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匙吻鲟雌核发育诱导及其相关机制研究

摘要第1-13页
Abstract第13-17页
第一章 文献综述第17-42页
 1 匙吻鲟的研究概况第17-19页
   ·匙吻鲟的分类地位、分布及经济价值第17-18页
   ·匙吻鲟的生物学特性第18页
   ·匙吻鲟在我国的养殖现状第18-19页
   ·匙吻鲟的资源状况和受胁因素第19页
 2 鱼类雌核发育研究进展第19-31页
   ·鱼类天然雌核发育第19-22页
     ·天然雌核发育的鱼类及其倍性组成第19-20页
     ·鱼类天然雌核发育的原理和机制第20-22页
   ·鱼类人工雌核发育第22-26页
     ·人工雌核发育的原理及诱导方法第22-24页
     ·精子的选用和精子染色体的遗传失活第24-25页
     ·卵子染色体组加倍第25-26页
   ·雌核发育后代的倍性鉴定及遗传分析第26-28页
     ·形态学标记第26-27页
     ·染色体组鉴定第27页
     ·同工酶分析第27页
     ·分子生物学标记第27-28页
   ·雌核发育后代的生物学特性第28-30页
     ·雌核发育后代的存活率第28页
     ·生长与发育第28页
     ·性别第28-30页
     ·繁殖第30页
   ·雌核发育的受精细胞学研究第30-31页
   ·理化处理对精子和卵子超微结构的影响第31页
 3 鲟形目鱼类雌核发育研究进展第31-34页
   ·鲟形目鱼类雌核发育的研究历史和现状第31-33页
   ·雌核发育在鲟形目鱼类遗传育种及保护方面的意义及应用第33-34页
 4 鱼类性别决定机制研究进展第34-40页
   ·鱼类的生理性别和遗传性别第35页
   ·鱼类的性别决定机制第35-40页
     ·基因型性别决定第35-38页
     ·环境型性别决定第38-40页
 5 本研究的目的和意义第40页
 6 本研究的主要内容第40-42页
第二章 匙吻鲟雌核发育二倍体人工诱导及其鉴定第42-73页
 第一节 施氏鲟精子遗传失活条件的筛选第42-50页
   ·前言第42-43页
   ·材料与方法第43-44页
     ·亲鱼来源和精卵的收集第43页
     ·精子的紫外线照射、授精和孵化第43-44页
     ·数据统计第44页
     ·染色体数目检测第44页
   ·结果第44-48页
     ·施氏鲟精子遗传失活条件第44-47页
     ·染色体计数结果第47页
     ·匙吻鲟单倍体与二倍体发育的比较第47-48页
   ·讨论第48-50页
     ·异源精子的选用第48页
     ·精子的遗传失活第48-50页
 第二节 理化方法诱导匙吻鲟雌核发育的研究第50-58页
   ·前言第50页
   ·材料与方法第50-52页
     ·实验鱼来源及亲鱼的催产第50页
     ·热休克参数的筛选第50-51页
     ·异源精子诱导极体雌核发育第51页
     ·数据统计第51-52页
   ·结果与分析第52-56页
     ·热休克诱导条件第52-54页
     ·异源精子诱导能力第54-56页
   ·讨论第56-58页
     ·热休克参数的筛选第56页
     ·施氏鲟精子诱导匙吻鲟雌核发育能力分析第56-57页
     ·染色体自然加倍现象第57-58页
 第三节 雌核发育匙吻鲟的倍性鉴定及遗传分析第58-73页
   ·前言第58页
   ·材料与方法第58-63页
     ·用具和试剂第58页
     ·形态学测量第58-59页
     ·染色体制备第59页
     ·DNA相对含量测定第59页
     ·雌核发育二倍体微卫星标记鉴定第59-63页
   ·结果第63-70页
     ·形态学分析第63-64页
     ·染色体分析第64-67页
     ·DNA含量分析第67-68页
     ·微卫星PCR扩增产物琼脂糖检测第68-69页
     ·微卫星PCR扩增结果及部分图谱第69-70页
     ·雌核发育群体微卫星座位的遗传变异水平及基因一着丝点之间的重组率第70页
   ·讨论第70-73页
     ·流式细胞仪在检测倍性方面的应用第70-71页
     ·微卫星标记在鱼类雌核发育遗传鉴定中的应用第71-72页
     ·雌核发育在匙吻鲟建立纯系上的作用第72页
     ·雌核发育诱导率与雌核后代基因纯合的关系第72-73页
第三章 紫外线辐射对施氏鲟精子超微结构和精核DNA完整性的影响第73-87页
 第一节 紫外线辐射对施氏鲟精子超微结构的影响第73-79页
   ·前言第73页
   ·材料与方法第73-75页
     ·施氏鲟精子的采集第73-74页
     ·紫外线照射精子第74页
     ·精子电镜样品的制备和观察第74页
     ·测量及数据处理第74-75页
   ·结果第75-78页
     ·正常精子的超微结构第75-76页
     ·紫外线照射精子的SEM观察第76页
     ·紫外线照射精子的TEM观察第76-78页
   ·讨论第78-79页
 第二节 紫外照射对施氏鲟精核DNA完整性的影响第79-87页
   ·前言第79-80页
   ·材料和方法第80-82页
     ·主要实验仪器,试剂及主要溶液的配制第80页
     ·精子的采集及镜检第80-81页
     ·施氏鲟精子的紫外线辐照第81页
     ·彗星实验第81-82页
     ·数据分析第82页
   ·结果第82-86页
     ·紫外线照射对施氏鲟精子活力的影响第82-83页
     ·紫外线照射对精子核DNA损伤第83-86页
   ·讨论第86-87页
第四章 人工诱导匙吻鲟雌核发育的受精细胞学及匙吻鲟性别决定机制的初步探讨第87-96页
 第一节 人工诱导匙吻鲟雌核发育的受精细胞学研究第87-92页
   ·前言第87页
   ·材料与方法第87-89页
     ·试剂与仪器第87-88页
     ·亲鱼选择和受精卵的获得第88页
     ·精子遗传失活与卵子染色体加倍处理第88页
     ·样品固定与组织切片第88-89页
   ·实验结果第89-90页
     ·成熟匙吻鲟卵的特征第89页
     ·未受精卵的组织学观察第89-90页
     ·雌核发育匙吻鲟受精卵的核行为第90页
   ·讨论第90-92页
     ·雌核发育中入卵精子的作用第90-91页
     ·匙吻鲟(♀)x施氏鲟(♂)科间杂交受精细胞学和遗传学基础研究第91-92页
 第二节 匙吻鲟性别决定机制的初步探讨第92-96页
   ·前言第92页
   ·材料与方法第92-93页
     ·雌核发育子代的获得第92-93页
     ·子代性别鉴定第93页
     ·数据分析第93页
   ·结果第93-94页
     ·雌核发育匙吻鲟早期性腺发育状况第93-94页
     ·子代性别类型第94页
   ·讨论第94-96页
本论文的主要研究结论与展望第96-98页
参考文献第98-110页
图版Ⅰ 正常的与紫外照射后的施氏鲟精子的形态结构第110-112页
图版Ⅱ 正常施氏鲟精子的超微结构第112-114页
图版Ⅲ 经紫外辐射的施氏鲟精子的超微结构第114-117页
图版 Ⅳ 匙吻鲟雌核发育二倍体卵子的核行为变化第117-119页
致谢第119-120页
附录第120-121页

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