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呼吸道合胞病毒感染巨噬细胞活化Toll样受体3、Toll样受体7介导的抗病毒作用研究

英文缩略词表第1-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-13页
1. 前言第13-14页
2. 材料与方法第14-29页
   ·材料第14-16页
     ·病毒第14-15页
     ·细胞第15页
     ·试剂第15-16页
     ·仪器和设备第16页
   ·方法第16-29页
     ·溶液的配制第16-18页
     ·病毒增殖及病毒感染单位量测定第18-19页
     ·细胞培养与病毒接种实验分组第19页
     ·实验分组第19页
     ·TLR3,TLR7,IRF3,IRF7,IFN-α,IFN-β,RSV F 的mRNA 水平检测第19-22页
       ·RAW264.7 细胞总RNA 提取第19-20页
       ·RNA 定性与定量分析第20页
       ·两步RT-PCR 方法检测第20-22页
       ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR 结果第22页
     ·RAW264.7 巨噬细胞TLR3、TLR7 蛋白的Western blot 检测第22-26页
       ·总蛋白样本的制备第22-23页
       ·Lowery 法蛋白定量第23-24页
       ·蛋白免疫印迹(western blot)法检测TLR3、TLR7 的蛋白表达:.第24-26页
     ·RAW264.7 巨噬细胞培养上清中IFN-α、IFN-β的检测第26-27页
       ·原理第26页
       ·样本的收集第26-27页
       ·检测程序第27页
       ·结果计算与判断第27页
     ·四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测病毒抑制率(%)第27-28页
     ·空斑形成实验(PFU)检测病毒增殖第28-29页
   ·统计学分析第29页
3. 结果第29-55页
   ·病毒半数感染量滴定第29页
   ·TLR3,TLR7,IRF3,IRF7,IFN-α,IFN-β,RSV F 的mRNA水平检测第29-44页
     ·TLR3 mRNA 在各组不同时间点的表达第29-32页
     ·TLR7 mRNA 在各组不同时间点的表达第32-34页
     ·IRF3 mRNA 在各组不同时间点的表达第34-36页
     ·IRF7 mRNA 在各组不同时间点的表达第36-38页
     ·IFN-αmRNA 在各组不同时间点的表达第38-40页
     ·IFN-βmRNA 在各组不同时间点的表达第40-42页
     ·RSV F 基因mRNA 在各组不同时间点的表达第42-44页
   ·RAW264.7 巨噬细胞TLR3、TLR7的蛋白水平变化第44-48页
     ·TLR3 在各组不同时间点的蛋白水平变化第46-47页
     ·TLR7 在各组不同时间点的蛋白水平变化第47-48页
   ·RAW264.7巨噬细胞培养上清IFN-α、IFN-β的变化第48-50页
     ·RAW264.7 巨噬细胞培养上清IFN-α的变化第48-49页
     ·RAW264.7 巨噬细胞培养上清IFN-β的变化第49-50页
   ·四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测病毒抑制率第50-51页
   ·空斑形成实验(PFU)检测各组细胞培养上清病毒滴度第51-55页
4. 讨论第55-59页
5. 结论第59页
参考文献第59-64页
附录第64-65页
致谢第65-66页
综述第66-74页

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