克隆猪印迹基因表达及其甲基化状态研究
| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-41页 |
| ·基因印迹的研究进展 | 第13-20页 |
| ·基因印迹的发现 | 第13-14页 |
| ·印迹基因的基本特征 | 第14-18页 |
| ·基因印迹的分子机制 | 第18-19页 |
| ·基因印迹相关的疾病 | 第19-20页 |
| ·猪的体细胞核移植的研究进展 | 第20-28页 |
| ·体细胞核移植研究的现状 | 第20-21页 |
| ·猪的体细胞核移植的效率 | 第21-22页 |
| ·猪的体细胞核移植主要环节及影响因素 | 第22-26页 |
| ·猪的体细胞核移植的应用价值 | 第26-28页 |
| ·基因印迹与克隆动物发育 | 第28-34页 |
| ·体细胞核移植过程中表观遗传学的变化 | 第28-31页 |
| ·克隆动物发育异常与印迹的相关性 | 第31-32页 |
| ·基因印迹在克隆动物中建立和维持的可能机制 | 第32-34页 |
| ·本课题拟研究印迹基因的研究现状 | 第34-39页 |
| ·IGF2 基因 | 第34-36页 |
| ·H19 基因 | 第36页 |
| ·PEG3 基因 | 第36-37页 |
| ·GRB10 基因 | 第37-38页 |
| ·IGF2 和H19 基因的印迹机制 | 第38-39页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第39-41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-58页 |
| ·实验材料 | 第41-45页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·主要仪器与设备 | 第41页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第41-42页 |
| ·常用试剂及配制 | 第42-45页 |
| ·主要的生物信息学网站及分析软件 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-58页 |
| ·猪的体细胞核移植程序 | 第45-46页 |
| ·Realtime RT-PCR | 第46-50页 |
| ·亚硫酸氢盐修饰后测序的甲基化分析方法 | 第50-55页 |
| ·BrdU 标记 | 第55-56页 |
| ·囊胚内细胞团和滋养层的分离 | 第56页 |
| ·RT-PCR | 第56-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-94页 |
| ·克隆猪印迹基因的表达 | 第58-64页 |
| ·总RNA 的提取 | 第58页 |
| ·Realtime PCR 反应的特异性 | 第58-60页 |
| ·IGF2 基因的表达 | 第60-61页 |
| ·H19 基因的表达 | 第61-62页 |
| ·PEG3 基因的表达 | 第62-63页 |
| ·GRB10 基因的表达 | 第63-64页 |
| ·克隆猪印迹基因的甲基化 | 第64-76页 |
| ·IGF2 和H19 基因DMR 区的确定 | 第64-65页 |
| ·亚硫酸氢盐修饰效率的确定 | 第65-66页 |
| ·IGF2 基因的甲基化 | 第66-71页 |
| ·H19 基因的甲基化 | 第71-76页 |
| ·体细胞核移植胚胎印迹基因的甲基化变化 | 第76-92页 |
| ·细胞培养过程中印迹基因的甲基化变化 | 第76-78页 |
| ·核移植胚胎IGF2 基因甲基化水平 | 第78-82页 |
| ·核移植胚胎H19 基因甲基化水平 | 第82-88页 |
| ·核移植胚胎内细胞团和滋养层印迹基因甲基化水平 | 第88-92页 |
| ·印迹基因的去甲基化与DNA 复制的关系 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-104页 |
| ·印迹基因的研究方法 | 第94-95页 |
| ·印迹基因表达的分析方法 | 第94页 |
| ·印迹基因甲基化的分析方法 | 第94-95页 |
| ·印迹基因在克隆猪中的表达 | 第95-97页 |
| ·印迹基因在克隆猪个体中的表达 | 第95-96页 |
| ·印迹基因在克隆猪胎盘中的表达 | 第96-97页 |
| ·印迹基因在克隆猪中的甲基化 | 第97-99页 |
| ·印迹基因在克隆猪个体中的甲基化 | 第97-98页 |
| ·印迹基因在克隆猪胎盘中的甲基化 | 第98-99页 |
| ·印迹基因在核移植胚胎中的甲基化 | 第99-102页 |
| ·印迹基因在供核体细胞传代中的甲基化变化 | 第99页 |
| ·印迹基因在核移植胚胎中的甲基化变化 | 第99-101页 |
| ·内细胞团和滋养层的分离 | 第101页 |
| ·印迹基因在内细胞团和滋养层的甲基化状态 | 第101-102页 |
| ·印迹基因的去甲基化与DNA 复制的关系 | 第102-104页 |
| 5 结论 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-118页 |
| 附录 | 第118-120页 |
| 攻读博士期间已发表的SCI 论文 | 第120页 |
