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UV胁迫下棉铃虫生殖补偿研究及Hsps基因的克隆与表达

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
第一章 文献综述第14-34页
 1 夜行性昆虫趋光机理研究第14-16页
   ·趋光行为特点第14-15页
   ·视觉生理特性第15-16页
 2 昆虫保幼激素的研究进展第16-25页
   ·保幼激素的种类第16-17页
   ·保幼激素的生理功能第17-20页
     ·保幼激素对幼虫生长发育的调节第17页
     ·保幼激素对昆虫滞育的调节第17-18页
     ·保幼激素对胚胎发育的调节第18页
     ·保幼激素对成虫生殖的调节第18-20页
   ·保幼激素的生物合成与代谢第20-23页
     ·保幼激素的生物合成第20-22页
     ·保幼激素的代谢第22-23页
   ·保幼激素测定方法第23-25页
     ·放射化学测定法第23页
     ·高效液相色谱法第23-24页
     ·气相色谱-质谱联用技术第24页
     ·液相色谱-质谱联用技术第24页
     ·放射免疫法第24-25页
     ·保幼激素结合蛋白测定第25页
 3 昆虫热激蛋白的研究进展第25-32页
   ·热激蛋白的分类与生物学特性第26-27页
   ·热激蛋白的诱导因子第27页
   ·热激蛋白基因第27-28页
   ·热激基因的调控第28-30页
     ·热激基因的转录调控第28-29页
     ·热激蛋白基因的特异表达调控第29-30页
   ·热激蛋白的生物学功能第30-32页
     ·分子伴侣功能第30页
     ·使生物获得耐热性第30-31页
     ·调控细胞骨架第31页
     ·抗氧化作用第31页
     ·抑制细胞凋亡第31-32页
 4 本研究的目的和意义第32-34页
第二章 UV照射对棉铃虫造成的氧化损伤分析第34-40页
 1 前言第34-35页
 2 材料与方法第35-37页
   ·供试昆虫第35页
   ·主要仪器和试剂第35页
   ·UV照射处理第35-36页
   ·样品制备第36页
   ·蛋白含量测定第36页
   ·氧化损伤指标的测定第36页
     ·丙二醛(MDA)含量测定第36页
     ·蛋白质羰基含量测定第36页
   ·数据分析第36-37页
 3 结果与分析第37-38页
   ·UV照射对棉铃虫MDA含量的影响第37页
   ·UV照射对棉铃虫蛋白质羰基含量的影响第37-38页
 4 讨论第38-40页
第三章 UV照射对棉铃虫成虫寿命、生殖力及子代发育的影响第40-50页
 1 前言第40页
 2 材料与方法第40-42页
   ·供试昆虫第40-41页
   ·实验处理第41页
   ·棉铃虫成虫寿命和产卵量测定第41页
   ·棉铃虫子代生长发育情况测定第41页
   ·数据分析第41-42页
 3 结果与分析第42-48页
   ·UV照射对棉铃虫成虫寿命的影响第42-43页
   ·UV照射对棉铃虫每雌总产卵量的影响第43页
   ·UV照射对棉铃虫雌虫平均产卵量的影响第43-44页
   ·UV照射对棉铃虫雌虫遗腹卵量和卵产出率的影响第44-45页
   ·UV照射对棉铃虫子代存活率的影响第45-46页
   ·UV照射对棉铃虫子代发育历期的影响第46-47页
   ·UV照射对棉铃虫子代蛹重的影响第47-48页
 4 讨论第48-50页
第四章 UV照射对棉铃虫体内保幼激素的影响第50-59页
 1 前言第50-51页
 2 材料与方法第51-53页
   ·供试昆虫第51页
   ·仪器与试剂第51页
   ·UV处理第51-52页
   ·保幼激素的提取第52页
   ·保幼激素含量测定第52页
   ·数据分析第52-53页
 3 结果与分析第53-57页
   ·保幼激素滴定度的时间动态第53-54页
   ·UV照射对棉铃虫JHI滴度的影响第54-55页
   ·UV照射对棉铃虫JHII滴度的影响第55-56页
   ·UV照射对棉铃虫JHIII滴度的影响第56-57页
 4 讨论第57-59页
第五章 棉铃虫Hsp90、Hsp70及Hsc70基因在热激和UV胁迫下的表达研究第59-73页
 1 前言第59-60页
 2 材料与方法第60-67页
   ·供试昆虫第60页
   ·仪器与试剂第60-62页
   ·热激处理第62页
   ·UV处理第62页
   ·RNA提取第62-63页
   ·cDNA的合成第63页
   ·探针制备第63-64页
     ·引物设计第63-64页
     ·PCR扩增目标片段第64页
     ·PCR产物的回收第64页
   ·杂交膜的制备第64-66页
     ·RNA电泳(甲醛变性胶电泳)第65页
     ·RNA样品的转膜(虹吸印迹法)第65-66页
   ·Northern杂交第66-67页
     ·探针标记第66页
     ·杂交第66页
     ·免疫检测第66-67页
 3 结果与分析第67-70页
   ·棉铃虫总RNA质量检测第67页
   ·hsp90、hsp70与hsc70片段的PCR扩增第67-68页
   ·hsp90、hsp70与hsc70 PCR产物的回收第68-69页
   ·hsp90、hsp70与hsc70在热激后的表达分析第69页
   ·hsp90、hsp70与hsc70在UV处理后的表达分析第69-70页
 4 讨论第70-73页
第六章 棉铃虫hsp90基因与hsp70基因的克隆与序列分析第73-105页
 1 前言第73页
 2 材料与方法第73-83页
   ·供试昆虫第73-74页
   ·仪器与试剂第74-75页
   ·热激处理第75页
   ·RNA提取第75页
   ·反转录第75-76页
   ·hsp90与hsp7片段的获得第76-77页
     ·引物设计第76页
     ·目标片段PCR扩增第76页
     ·PCR产物的回收第76-77页
     ·目标片段的克隆第77页
     ·目标cDNA片段的序列测定与同源性分析第77页
   ·目标基因3’RACE第77-79页
     ·特异引物设计第77-78页
     ·反转录反应第78页
     ·PCR反应第78-79页
     ·PCR产物的回收第79页
     ·目标片段的克隆与测序第79页
     ·基因片段序列测定第79页
   ·目标基因5’RACE第79-83页
     ·特异引物设计第79页
     ·去磷酸化处理第79-80页
     ·"去帽子"反应第80页
     ·5’RACE Adaptor的连接第80-81页
     ·反转录反应第81页
     ·Outer PCR反应第81-82页
     ·Inner PCR反应第82页
     ·PCR产物的回收第82-83页
     ·目标片段的克隆与测序第83页
   ·核酸序列分析及推导的氨基酸性质第83页
 3 结果与分析第83-103页
   ·棉铃虫总RNA质量检测第83-84页
   ·hsp90与hsp70基因片段的PCR扩增第84页
   ·hsp90与hsp70重组克隆质粒的菌落PCR检测第84-85页
   ·目标cDNA片段的序列测定与同源性分析第85-87页
   ·hsp90和hsp70的3’RACE第87页
   ·hsp90和hsp70的5’RACE第87-88页
   ·棉铃虫hsp90和hsp70 cDNA序列全长的获得第88页
   ·hsp90核酸序列分析及推导的氨基酸序列分析第88-96页
   ·hsp70核酸序列分析及推导的氨基酸序列分析第96-103页
 4 讨论第103-105页
第七章 总结与展望第105-108页
 1 全文总结第105-106页
 2 展望第106-108页
参考文献第108-124页
致谢第124-125页
附录 攻读学位期间发表的论文第125页

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