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东乡野生稻cDNA文库构建及有利基因筛选

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-9页
第一章 国内外研究现状第9-19页
   ·野生稻的分布与分类第9-11页
   ·野生稻有利性状的利用第11页
   ·东乡野生稻研究现状第11-16页
     ·东乡野生稻概述第11-12页
     ·东乡野生稻耐寒性研究现状第12-13页
     ·东乡野生稻耐冷性的遗传研究第13-14页
     ·东乡野生稻耐冷性的生理研究第14-15页
     ·东乡野生稻耐冷性的利用研究第15页
     ·东乡野生稻耐旱性研究现状第15-16页
     ·东乡野生稻耐贫瘠研究现状第16页
   ·cDNA文库构建策略第16-18页
   ·酵母细胞的异源功能互补概述第18-19页
第二章 研究的目的和意义第19-20页
第三章 实验材料第20-21页
   ·野生稻,菌株和载体第20页
   ·主要试剂和酶第20页
   ·引物第20-21页
第四章 实验方法第21-28页
   ·冷诱导东乡野生稻cDNA文库构建第21-27页
     ·双元表达载体YPL3的构建第21-22页
     ·东乡野生稻总RNA的提取及质量检测第22页
     ·cDNA合成与纯化第22-24页
       ·cDNA第一链的合成第22-23页
       ·LD-PCR合成eDNA第二链第23页
       ·cDNA的纯化—蛋白酶K消化第23-24页
       ·sfiⅠ酶切消化cDNA第24页
     ·cDNA片段的分级分离第24-25页
     ·cDNA片段和新构建的载体的连接和转化大肠杆菌第25-26页
     ·原始文库的滴度测定及重组率检测第26页
     ·文库的扩增第26-27页
   ·利用酵母功能互补筛选东乡野生稻cDNA文库第27-28页
     ·低温筛选第27页
     ·低磷筛选第27-28页
第五章 结果及分析第28-38页
   ·双元表达载体YPL3的构建结果第28-29页
   ·东乡野生稻总RNA的提取及质量检测第29页
   ·cDNA文库构建及文库质量检测第29-31页
     ·双链cDNA合成、SfiⅠ酶切和分级分离第29-30页
     ·文库的滴度测定、重组率检测及文库插入片断大小检测第30-31页
   ·利用酵母功能互补技术筛选东乡野生稻cDNA文库第31-38页
     ·低温筛选结果第31-36页
     ·低磷筛选结果分析第36-38页
第六章 讨论第38-40页
   ·对cDNA文库的评价第38页
   ·SMART技术在野生稻应用上的分析第38-39页
   ·酵母功能互补策略应用及展望第39-40页
参考文献第40-44页
致谢第44-45页
作者在学期间取得的学术成果第45-46页
附录第46-52页
 附录A 实验方法第46-48页
 附录B 仪器设备第48-49页
 附录C 试剂配方第49-52页

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