组 | 第41-42页 |
·本课题的研究内容和意义 | 第42-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
第二章 S. enterica乙酰化底物蛋白的蛋白组水平筛选 | 第52-84页 |
1 前言 | 第52-53页 |
2 材料与方法 | 第53-61页 |
·实验材料与试剂 | 第53-57页 |
·试验方法 | 第57-61页 |
3 结果 | 第61-70页 |
·Lysine-乙酰化修饰的蛋白组学研究方法 | 第61-62页 |
·Lysine-乙酰化修饰的质谱鉴定结果 | 第62-69页 |
·S. enterica lysine-乙酰化修饰的免疫印迹结果 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-75页 |
·质谱鉴定乙酰化修饰的可行性 | 第70-72页 |
·S. enterica及其衍生菌Lysine-乙酰化修饰比较 | 第72-74页 |
·S. enterica和哺乳动物细胞Lysine-乙酰化在进化上的保守? | 第74-75页 |
·方法的不足之处 | 第75页 |
5 小结 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-84页 |
第三章 不同代谢途径乙酰化修饰的表型水平研究 | 第84-113页 |
1 前言 | 第84页 |
2 材料与方法 | 第84-92页 |
·实验材料与试剂 | 第84-87页 |
·试验方法 | 第87-92页 |
3 结果 | 第92-108页 |
·选定S. enterica进行乙酰化研究的原因 | 第92页 |
·S. enterica的pat和cobB突变株构建 | 第92-99页 |
·S. enterica及其衍生菌株表型试验 | 第99-105页 |
·S. enterica不同培养基迟滞期表型试验 | 第105-107页 |
·S. enterica表达载体构建 | 第107-108页 |
4 讨论 | 第108-111页 |
·葡萄糖和柠檬酸的代谢通路 | 第108-109页 |
·不同碳源浓度的乙酰化表型 | 第109-111页 |
·添加NAM的乙酰化表型 | 第111页 |
5 小结 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-113页 |
第四章 乙酰化底物蛋白in vitro乙酰化修饰试验 | 第113-144页 |
1 前言 | 第113页 |
2 材料与方法 | 第113-122页 |
·实验材料与试剂 | 第113-117页 |
·试验方法 | 第117-122页 |
3 结果 | 第122-138页 |
·定点突变 | 第122-124页 |
·蛋白表达与纯化 | 第124-125页 |
·in vitro乙酰化/去乙酰化修饰试验 | 第125-130页 |
·乙酰化修饰可能位点的突变与酶活力的关系 | 第130-134页 |
·GapA、AceA和AceK敲除突变株的互补 | 第134-138页 |
4 讨论 | 第138-141页 |
5 小结 | 第141-142页 |
参考文献 | 第142-144页 |
第五章 不同代谢途径乙酰化修饰的遗传水平研究 | 第144-159页 |
1 前言 | 第144-145页 |
2 材料与方法 | 第145-149页 |
·实验材料与试剂 | 第145页 |
·试验方法 | 第145-149页 |
3 结果 | 第149-157页 |
·RNA的抽取 | 第149-150页 |
·管家基因gapA、16S rRNA和目的基因的标准曲线 | 第150-152页 |
·管家基因gapA、16S rRNA和目的基因的溶解曲线 | 第152-153页 |
·目的基因cobB和pat荧光定量分析 | 第153-155页 |
·乙酰化潜在能力分析 | 第155-157页 |
4 讨论 | 第157-158页 |
5 小结 | 第158页 |
参考文献 | 第158-159页 |
发表文章 | 第159-160页 |
致谢 | 第160-162页 |