摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
第一章 国内外研究现状 | 第9-19页 |
·野生稻的分布与分类 | 第9-11页 |
·野生稻有利性状的利用 | 第11页 |
·东乡野生稻研究现状 | 第11-16页 |
·东乡野生稻概述 | 第11-12页 |
·东乡野生稻耐寒性研究现状 | 第12-13页 |
·东乡野生稻耐冷性的遗传研究 | 第13-14页 |
·东乡野生稻耐冷性的生理研究 | 第14-15页 |
·东乡野生稻耐冷性的利用研究 | 第15页 |
·东乡野生稻耐旱性研究现状 | 第15-16页 |
·东乡野生稻耐贫瘠研究现状 | 第16页 |
·cDNA文库构建策略 | 第16-18页 |
·酵母细胞的异源功能互补概述 | 第18-19页 |
第二章 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第三章 实验材料 | 第20-21页 |
·野生稻,菌株和载体 | 第20页 |
·主要试剂和酶 | 第20页 |
·引物 | 第20-21页 |
第四章 实验方法 | 第21-28页 |
·冷诱导东乡野生稻cDNA文库构建 | 第21-27页 |
·双元表达载体YPL3的构建 | 第21-22页 |
·东乡野生稻总RNA的提取及质量检测 | 第22页 |
·cDNA合成与纯化 | 第22-24页 |
·cDNA第一链的合成 | 第22-23页 |
·LD-PCR合成eDNA第二链 | 第23页 |
·cDNA的纯化—蛋白酶K消化 | 第23-24页 |
·sfiⅠ酶切消化cDNA | 第24页 |
·cDNA片段的分级分离 | 第24-25页 |
·cDNA片段和新构建的载体的连接和转化大肠杆菌 | 第25-26页 |
·原始文库的滴度测定及重组率检测 | 第26页 |
·文库的扩增 | 第26-27页 |
·利用酵母功能互补筛选东乡野生稻cDNA文库 | 第27-28页 |
·低温筛选 | 第27页 |
·低磷筛选 | 第27-28页 |
第五章 结果及分析 | 第28-38页 |
·双元表达载体YPL3的构建结果 | 第28-29页 |
·东乡野生稻总RNA的提取及质量检测 | 第29页 |
·cDNA文库构建及文库质量检测 | 第29-31页 |
·双链cDNA合成、SfiⅠ酶切和分级分离 | 第29-30页 |
·文库的滴度测定、重组率检测及文库插入片断大小检测 | 第30-31页 |
·利用酵母功能互补技术筛选东乡野生稻cDNA文库 | 第31-38页 |
·低温筛选结果 | 第31-36页 |
·低磷筛选结果分析 | 第36-38页 |
第六章 讨论 | 第38-40页 |
·对cDNA文库的评价 | 第38页 |
·SMART技术在野生稻应用上的分析 | 第38-39页 |
·酵母功能互补策略应用及展望 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
作者在学期间取得的学术成果 | 第45-46页 |
附录 | 第46-52页 |
附录A 实验方法 | 第46-48页 |
附录B 仪器设备 | 第48-49页 |
附录C 试剂配方 | 第49-52页 |