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H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的建立及对哺乳动物致病性的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 引言第8-21页
   ·禽流感病毒分子生物学特性第8-12页
     ·禽流感病毒的组成和复制第8-9页
     ·禽流感病毒致病性的分子基础第9-12页
       ·HA 基因第9-10页
       ·NA 基因第10页
       ·聚合酶复合体结构与功能第10-12页
   ·禽流感流行现状第12-16页
     ·H5 和 H7 亚型禽流感第12-15页
     ·H9N2 亚型禽流感第15-16页
   ·A 型流感病毒的反向遗传技术第16-21页
     ·流感病毒反向遗传技术的发展过程第17-18页
     ·流感病毒反向遗传技术的应用第18-21页
       ·反向遗传技术与流感疫苗研究第18-19页
       ·反向遗传操作与流感病毒生物学研究第19-21页
2 H9N2 亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的建立第21-31页
   ·材料第21-22页
     ·病毒第21页
     ·SPF 鸡胚及实验动物第21页
     ·主要试剂和仪器第21页
     ·PBD 载体和引物合成第21-22页
   ·方法第22-26页
     ·病毒RNA 提取第22页
     ·反转录第22页
     ·PCR 扩增及产物处理第22页
     ·PCR 产物的回收和纯化第22-23页
     ·连接、转化、阳性质粒的筛选第23页
     ·阳性质粒序列测定 PCR 鉴定为阳性的质粒第23-24页
     ·病毒的拯救第24-25页
       ·转染质粒的提取第24页
       ·转染第24-25页
       ·救获病毒的鉴定第25页
     ·动物实验第25-26页
       ·对鸡的致病性试验第25页
       ·对BALB/C 小鼠的致病性试验第25-26页
   ·结果第26-29页
     ·RT-PCR 扩增产物鉴定结果第26-28页
     ·救获的病毒对鸡的致病性试验第28页
     ·小鼠的致病性试验第28-29页
   ·讨论第29-30页
   ·试验小结第30-31页
3 H9N2 亚型禽流感病毒CKSD/6 感染哺乳动物的分子基础第31-51页
   ·材料和方法第31-34页
     ·病毒第31页
     ·实验动物第31页
     ·试剂和仪器第31页
     ·引物第31页
     ·病毒RNA 提取、反转录与 PCR第31-32页
     ·各基因感染性克隆的构建第32页
     ·病毒的救获第32页
     ·救获病毒的鉴定第32-33页
     ·救获病毒的 EID50 测定第33页
     ·病毒对BALB/C 小鼠的感染性试验第33页
     ·嵌合质粒的构建第33-34页
     ·嵌合病毒的救获第34页
     ·嵌合病毒的小鼠感染试验第34页
   ·结果第34-48页
     ·毒株的筛选第34-36页
     ·重组双向表达质粒的构建与鉴定第36-38页
     ·病毒救获与鉴定结果第38-39页
     ·救获病毒EID50 的测定结果第39页
     ·野生病毒和救获重组病毒对BALB/C小鼠的感染性试验第39-44页
     ·嵌合病毒的救获及其小鼠感染试验第44-46页
     ·野生病毒、亲本重组毒、单基因替换病毒对小鼠致病性的比较第46-48页
   ·讨论第48-50页
   ·试验小结第50-51页
4 结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-59页
作者简历第59页

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