摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1 引言 | 第8-21页 |
·禽流感病毒分子生物学特性 | 第8-12页 |
·禽流感病毒的组成和复制 | 第8-9页 |
·禽流感病毒致病性的分子基础 | 第9-12页 |
·HA 基因 | 第9-10页 |
·NA 基因 | 第10页 |
·聚合酶复合体结构与功能 | 第10-12页 |
·禽流感流行现状 | 第12-16页 |
·H5 和 H7 亚型禽流感 | 第12-15页 |
·H9N2 亚型禽流感 | 第15-16页 |
·A 型流感病毒的反向遗传技术 | 第16-21页 |
·流感病毒反向遗传技术的发展过程 | 第17-18页 |
·流感病毒反向遗传技术的应用 | 第18-21页 |
·反向遗传技术与流感疫苗研究 | 第18-19页 |
·反向遗传操作与流感病毒生物学研究 | 第19-21页 |
2 H9N2 亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的建立 | 第21-31页 |
·材料 | 第21-22页 |
·病毒 | 第21页 |
·SPF 鸡胚及实验动物 | 第21页 |
·主要试剂和仪器 | 第21页 |
·PBD 载体和引物合成 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·病毒RNA 提取 | 第22页 |
·反转录 | 第22页 |
·PCR 扩增及产物处理 | 第22页 |
·PCR 产物的回收和纯化 | 第22-23页 |
·连接、转化、阳性质粒的筛选 | 第23页 |
·阳性质粒序列测定 PCR 鉴定为阳性的质粒 | 第23-24页 |
·病毒的拯救 | 第24-25页 |
·转染质粒的提取 | 第24页 |
·转染 | 第24-25页 |
·救获病毒的鉴定 | 第25页 |
·动物实验 | 第25-26页 |
·对鸡的致病性试验 | 第25页 |
·对BALB/C 小鼠的致病性试验 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-29页 |
·RT-PCR 扩增产物鉴定结果 | 第26-28页 |
·救获的病毒对鸡的致病性试验 | 第28页 |
·小鼠的致病性试验 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
·试验小结 | 第30-31页 |
3 H9N2 亚型禽流感病毒CKSD/6 感染哺乳动物的分子基础 | 第31-51页 |
·材料和方法 | 第31-34页 |
·病毒 | 第31页 |
·实验动物 | 第31页 |
·试剂和仪器 | 第31页 |
·引物 | 第31页 |
·病毒RNA 提取、反转录与 PCR | 第31-32页 |
·各基因感染性克隆的构建 | 第32页 |
·病毒的救获 | 第32页 |
·救获病毒的鉴定 | 第32-33页 |
·救获病毒的 EID50 测定 | 第33页 |
·病毒对BALB/C 小鼠的感染性试验 | 第33页 |
·嵌合质粒的构建 | 第33-34页 |
·嵌合病毒的救获 | 第34页 |
·嵌合病毒的小鼠感染试验 | 第34页 |
·结果 | 第34-48页 |
·毒株的筛选 | 第34-36页 |
·重组双向表达质粒的构建与鉴定 | 第36-38页 |
·病毒救获与鉴定结果 | 第38-39页 |
·救获病毒EID50 的测定结果 | 第39页 |
·野生病毒和救获重组病毒对BALB/C小鼠的感染性试验 | 第39-44页 |
·嵌合病毒的救获及其小鼠感染试验 | 第44-46页 |
·野生病毒、亲本重组毒、单基因替换病毒对小鼠致病性的比较 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
·试验小结 | 第50-51页 |
4 结论 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
作者简历 | 第59页 |