| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-19页 |
| ·精液冷冻的历史和应用 | 第10-11页 |
| ·鲜精用于人工授精 | 第10页 |
| ·精液的冷冻保存 | 第10-11页 |
| ·精液冷冻保存程序 | 第11-13页 |
| ·冷冻稀释液 | 第11-12页 |
| ·冷冻保护剂 | 第12页 |
| ·抗氧化剂 | 第12-13页 |
| ·冷冻方法 | 第13页 |
| ·精子获能 | 第13-14页 |
| ·酪氨酸磷酸化 | 第14-16页 |
| ·获能和酪氨酸磷酸化密切相关 | 第16-17页 |
| ·冻融诱导精子凋亡,产生"似获能"变化 | 第17页 |
| ·本研究的内容及目的意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-24页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验设计 | 第19-20页 |
| ·试剂的组成 | 第20页 |
| ·精液稀释液组成 | 第20页 |
| ·防冻剂组成 | 第20页 |
| ·获能培养液组成 | 第20页 |
| ·细管冻精制备及精液冷冻 | 第20-21页 |
| ·细管冻精制备 | 第20页 |
| ·精液解冻 | 第20-21页 |
| ·精子质量分析测定 | 第21-22页 |
| ·活力的测定 | 第21页 |
| ·精子线粒体膜电位(Δψm)测定 | 第21页 |
| ·利用流式细胞术检测猪精子质膜完整率及"似凋亡"的成活精子量 | 第21-22页 |
| ·精子蛋白酪氨酸磷酸化分析检测 | 第22-23页 |
| ·精子蛋白的提取及定量 | 第22-23页 |
| ·精子蛋白SDS-PAGE | 第23页 |
| ·精子酪氨酸磷酸化蛋白检测(Western Bloting) | 第23页 |
| ·精子酪氨酸磷酸化蛋白结果量化转换 | 第23页 |
| ·实验数据统计分析 | 第23-24页 |
| 3 结果及分析 | 第24-43页 |
| ·利用Annexin-V/PI荧光染色法流式细胞仪检测猪精子质膜完整率及早期凋亡率 | 第24-25页 |
| ·不同防冻液对猪冻融精子活力、活率及凋亡状况的影响 | 第25-27页 |
| ·超低温冷冻保存对猪冻融精子线粒体膜电位的影响 | 第27-29页 |
| ·OEP和抗氧化剂α-生育酚(V_E)对猪冻融精子质量的影响 | 第29-32页 |
| ·超低温冷冻保存前后猪精子的酪氨酸磷酸化蛋白变化 | 第32-43页 |
| ·不同获能温度对超低温冷冻前猪精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第32-34页 |
| ·超低温冷冻保存对猪精子蛋白的酪氨酸磷酸化的影响 | 第34-36页 |
| ·冷冻保护剂和抗氧化剂对超低温冷冻保存的猪精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第36-40页 |
| ·超低温冷冻保存对未获能猪精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第40-42页 |
| ·超低温冷冻保存前后各类群精子比率和蛋白酪氨酸磷酸化之间的相关性分析 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-49页 |
| ·超低温冷冻保存能否引起猪冻融精子发生似凋亡变化 | 第43-44页 |
| ·冷冻保护剂和抗氧化剂对猪精子超低温冷冻前后质量的影响 | 第44-45页 |
| ·猪精子冷冻前后酪氨酸磷酸化蛋白的变化 | 第45-47页 |
| ·冷冻保护剂和抗氧化剂对猪精子超低温冷冻前后蛋白酪氨酸磷酸化的影响 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 简写及缩略语 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
