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稻瘟病菌假定几丁质酶基因功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
1 引言第10-19页
   ·稻瘟病菌侵染致病研究第10-12页
     ·稻瘟病菌的侵染过程第10页
     ·稻瘟病菌致病相关的信号途径第10-11页
     ·稻瘟病菌产孢及附着胞形成相关基因研究第11-12页
   ·几丁质酶及其功能研究第12-17页
     ·几丁质及几丁质酶第12页
     ·几丁质酶分类第12-13页
     ·真菌几丁质酶的结构与特性第13-15页
     ·真菌中几丁质酶功能研究第15-17页
       ·酵母几丁质酶的功能研究第15-16页
       ·丝状真菌几丁质酶的功能研究第16-17页
   ·本研究的主要意义第17-19页
2 材料与方法第19-31页
   ·实验材料第19-20页
     ·菌株第19页
     ·质粒载体第19页
     ·供试植物第19页
     ·生化试剂第19页
     ·培养基第19-20页
   ·研究方法第20-31页
     ·稻瘟菌糖苷水解酶18 家族蛋白序列获得及功能域分析第20页
     ·稻瘟菌糖苷水解酶18 家族蛋白性质分析第20页
     ·蛋白序列系统演化关系分析第20页
     ·稻瘟病菌菌丝体、孢子、芽管以及附着胞获得第20-21页
     ·总RNA 的提取与分析第21-22页
     ·RT-PCR第22页
     ·Real-Time PCR第22-24页
     ·稻瘟病菌基因组DNA 的提取第24页
     ·DNA 琼脂糖电泳第24页
     ·PCR 反应第24-25页
     ·基因敲除突变体载体的构建第25-26页
     ·PCR 产物的克隆第26-27页
     ·E.coli DH5α感受态细胞的制备第27页
     ·感受态细胞的转化第27-28页
     ·质粒 DNA 的提取第28页
     ·质粒酶切与连接第28-29页
     ·稻瘟病菌原生质体制备和转化第29页
     ·稻瘟病菌菌落生长速度测定第29页
     ·细胞形态观察第29-30页
     ·细胞壁敏感性分析第30页
     ·洋葱表皮内侵染结构的观察第30页
     ·大麦接种试验第30页
     ·水稻致病性鉴定第30-31页
3 结果与分析第31-57页
   ·稻瘟菌糖苷水解酶18 家族蛋白序列获得及功能域分析第31-32页
   ·稻瘟菌糖苷水解酶18 家族蛋白性质分析第32-33页
   ·稻瘟菌糖苷水解酶18 家族蛋白系统发育关系分析第33-35页
   ·稻瘟病菌糖苷水解酶18 家族蛋白基因的表达分析第35-39页
   ·MGG_07929.6 的功能分析第39-46页
     ·MGG_07929.6 敲除突变体的获得第39-40页
     ·MGG_07927.6 基因敲除突变体菌落生长速率测定第40-41页
     ·MGG_07927.6 基因敲除突变体细胞形态观察第41-43页
     ·MGG_07927.6 基因敲除突变体细胞壁敏感性分析第43-44页
     ·MGG_07927.6 基因敲除突变体侵染洋葱表皮分析第44-45页
     ·MGG_07927.6 基因敲除突变体致病性分析第45-46页
   ·MGG_01247.6 的功能分析第46-53页
     ·MGG_01247.6 敲除突变体的获得第46-47页
     ·MGG_01247.6 基因敲除突变体菌落生长速率测定第47-48页
     ·MGG_01247.6 基因敲除突变体细胞形态观察第48-49页
     ·MGG_01247.6 基因敲除突变体细胞壁敏感性分析第49-51页
     ·MGG_01247.6 基因敲除突变体侵染洋葱表皮分析第51-52页
     ·MGG_01247.6 基因敲除突变体致病性分析第52-53页
   ·MGG_00086.6 的功能分析第53-57页
     ·MGG_00086.6 敲除突变体的获得第53-54页
     ·MGG_00086.6 基因敲除突变体细胞形态观察第54-55页
     ·MGG_00086.6 基因敲除突变体侵染洋葱表皮分析第55-56页
     ·MGG_00086.6 基因敲除突变体致病性分析第56-57页
4 小结和讨论第57-59页
参考文献第59-65页
附录第65-72页
致谢第72页

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